- 年份
- 2024(6796)
- 2023(10001)
- 2022(8889)
- 2021(8493)
- 2020(7142)
- 2019(16426)
- 2018(16322)
- 2017(31044)
- 2016(17149)
- 2015(19262)
- 2014(19132)
- 2013(18894)
- 2012(17163)
- 2011(15412)
- 2010(14970)
- 2009(13471)
- 2008(12866)
- 2007(10855)
- 2006(9289)
- 2005(7820)
- 学科
- 济(61873)
- 经济(61806)
- 管理(46611)
- 业(43625)
- 企(36967)
- 企业(36967)
- 方法(30575)
- 数学(26480)
- 数学方法(26180)
- 学(16776)
- 农(16354)
- 中国(15184)
- 财(14854)
- 业经(13829)
- 地方(12490)
- 贸(11956)
- 贸易(11951)
- 易(11632)
- 理论(11069)
- 农业(10879)
- 和(10594)
- 环境(10161)
- 技术(9986)
- 务(9970)
- 财务(9911)
- 财务管理(9897)
- 制(9706)
- 企业财务(9375)
- 教育(9019)
- 划(8832)
- 机构
- 大学(237208)
- 学院(236250)
- 管理(93893)
- 济(84059)
- 理学(82502)
- 经济(82060)
- 理学院(81538)
- 管理学(80020)
- 管理学院(79627)
- 研究(78610)
- 中国(54695)
- 科学(54630)
- 京(50099)
- 农(45578)
- 业大(41463)
- 所(40543)
- 研究所(37732)
- 财(36877)
- 农业(36541)
- 中心(35261)
- 江(32458)
- 北京(31120)
- 范(30989)
- 师范(30563)
- 财经(30527)
- 院(28322)
- 经(27832)
- 技术(27830)
- 州(27355)
- 师范大学(24677)
- 基金
- 项目(172981)
- 科学(133960)
- 基金(124102)
- 研究(122025)
- 家(109818)
- 国家(108910)
- 科学基金(92513)
- 社会(72817)
- 省(69636)
- 社会科(68845)
- 社会科学(68827)
- 基金项目(67036)
- 自然(63725)
- 自然科(62206)
- 自然科学(62188)
- 自然科学基金(61034)
- 划(58615)
- 教育(55831)
- 资助(50637)
- 编号(49783)
- 成果(39640)
- 重点(38616)
- 部(36656)
- 创(36354)
- 发(36309)
- 课题(34331)
- 创新(33842)
- 科研(33805)
- 计划(33753)
- 大学(31683)
共检索到325033条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
赵先海 湛欣 邓小梅 袁金英 赵帅
为研究由诱导型启动子Atrd29A介导表达的2个抗胁迫基因MdSPDS1和AtCBF1对转化烟草的影响,对转化双价基因烟草进行了抗逆境试验,主要包括:耐盐性试验、耐渗透性试验和耐寒性试验。结果表明:转基因烟草在添加了20μmol/L Al2(SO4)3、20μmol/L CuSO4、100mmol/L NaCl的培养基上生长时,质量和高度的增加率都大于未转基因烟草,表现出一定的抗盐性。同样,在添加了50mmol/L Mannitol、4mmol/L PEG的培养基上,转基因烟草也得到了比未转基因烟草更好的生长状态。对转基因烟草组培苗进行-4℃耐寒性试验,具有比未转基因烟草更低的细胞死亡和超氧阴...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
赵先海 湛欣 邓小梅 袁金英 赵帅
为研究由诱导型启动子Ａｔｒｄ２９Ａ介导表达的２个抗胁迫基因ＭｄＳＰｄＳ１和ＡｔＣＢＦ１对转化烟草的影响，对转化双价基因烟草进行了抗逆境试验，主要包括：耐盐性试验、耐渗透性试验和耐寒性试验。结果表明：转基因烟草在添加了２０μＭｏｌ／ｌ Ａｌ２（Ｓｏ４）３、２０μＭｏｌ／ｌ ＣｕＳｏ４、１００ＭＭｏｌ／ｌ ＮＡＣｌ的培养基上生长时，质量和高度的增加率都大于未转基因烟草，表现出一定的抗盐性。同样，在添加了５０ＭＭｏｌ／ｌ ＭＡＮＮｉｔｏｌ、４ＭＭｏｌ／ｌ ＰＥＧ的培养基上，转基因烟草也得到了比未转基因烟草更好的生长状态。对转基因烟草组培苗进行－４℃耐寒性试验，具有比未转基因烟草更低的细胞死亡和超氧阴．．．
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王冬梅 王明 李翠萍 苏承刚 张兴国 姚永宏
植物抗寒属于复杂的数量性状。单一基因转化,植株抗寒性提高有限。本文利用拟南芥的AtCBF1~3和AtICE14个基因构建植物表达载体pVCT2276,通过农杆菌介导法转化烟草,获得35株抗性苗。经抗性筛选以及PCR鉴定,8株显示为阳性植株。将其中5株繁殖成株系,为后续的抗寒鉴定奠定基础。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王文秀 顾节清 陈德坤 邓文 潘丽 王宝琴 王永录 张永光
将亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒结构蛋白VP 1基因克隆到植物表达质粒pB in438中,构建了植物表达载体pB in-VP 1,通过根癌农杆菌叶盘转化法,将亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒结构蛋白VP 1基因导入NC 89烟草基因组中,对经卡那霉素筛选获得的20株抗性植株,进行PCR和RT-PCR检测。结果表明,抗性烟草植株中已整合了VP 1基因。
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙晓波 贾新平 梁丽建 邓衍明
为了研究毕氏海蓬子中水通道蛋白基因的功能，利用ＲＡＣＥ技术克隆了毕氏海蓬子经盐诱导后差异表达的水通道蛋白基因ＳｂＰＩＰ１，并利用生物学软件对其编码的氨基酸序列进行了分析。进一步构建ＳｂＰＩＰ１基因的植物高效表达载体ＰＣＡＭｂＩＡ２３０１－ＳｂＰＩＰ１，利用农杆菌介导法转化烟草ＮＣ８９，通过ＫＡＮ抗性、ＰＣＲ及半定量ＲＴ－ＰＣＲ筛选鉴定阳性转基因苗；对转基因烟草进行抗旱性分析，同时测定转基因烟草叶片原生质体在低渗溶液中破裂所需时间，以及在不同浓度ＰＥＧ６０００处理后转基因烟草叶片的相对含水量（ＲＷＣ）、离子外渗率（ＩＬ）、丙二醛（ＭＤＡ）含量和脯氨酸含量，研究毕式海蓬子ＳｂＰＩＰ１基因的功能，分．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
黎定军 赵开军 周清明 罗宽
为选育出高抗真菌病害的烟草新品种 ,利用叶盘法 ,通过农杆菌介导 ,将来自芥菜和橡胶的抗真菌蛋白基因几丁质酶基因和 β 1,3 葡聚糖酶基因转入烟草品种K32 6和红花大金元 ,在含卡那霉素的MS培养基 (MS +NAA0 .1mg/L +6 BA 1.0mg/L为芽诱导培养基 ,根诱导培养基为不含激素的MS)上进行不定芽和根诱导 ,共获耐卡那霉素再生苗 10 1株 .经PCR扩增检测 ,TB 1等 5 7株呈阳性 ,即已成功导入外源目的基因 .初步接种炭疽病菌和黑胫病菌结果表明 ,转基因植株后代具有良好的抗病能力 .
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙晓波 贾新平 刘晓雪 马鸿翔 叶晓青
为了研究盐地碱蓬Ss DREB基因在转基因烟草中的功能,探究转基因烟草的抗逆生理机制,我们构建了SsDREB基因的植物高效表达载体p CAMBIA2301-Ss DREB,并通过农杆菌介导法将其导入烟草NC89中,通过Kan抗性、PCR及RT-PCR筛选鉴定阳性苗;对转基因烟草苗进行高盐、干旱等抗逆性分析,同时测定在不同浓度Na Cl和PEG6000处理后转基因烟草叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、光能转化效率(Fv/Fm)、实际光量子效率(φPSⅡ)以及脯氨酸和可溶性糖的含量。结果表明:通过Kan抗性、PCR及RT-PCR筛选鉴定,最终获得12个株系转基因阳性苗。转基因植株的抗逆性...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
牛毅 李婷 谷春艳 杨雪 钱国良 胡白石 刘凤权 范加勤
自根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)克隆获得attM基因。采用叶盘转化法,农杆菌介导转化烟草,经过卡那霉素抗性筛选获得抗性愈伤组织,对其分化产生的植物株系进行PCR、PCR-Southern和荧光定量PCR及GUS染色检测分析。结果表明:attM基因被成功插入烟草基因组DNA中。在转基因株系中均能够表达,相对表达量最大可达125.8,最小为31.0。以野生型烟草和转pBI121空载体的烟草为对照,分别进行了离体及活体检测试验,结果表明:转attM基因烟草植株对茄科雷尔氏菌引起的青枯病抗性显著。1×107～1×108CFU.mL-1的青枯菌接种离体叶片,野生型烟草和...
关键词：
转attM基因烟草 青枯病 抗病性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
翟晓霏 张文 赵旭勉 王琼 朱元娣
植物DELLA蛋白是赤霉素信号传导途径的反向调节因子,DELLA蛋白突变体导致植株矮化。苹果MdRGL1a是编码苹果DELLA蛋白家族的基因之一,为了研究该基因的生理功能,用从‘威赛克’苹果中克隆的MdRGL1a基因,分别构建GFP瞬时表达载体和植物表达载体。通过基因枪法轰击洋葱表皮细胞,激光共聚焦显微镜下观察MdRGL1a基因的亚细胞定位。利用农杆菌EHA105介导的叶盘法转化烟草(Nicotianna tabacumL.),对转基因烟草进行PCR扩增和GUS染色法检测,观察转基因烟草的形态学性状,利用ELISA方法测定烟草的内源激素水平。结果表明,MdRGL1a-GFP融合蛋白定位在细胞核...
[期刊] 华北农学报
[作者]
罗岸 詹领
为研究脱水素在植物早期胚胎发育中的作用和机理，采用显微操作技术获得烟草卵细胞并构建其ｃ ＤＮＡ文库，从中筛选到一个脱水素基因ＮｔＤＥＨ１。通过ＲＡｃＥ技术获得该基因全长，基因组测序结合生物信息学分析表明该基因拥有一段长度为６５１ ｂｐ的完整开放阅读框和一段５３５ ｂｐ的内含子，编码由２１７个氨基酸残基组成的蛋白质，其理论等电点为５．２７，属于酸性蛋白，且具有一定的亲水性。氨基酸序列比对分析发现在许多物种比如绒毛状烟草、林烟草、甜辣椒、番茄、马铃薯和丹参中都具有与ＮｔＤＥＨ１蛋白非常类似的保守的同源序列，均具有ＳＫ２型脱水素特征。借助ＧＥＮｏｍＥ ｗＡｌＫｉＮＧ技术获取ＮｔＤＥＨ１基因约１ ７０．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙明哲 孙晓丽 于清悦 纪巍 才华 朱延明
【目的】分离GsSNARE1,并分析其耐逆功能,为深入研究GsSNARE1功能及分子机制奠定基础。【方法】以耐盐野生大豆G50109为材料,利用酵母双杂交验证GsSNARE1与GsCBRLK的互作关系,通过real-time PCR分析干旱和盐处理后GsSNARE1的表达特性,对GsSNARE1进行原核表达,分析GsSNARE1抗盐旱功能。【结果】获得与GsCBRLK互作的GsSNARE1,同源克隆其全长CDS,并在酵母体内验证了二者的相互作用;Real-time PCR分析表明GsSNARE1受盐、干旱胁迫诱导,经PLACE分析,发现其启动子中含有多个逆境胁迫相关的顺式作用元件;GsSNAR...
[期刊] 华北农学报
[作者]
贺付蒙 李秀钰 赵潇璨 武佳文 朱元芳 周磊 石奇海 刘娣 李凤兰
为明确马铃薯StPR1基因在抗病中的作用,构建了植物表达载体pBI121-StPR1,并通过农杆菌转化法将StPR1基因导入烟草中,采用不同的致病菌对转基因烟草进行处理,对其抗病性及生理特性进行研究,包括细菌病害软腐病(胡萝卜软腐欧文氏菌、菊欧氏菌和胡萝卜软腐欧文氏菌马铃薯黑胫亚种)和青枯病(茄科雷尔氏菌)、真菌病害干腐病(接骨木镰孢、燕麦镰孢)致病菌。结果表明,接种致病菌后,转基因型烟草和野生型烟草叶片上的病斑直径会随着病菌胁迫时间的延长而增大,并且转基因型烟草病斑直径明显小于野生型烟草;在生理特性分析中,野生型烟草和转基因烟草叶片中生理指标都会随着病菌胁迫时间的延长而呈上升趋势,但转基因烟草SOD、POD和CAT活性较野生型烟草均有不同程度的提高。抗病性及生理特性分析结果均表明,转基因烟草对于致病细菌和真菌均具有更强的抗性,说明StPR1基因在马铃薯植物抗病中起着重要的作用,为PR1基因在植物的抗病方面提供了理论基础。
[期刊] 林业科学
[作者]
陈英 戴咏梅 黄敏仁 诸葛强 王明庥
多基因转化是基因工程研究热点之一。本研究应用DNA重组技术,将两个抗病机制不同,抗菌谱较广的抗病基因(天麻抗真菌蛋白GAFP和兔防御素NP1基因)构建在一个植物表达载体pBin35SGAFP-NP1上,两者具有各自的CaMV35S启动子和Nos终止子。通过根癌农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,PCR和PCR-Southern分析证明已将NP1和GAFP基因整合到烟草基因组中。离体抑菌实验表明转基因植株对真菌和细菌表现出一定的抗性。以上结果表明通过该表达载体进行遗传转化可获得含双价抗病基因植物,并能有效表达,提高转基因植物抗病能力。
[期刊] 华北农学报
[作者]
时焦 韩锦峰 徐宜民 Cooper J I 刘华山
采用荧光定量法对转几丁质酶基因烟草T2植株的几丁质酶活性进行了测定,结果表明,转基因烟草株系的几丁质酶活性明显高于未转基因烟草,同时发现,pH对转基因烟草中的几丁质酶活性有一定的影响。对转基因烟草接种烟草炭疽病菌进行抗病性鉴定。
关键词：
烟草 几丁质酶基因 酶活性 抗病性鉴定
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
马志远 李金岭 冯志珍 段军娜 李晶 成巨龙 安德荣
【目的】筛选对烟草赤星病具有拮抗作用的芽孢杆菌并进行鉴定,同时研究其抗菌作用。【方法】从陕西、云南、湖北和河南4省烟区采集烟草根际土壤和烟叶,从中分离筛选烟草赤星病拮抗芽孢杆菌,并对拮抗性最强的1株芽孢杆菌进行形态学、生理生化特性、16SrDNA序列鉴定及粗提物抑菌作用测定。【结果】从烟草表面及根际土壤分离得到的芽孢杆菌中有10株对烟草赤星病有拮抗效果,将其中效果最好的1株芽孢杆菌定名为M-07C2F,其抑菌条带宽度达14.2mm;通过16SrDNA测序并结合其形态和生理生化特征,鉴定该菌株为解淀粉芽孢杆菌。通过显微观察发现,M-07C2F菌株使烟草赤星病病原真菌的菌丝生长出现畸形,菌丝体内部...
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
