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[期刊] 水产学报  [作者] 肖调义  唐湘北  章怀云  张学文  苏建明  陈开健  许宝红  
The Hu-IFN-αgene,which was transducted into downstream promoter of β-actin gene of common carp(Cyprinus carpio),was recombined by DNA recombination technology.These recombined genes were injected into 1-2 cell fertilized eggs of grass carp(Ctenophatyngodon idellus) by micro-injection technology,we g...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 许宝红  肖调义  唐湘北  章怀云  苏建明  张学文  陈韬  陈立祥  
为快速获得转Hu-IFN-α基因抗病草鱼纯系,从转Hu-IFN-α基因草鱼中,挑选9尾高表达水平的雌鱼作为亲本,经人工雌核发育,得到子一代水花89尾,与普通草鱼的雌核发育结果相比,两者孵化率差异不显著,但畸形率前者比后者高.从雌核发育子一代鱼苗中随机选取45尾鱼苗投喂含甲基睾丸素的饲料,进行生理转雄性试验,获得生理转雄性鱼苗21尾.
[期刊] 水产学报  [作者] 肖亚梅  刘筠  罗琛  
运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 ,对雌核发育草鱼近交F1代、同龄正常两性生殖草鱼、鲤的乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶 (EST)、超氧化物歧化酶 {SOD}以及血红蛋白、血清蛋白进行了分析。结果表明 ,雌核发育草鱼近交F1代EST、SOD同工酶以及血红蛋白电泳图谱与正常两性生殖草鱼电泳图谱存在有一定差异 ;雌核发育草鱼近交F1代的生化性状中未直接体现鲤遗传物质的影响
[期刊] 水产学报  [作者] 张桂蓉  严安生  邹桂伟  罗相忠  黄峰  
采用RAPD技术对两个人工雌核发育系鲢近交F1遗传距离、遗传相似度及群体遗传多样性进行分析, 用普通鲢和鲤作对照。结果表明:GSC Ⅰ、Ⅱ系近交F1系内个体间平均遗传相似度分别为0.972 2、0.980 7,高于对照鲢和鲤的0.954 6、0.872 7;两系近交F1的遗传多样性指数分别为0.062 9、0.052 9,低于对照鲢和鲤的0.101 8和0.213 2,表明GSC Ⅰ、Ⅱ系系内近交的F1保持了较高的纯度。UPGMA和NJ系统树清晰反映了两个系近交F1与对照组个体间的相互关系。26个随机引物的RAPD扩增结果显示,5个引物OPG04、OPG17、OPP01、OPM11、OPM16...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王红权  章怀云  肖调义  唐湘北  苏建明  陈开健  雷威  
为了分析外源基因在转基因鱼F1中的遗传特征和规律,采用PCR检测技术对Hu-IFN-α基因在转基因草鱼及其杂交F1,雌核发育F1中的遗传表达情况进行检测.检测结果为:对1120尾转基因草鱼的PCR阳性检测,检出率为60%;258尾转基因草鱼杂交F1,阳性检测率为53.8%;36尾转基因草鱼雌核发育F1,阳性率为91.7%,说明Hu-IFN-α基因成功导入草鱼中,并能遗传给F1.
[期刊] 中国水产科学  [作者] 王成龙  郑国栋  陈杰  蒋霞云  邹曙明  
为了获得雌核发育ENU诱变草鱼(Cetpharyngodon idellus)群体的相关遗传参数,实验采用Partec Cy Flow倍性分析仪测定ENU诱变草鱼群体(Q群体)和雌核发育ENU诱变草鱼群体(E群体)相对DNA含量分别为24.02和23.80,二者的DNA含量接近,均为二倍体。选取28个微卫星标记对Q群体和E群体多样性进行了检测。结果表明,E群体和Q群体的平均等位基因分别为3.7143、5.1786,平均有效等位基因分别为2.1857、4.0028,平均期望纯合度分别为0.5122、0.28
[期刊] 水产学报  [作者] 全迎春  韩林强  白俊杰  姜鹏  于凌云  樊佳佳  胡重江  
采用微卫星标记检测草鱼群体的遗传多样性,并根据纯合度的变化建立了雌核发育草鱼的鉴别技术。结果显示,8个位点共扩增出33个等位基因;在普通草鱼中,平均纯合度和PIC分别为0.203 1和0.552 8;在雌核发育群体中,则为0.716 1和0.357 2;2个群体间遗传相似度为0.873 3。其中,5个位点在雌核发育草鱼中纯合度明显提高,雌核发育草鱼在这5个位点的扩增总条带数为5~7个,普通草鱼则为8~10个,由此可100%区分2个草鱼群体。通过概率计算,理论鉴别概率达到99.92%。研究表明,雌核发育技术对草鱼的群体遗传结构改变较大,是快速建立纯系、固定优良性状的有效手段;根据群体遗传纯合度的...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王红权  章怀云  张学文  肖调义  苏建明  唐湘北  
为探明人α-干扰素在转Hu-IFN-α基因草鱼F1代中的表达水平,以转Hu-IFN-α基因草鱼F1群体为材料,随机抽取332尾鱼分离其血清后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人α-干扰素基因在转基因草鱼F1代中的表达情况.结果表明:转人α-干扰素基因草鱼F1代表达率为52.1%,表达水平偏低,其表达水平受外界因素影响.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 章怀云  张学文  汪冬庚  肖调义  陈立祥  苏建明  陈开健  
采用先进的人体血液测定仪 ,测定了转 hu- IFN- α基因草鱼和普通草鱼血液的各项生理生化指标 .统计分析结果表明 ,转 hu- IFN- α基因草鱼与普通草鱼血指标值 (红细胞数、白细胞数、血红蛋白、红细胞压积 )之间没有明显差异 ,但血浆生化指标中白蛋白、白蛋白 /球蛋白比值转基因鱼高于普通草鱼 .在转基因组内 ,血常规的歧值较高 ,说明转基因在个体中可能存在着不同的表达水平 .
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 支宇  刘其根  吴嘉敏  刘东  
为了开发浙江青田稻田田鱼优良种质资源,采用紫外线灭活精子、染色体加倍等雌核发育技术,成功获得青田田鱼雌核发育子一代(G_1)。对照普通子一代(F_1),测量和观察160日龄G_1的形态特征和性腺发育情况;在全基因组水平上,利用SNP技术,鉴定和分析G_1遗传物质。结果发现G_1有3种体色,个体间生长差异大,黑色生长最快,平均体质量达392.45 g。G_1平均生长速度慢于F_1。G_1形态参数与F_1存在差异,全长与体高之比差异极显著。G_1个体之间卵巢发育不一致,大个体的卵巢发育类似于F_1,主要为Ⅲ时相的初级卵母细胞。SNP检测发现,通过1次雌核发育技术的种质改良,田鱼遗传物质的纯合性由母本平均38.42%提高到G_1平均61.85%,并有父本遗传物质渗入G_1个体,致使个体在体色和生长速度方面均表现出显著的差异性。本研究成功得到了青田田鱼人工雌核发育群体,为今后青田田鱼育种和种质资源开发奠定了良好基础。
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 支宇  刘其根  吴嘉敏  刘东  
为了开发浙江青田稻田田鱼优良种质资源,本研究采用紫外线灭活精子、染色体加倍等雌核发育技术,成功获得青田田鱼雌核发育子一代(G_(1))。对照普通子一代(F_(1)),测量和观察了160日龄G_(1)的形态特征和性腺发育情况;在全基因组水平上,利用SNP技术,鉴定和分析了G_(1)遗传物质。结果发现G_(1)有3种体色,个体间生长差异大,黑色生长最快,平均体质量达392.45 g。G_(1)平均生长速度慢于F_(1)。G_(1)形态参数与F_(1)存在差异,全长与体高之比差异极显著。G_(1)个体之间卵巢发育不一致,大个体的卵巢发育类似于F_(1),主要为Ⅲ时相的初级卵母细胞。SNP检测发现,通过1次雌核发育技术的种质改良,田鱼遗传物质的纯合性由母本平均38.42%提高到G_(1)平均61.85%,并有父本遗传物质渗入G_(1)个体,致使个体在体色和生长速度方面均表现出显著的差异性。本研究成功得到了青田田鱼人工雌核发育群体,为今后青田田鱼育种和种质资源开发奠定了良好基础。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 朱树人  孟庆磊  安丽  李宁  张龙岗  杨玲  许国晶  付佩胜  
以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)养殖群体(YZ)为母本,以紫外线灭活的鲤鱼精子激活草鱼卵子,冷休克抑制第二极体排出的方法诱导获得异精雌核发育草鱼群体(CH)。利用12对微卫星引物对YZ群体、YS (扬州广陵长江系家鱼原种场引进草鱼群体)群体、CH群体进行PCR扩增并分析,共检测出194个等位基因,其中75.8个有效等位基因。YZ群体、YS群体、CH群体的平均等位基因数依次为13.0、12.6、4.7;平均有效等位基因数依次是7.7、6.6、2.3;平均期望杂合度依次为0.87、0.82、0.56;平均多态信息含量依次为0.84、0.79、0.49。从每个个体在微卫星位点的纯合率看,YZ群体中个体的纯合度在0.00~0.33, YS群体r中个体的纯合度在0.00~0.42, CH群体中个体的纯合度在0.42~0.92。这表明与YZ群体和YS群体相比,CH群体的遗传多样性显著下降,并且在每个位点的纯合率CH群体均高于普通草鱼群体,表明人工诱导减数雌核发育可加速草鱼大多数基因位点的纯合,是快速建立高纯品系的有效手段。同时,本研究筛选并利用微卫星位点组合建立了雌核发育草鱼子代不同家系及其母本亲缘关系的简易、高效鉴别技术,旨在为雌核发育草鱼标记辅助育种打下基础。
[期刊] 水产学报  [作者] 徐湛宁  李福贵  郑国栋  陈杰  蒋霞云  邹曙明  
为了指导团头鲂耐低氧群体的后续选育工作开展,利用筛选出的20对微卫星引物,比较分析了团头鲂耐低氧群体(TN)及其减数分裂(TNM)、有丝分裂(TNDH)雌核发育后代群体的遗传结构;结果显示,团头鲂TN、TNM、TNDH及团头鲂"浦江1号"(TPJ1)对照的平均等位基因数(N_a)分别为3.90、3.55、3.45、4.25,平均观测杂合度(H_o)分别为0.7853、0.3934、0.2768、0.8075,平均期望杂合度(H_e)分别为0.6491、0.5563、0.4870、0.6855,平均多态信息
[期刊] 中国水产科学  [作者] 朱以美  王桂兴  王玉芬  姜宏波  刘海金  
建立牙鲆(Paralichthys olivaceus)雌核发育近交系和杂交系,以两性生殖家系作为对照组,对3个群体的遗传特征和生长进行比较。结果表明,雌核发育近交系、杂交系和对照组的等位基因数分别为41、55、78,平均等位基因数为1.7、2.3、3.3,平均观测杂合度为0.419 2、0.654 9、0.916 7,雌核发育杂交系的上述参数明显高于近交系,但低于对照组。3个群体的平均纯合度分别为0.580 7、0.345 1、0.083 3,个体之间的遗传相似度分别为0.831 2、0.826 1、0.672 7,杂交系小于近交系,但明显高于对照组(P<0.05)。在生长方面,雌核发育杂交...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 苏建明  章怀云  张学文  肖调义  陈韬  陈立祥  陈开健  
采用显微注射法将人α-干扰素抗病基因转移到草鱼受精卵中 ,获得转基因群体 ,通过 PCR及 Southern杂交对转基因草鱼进行分子水平的检测 ,以进一步验证外源人α-干扰素是否整合入草鱼基因组 .结果表明 ,外源人α-干扰素抗病基因已整合入草鱼基因组中 .采用腹腔注射法 ,对转基因鱼进行草鱼出血病病毒接种攻毒试验 ,结果显示转基因草鱼比对照组的抗病毒能力有显著提高
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