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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 许宝红  肖调义  唐湘北  章怀云  苏建明  张学文  陈韬  陈立祥  
为快速获得转Hu-IFN-α基因抗病草鱼纯系,从转Hu-IFN-α基因草鱼中,挑选9尾高表达水平的雌鱼作为亲本,经人工雌核发育,得到子一代水花89尾,与普通草鱼的雌核发育结果相比,两者孵化率差异不显著,但畸形率前者比后者高.从雌核发育子一代鱼苗中随机选取45尾鱼苗投喂含甲基睾丸素的饲料,进行生理转雄性试验,获得生理转雄性鱼苗21尾.
[期刊] 水产学报  [作者] 肖调义  唐湘北  章怀云  张学文  苏建明  陈开健  许宝红  
The Hu-IFN-αgene,which was transducted into downstream promoter of β-actin gene of common carp(Cyprinus carpio),was recombined by DNA recombination technology.These recombined genes were injected into 1-2 cell fertilized eggs of grass carp(Ctenophatyngodon idellus) by micro-injection technology,we g...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 章怀云  张学文  汪冬庚  肖调义  陈立祥  苏建明  陈开健  
采用先进的人体血液测定仪 ,测定了转 hu- IFN- α基因草鱼和普通草鱼血液的各项生理生化指标 .统计分析结果表明 ,转 hu- IFN- α基因草鱼与普通草鱼血指标值 (红细胞数、白细胞数、血红蛋白、红细胞压积 )之间没有明显差异 ,但血浆生化指标中白蛋白、白蛋白 /球蛋白比值转基因鱼高于普通草鱼 .在转基因组内 ,血常规的歧值较高 ,说明转基因在个体中可能存在着不同的表达水平 .
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王红权  章怀云  肖调义  唐湘北  苏建明  陈开健  雷威  
为了分析外源基因在转基因鱼F1中的遗传特征和规律,采用PCR检测技术对Hu-IFN-α基因在转基因草鱼及其杂交F1,雌核发育F1中的遗传表达情况进行检测.检测结果为:对1120尾转基因草鱼的PCR阳性检测,检出率为60%;258尾转基因草鱼杂交F1,阳性检测率为53.8%;36尾转基因草鱼雌核发育F1,阳性率为91.7%,说明Hu-IFN-α基因成功导入草鱼中,并能遗传给F1.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 苏建明  章怀云  张学文  肖调义  陈韬  陈立祥  陈开健  
采用显微注射法将人α-干扰素抗病基因转移到草鱼受精卵中 ,获得转基因群体 ,通过 PCR及 Southern杂交对转基因草鱼进行分子水平的检测 ,以进一步验证外源人α-干扰素是否整合入草鱼基因组 .结果表明 ,外源人α-干扰素抗病基因已整合入草鱼基因组中 .采用腹腔注射法 ,对转基因鱼进行草鱼出血病病毒接种攻毒试验 ,结果显示转基因草鱼比对照组的抗病毒能力有显著提高
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王红权  章怀云  张学文  肖调义  苏建明  唐湘北  
为探明人α-干扰素在转Hu-IFN-α基因草鱼F1代中的表达水平,以转Hu-IFN-α基因草鱼F1群体为材料,随机抽取332尾鱼分离其血清后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人α-干扰素基因在转基因草鱼F1代中的表达情况.结果表明:转人α-干扰素基因草鱼F1代表达率为52.1%,表达水平偏低,其表达水平受外界因素影响.
[期刊] 中国水产科学  [作者] 王成龙  郑国栋  陈杰  蒋霞云  邹曙明  
为了获得雌核发育ENU诱变草鱼(Cetpharyngodon idellus)群体的相关遗传参数,实验采用Partec Cy Flow倍性分析仪测定ENU诱变草鱼群体(Q群体)和雌核发育ENU诱变草鱼群体(E群体)相对DNA含量分别为24.02和23.80,二者的DNA含量接近,均为二倍体。选取28个微卫星标记对Q群体和E群体多样性进行了检测。结果表明,E群体和Q群体的平均等位基因分别为3.7143、5.1786,平均有效等位基因分别为2.1857、4.0028,平均期望纯合度分别为0.5122、0.28
[期刊] 水产学报  [作者] 肖亚梅  刘筠  罗琛  
运用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术 ,对雌核发育草鱼近交F1代、同龄正常两性生殖草鱼、鲤的乳酸脱氢酶(LDH)、酯酶 (EST)、超氧化物歧化酶 {SOD}以及血红蛋白、血清蛋白进行了分析。结果表明 ,雌核发育草鱼近交F1代EST、SOD同工酶以及血红蛋白电泳图谱与正常两性生殖草鱼电泳图谱存在有一定差异 ;雌核发育草鱼近交F1代的生化性状中未直接体现鲤遗传物质的影响
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈开健  章怀云  肖调义  张学文  苏建民  陈韬  陈立祥  王晓清  
采用显微注射法将人α干扰素(HuIFNα)重组基因转入草鱼Ⅰ~Ⅱ细胞期的受精卵,然后对转化培育出的草鱼个体提取血液总DNA进行PCR和Southern杂交检测及ELISA检测,以研究重组基因在受体基因组上的整合和表达情况。实验结果显示:HuIFNα重组基因能整合在草鱼基因组上,但其整合是随机的,整合位点没有固定区域,而且整合在受体草鱼基因组上的HuIFNα基因的表达率较低,表达水平在个体间有很大差异。大部分转基因个体外源基因表达水平集中在39~74pg/mL之间,表达最高个体HuIFNα浓度为1450pg/mL。
[期刊] 水产学报  [作者] 杨育凯  谢仰杰  蔡明夷  简林江  陈庆凯  楼宝  王志勇  
为建立黄姑鱼雌核发育诱导方法,实验利用紫外线照射使黄姑鱼精子遗传失活,与卵子授精后再通过冷休克抑制极体排放进行倍性恢复,成功诱导出黄姑鱼雌核发育二倍体。精子经强度为3 800μW/(cm2.s)的紫外线照射10~100 s,受精卵孵化率呈现明显的Hertwig效应;当照射时长达到60 s以上,各实验组全部孵出仔鱼均呈现单倍体综合症。精子的紫外线照射时间、受精卵冷休克起始和持续时间等三因素三水平正交实验结果表明,精子经紫外线照射60 s,受精2 min后卵子在3~4℃海水中持续冷休克10 min为最佳诱导条件组合,可以获得最高的孵化率(16%)。最佳组合仔鱼形态和细胞相对DNA含量与正常二倍体一...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 闫学春  张研  孙效文  梁利群  曹顶臣  
通过热休克法抑制第一次有丝分裂(抑制第一次卵裂)和减数分裂(抑制第二极体排除),分别获得鲤(Cyprinus carpioL.)的2个雌核发育家系。利用13对具有高多态性的微卫星分子标记,分别对2个雌核发育家系的观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、等位基因频率(P)和有效等位基因数(Ne)等进行遗传背景调查。结果表明,抑制第一次有丝分裂家系的等位基因频率为0.063~1.000,平均观测杂合度为0.22,平均期望杂合度为0.24,平均有效等位基因数为1.41,该家系在6个微卫星座位上表现为纯合子,在7个微卫星座位上表现为杂合子,其中位点MFW4完全表现为杂合子;抑制减数分裂的等位基因频率为...
[期刊] 水产学报  [作者] 全迎春  韩林强  白俊杰  姜鹏  于凌云  樊佳佳  胡重江  
采用微卫星标记检测草鱼群体的遗传多样性,并根据纯合度的变化建立了雌核发育草鱼的鉴别技术。结果显示,8个位点共扩增出33个等位基因;在普通草鱼中,平均纯合度和PIC分别为0.203 1和0.552 8;在雌核发育群体中,则为0.716 1和0.357 2;2个群体间遗传相似度为0.873 3。其中,5个位点在雌核发育草鱼中纯合度明显提高,雌核发育草鱼在这5个位点的扩增总条带数为5~7个,普通草鱼则为8~10个,由此可100%区分2个草鱼群体。通过概率计算,理论鉴别概率达到99.92%。研究表明,雌核发育技术对草鱼的群体遗传结构改变较大,是快速建立纯系、固定优良性状的有效手段;根据群体遗传纯合度的...
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 吴萍  
[期刊] 淡水渔业  [作者] 潘光碧  邹桂伟  罗相忠  张春  
进行了雌核发育鲢两个品系间和雌核发育链与其半同胞鲢及普通鲢的生长对比 ,并与标准鲢(李思发等 1998)进行了生长、体型比较。结果表明 ,雌核发育鲢比半同胞鲢体长增长快 13 3% ,体重增长快5 1% ,差异十分显著 ;雌核组比普通鲢组体长增长快 3 7%~ 2 5 3% ,体重增长快 6 7%~ 90 1% ,雌核发育鲢品系间也存在明显的生长差异 ,本试验中雌核发育Ⅱ系 (GyS2 Ⅱ )比Ⅰ系 (GyS2 Ⅰ )体长增长快 8 6 % ,体重增长快 2 8%。在相同体长条件下 ,雌核发育鲢比标准鲢体重大 10 6 %~ 31 9% ,平均大 15 6 % ,雌核发育鲢具有背高、...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 徐永福  王金龙  伍远安  李传武  何志刚  王卫民  
本研究在已成功利用鳙(Aristichthys nobilis)(♀)×兴国红鲤(cyprinus cArpio VAr.Xingguo)(♂)远缘杂交诱导鳙异源雌核发育的基础上,测定了鳙异源雌核发育子代及其母本鳙和父本兴国红鲤3组实验鱼的7项可量性状,计算其框架系数,并采用单因素方差分析、判别分析、主成分分析和聚类分析对三组鱼框架系数的差异和距离进行了分析。结果显示3组鱼多项框架系数间均具显著差异,雌核发育子代较母本表现为体型更高,头更长。判别分析能将3组鱼明显判别分为3个区域,其中雌核发育子代和兴国红鲤的判别准确率均为100%,母本鳙群体判别准确率为94.4%,总判别准确率为97.9%。主...
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