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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
苏建明 章怀云 张学文 肖调义 陈韬 陈立祥 陈开健
采用显微注射法将人α-干扰素抗病基因转移到草鱼受精卵中 ,获得转基因群体 ,通过 PCR及 Southern杂交对转基因草鱼进行分子水平的检测 ,以进一步验证外源人α-干扰素是否整合入草鱼基因组 .结果表明 ,外源人α-干扰素抗病基因已整合入草鱼基因组中 .采用腹腔注射法 ,对转基因鱼进行草鱼出血病病毒接种攻毒试验 ,结果显示转基因草鱼比对照组的抗病毒能力有显著提高
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王红权 章怀云 肖调义 唐湘北 苏建明 陈开健 雷威
为了分析外源基因在转基因鱼F1中的遗传特征和规律,采用PCR检测技术对Hu-IFN-α基因在转基因草鱼及其杂交F1,雌核发育F1中的遗传表达情况进行检测.检测结果为:对1120尾转基因草鱼的PCR阳性检测,检出率为60%;258尾转基因草鱼杂交F1,阳性检测率为53.8%;36尾转基因草鱼雌核发育F1,阳性率为91.7%,说明Hu-IFN-α基因成功导入草鱼中,并能遗传给F1.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
许宝红 肖调义 唐湘北 章怀云 苏建明 张学文 陈韬 陈立祥
为快速获得转Hu-IFN-α基因抗病草鱼纯系,从转Hu-IFN-α基因草鱼中,挑选9尾高表达水平的雌鱼作为亲本,经人工雌核发育,得到子一代水花89尾,与普通草鱼的雌核发育结果相比,两者孵化率差异不显著,但畸形率前者比后者高.从雌核发育子一代鱼苗中随机选取45尾鱼苗投喂含甲基睾丸素的饲料,进行生理转雄性试验,获得生理转雄性鱼苗21尾.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
章怀云 张学文 汪冬庚 肖调义 陈立祥 苏建明 陈开健
采用先进的人体血液测定仪 ,测定了转 hu- IFN- α基因草鱼和普通草鱼血液的各项生理生化指标 .统计分析结果表明 ,转 hu- IFN- α基因草鱼与普通草鱼血指标值 (红细胞数、白细胞数、血红蛋白、红细胞压积 )之间没有明显差异 ,但血浆生化指标中白蛋白、白蛋白 /球蛋白比值转基因鱼高于普通草鱼 .在转基因组内 ,血常规的歧值较高 ,说明转基因在个体中可能存在着不同的表达水平 .
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王红权 章怀云 张学文 肖调义 苏建明 唐湘北
为探明人α-干扰素在转Hu-IFN-α基因草鱼F1代中的表达水平,以转Hu-IFN-α基因草鱼F1群体为材料,随机抽取332尾鱼分离其血清后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人α-干扰素基因在转基因草鱼F1代中的表达情况.结果表明:转人α-干扰素基因草鱼F1代表达率为52.1%,表达水平偏低,其表达水平受外界因素影响.
[期刊] 淡水渔业
[作者]
陈开健 章怀云 肖调义 张学文 苏建民 陈韬 陈立祥 王晓清
采用显微注射法将人α干扰素(HuIFNα)重组基因转入草鱼Ⅰ～Ⅱ细胞期的受精卵,然后对转化培育出的草鱼个体提取血液总DNA进行PCR和Southern杂交检测及ELISA检测,以研究重组基因在受体基因组上的整合和表达情况。实验结果显示:HuIFNα重组基因能整合在草鱼基因组上,但其整合是随机的,整合位点没有固定区域,而且整合在受体草鱼基因组上的HuIFNα基因的表达率较低,表达水平在个体间有很大差异。大部分转基因个体外源基因表达水平集中在39～74pg/mL之间,表达最高个体HuIFNα浓度为1450pg/mL。
[期刊] 水产学报
[作者]
肖调义 唐湘北 章怀云 张学文 苏建明 陈开健 许宝红
The Hu-IFN-αgene,which was transducted into downstream promoter of β-actin gene of common carp(Cyprinus carpio),was recombined by DNA recombination technology.These recombined genes were injected into 1-2 cell fertilized eggs of grass carp(Ctenophatyngodon idellus) by micro-injection technology,we g...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈开健 章怀云 张学文 肖调义 陈立祥 苏建民 汪冬庚
为研究转人 -α-干扰素基因草鱼的食用安全性 ,以转人 -α干扰素基因草鱼肉糜饲喂大鼠 ,在 30 d内对试验鼠进行了临床观察 .试验结束时 ,对试验鼠进行了血液学检测、解剖学观察和组织学检查 .结果表明 ,饲喂转人 -α干扰素基因草鱼肉糜的大鼠临床表现正常 ,血液学指标、解剖学形态和重要器官组织学图像与对照组动物没有显著差别
关键词：
转人-α-干扰素基因草鱼 大鼠 饲喂试验
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨丽娜 刘兴娜 卢宝慧 吴庠玉 白庆荣 王雪 高洁
【目的】 将来源于大豆细菌性斑点病菌（Pseudomonas syringae pv.glycinea）Psg12菌株的hrpZPsg12基因导入烟草“云烟87”，对转化植株进行烟草普通花叶病毒（TMV）、烟草马铃薯Y病毒病（PVY）和烟草野火病（Pseudomonas syringae pv.tabaci）的抗病性鉴定，为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法，将hrpZPsg12基因转入烟草“云烟87”中，对T0和T1代转基因植株进行PCR检测、Southern杂交，并对T1代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】hrpZPsg12基因成功转入“云烟87”中，PCR检测表明共获...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨丽娜 刘兴娜 卢宝慧 吴庠玉 白庆荣 王雪 高洁
【目的】 将来源于大豆细菌性斑点病菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ Ｐｖ．ｇｌｙｃｉｎｅａ）Ｐｓｇ１２菌株的ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因导入烟草“云烟８７”，对转化植株进行烟草普通花叶病毒（Ｔｍｖ）、烟草马铃薯ｙ病毒病（Ｐｖｙ）和烟草野火病（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ Ｐｖ．Ｔａｂａｃｉ）的抗病性鉴定，为培育多抗烟草新品系奠定基础。【方法】采用农杆菌介导法，将ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因转入烟草“云烟８７”中，对Ｔ０和Ｔ１代转基因植株进行Ｐｃｒ检测、ｓｏｕＴｈｅｒｎ杂交，并对Ｔ１代转基因植株的抗病性进行评价。【结果】ｈｒＰＺＰｓｇ１２基因成功转入“云烟８７”中，Ｐｃｒ检测表明共获．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
杨康 王艺雅 刘铁柱 李同明 季相山 王慧
为探讨Nramp基因在草鱼(Ctenopharyngodon idellus)免疫应答中的作用,采用实时荧光定量PCR技术,对比研究了Nramp基因在草鱼不同发育阶段、不同组织及嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒感染后4个组织不同时间的差异表达,并利用原核表达技术对草鱼Nramp基因ORF区642 bp的目的片段进行蛋白表达,获得40 k D的融合蛋白。实时荧光定量PCR分析结果表明,Nramp在草鱼胚胎发育过程中的表达量随着发育时间的增加而逐渐增强,在幼鱼期的表达量达到最大。成年健康草鱼不同组织中的表达量差异显著(P<0.05),在肝中的表达量最高,其次是在脾、头肾...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
范玉顶 徐进 罗晓松 周勇 肖艺 曾令兵
天然抗性相关巨噬蛋白(Nramp)家族是一类抑制胞内寄生菌侵染的天然免疫相关蛋白。本研究克隆了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)Nramp基因并进行了表达分析。该基因cDNA序列全长为3 158 bp,编码1个含544个氨基酸的蛋白。该蛋白含有Nramp家族的特征序列:包含12个跨膜区(TM)、1个由20个氨基酸残基组成的胞质内转运结构域(CTM)。草鱼Nramp同其他16个物种的Nramp氨基酸序列同源性在62.5%～90.2%之间。草鱼Nramp基因cDNA的独特结构是其3′末端非翻译区(UTR)和5′UTR各有1个脊椎动物Nramp2中的铁反应控制蛋白结合位点(IR...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
祁建民 徐建堂 林荔辉 陶爱芬 兰涛 吴建梅
利用花粉管通道法将抗虫质粒DNA导入受体红麻品种福红952,在受体品种中获得Bt抗虫目的基因的表达.分别用PCR和Southern杂交技术,对所转化的红麻转基因4个世代的株系进行分子验证,结果表明:4个世代中都检测到B t抗虫目的基因片段,说明外源基因已经整合到红麻的基因组中并获得了稳定遗传.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
洪彦彬 杨祁云 林佩珍 王慧 陈志强
对空间诱变的丽江新团黑谷SP1~SP3代株系稻瘟病抗性变异进行了分析。结果表明,经过空间诱变后,510株SP1代植株中有70株对接种的GD 531菌株由感病变为抗病,占总株数的13.7%;SP2代多数抗病株系对接种菌株的抗感分离比例符合3∶1或15∶1的规律,说明SP2代多数抗病株系受1对或2对显性主效基因控制;SP3代受1对抗病主效基因控制的抗病株系抗性继续分离,而受2对抗病主效基因控制的抗病株系抗性基本稳定;利用LR 8-SP2群体对丽江新团黑谷经过空间诱变后产生的抗病基因进行分子标记,结果发现该基因位于第9染色体上,与微卫星标记RM 409连锁。
[期刊] 草业科学
[作者]
刘苗苗 程家慧 林海燕 沈志成 王志勇 林朝阳
抗草甘膦转基因玉米(Zea mays)能有效降低杂草防治成本,具有重要的应用前景。浙江大学转基因抗虫植物和生物安全实验室前期通过农杆菌介导法,以玉米Hi-Ⅱ品种为受体导入新型抗草甘膦基因G10evo,获得不同的抗草甘膦玉米转化系。在此基础上,筛选了具有良好草甘膦抗性的转基因玉米转化系AG16。本研究利用PCR、Western杂交、Southern杂交、ELISA等方法对AG16进行分子特征检测,并对AG16的草甘膦抗性水平进行鉴定。结果表明,G10evo在AG16中为单拷贝插入;G10evo蛋白在AG16
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