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[期刊] 水产学报  [作者] 孙效文  梁利群  闫学春  曹顶臣  
报道了转生长激素基因鲤阳性群体的建立和"超级鲤"的获得。给出了"超级鲤"和对照组连续4年的生长实验结果及"超级鲤"子代连续3年的生长对照的体重数据。结果显示,外源生长激素基因对受体鲤具有快速生长效应,但具有这种超速生长作用的个体在转基因鲤群体中占极少数。此效应能传递给子代,子代中快速生长个体的比例大大高于转基因实验群体。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 丁洁  顾继锐  伍翠芳  李永文  张涛  吴江  谢显连  徐恒  
用从斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)cDNA文库克隆到的生长激素基因,与鲤β肌蛋白启动子、大麻哈鱼生长激素基因的poly(A)终止信号序列等调控元件共同构建了表达重组质粒pFV2 cfGH。提取重组质粒,用精子载体法导入中华倒刺鲃(Spinibarbus sinensis)的受精卵中,经孵化培养成转基因成鱼。抽提423尾转基因实验鱼血总DNA,经PCR检测表明:斑点叉尾鮰生长激素基因已导入中华倒刺鲃基因组中,导入率为17.26%。同时通过RT-PCR技术检测阳性中华倒刺鲃中生长激素基因的表达情况。
[期刊] 水产学报  [作者] 吴婷婷  杨弘  董在杰  夏德全  史瀛仙  季肖东  沈玉  孙伟勇  
采用显微注射方法,将带有小鼠MT-1基因启动顺序与人生长激素hGH基因顺序重组的线状DNA片段,注入团头鲂和鲤的受精卵,获得成活的实验鱼。经斑点、Southern杂交、Northern杂交、放射免疫和酶联等方法检测,表明外源基因在受体鱼中得到整合、转录、翻译和表达,并具促生长效应。转基因雌鱼和雄鱼有性繁殖所获得的子鱼带有外源基因,表明外源基因能通过性细胞传递给子代,并仍具促生长效应。
[期刊] 水产学报  [作者] 马广智  林浩然  张为民  
采用CdCl2浸没法处理鲤,研究镉对鲤血清促性腺激素(GtH)和生长激素(GH)水平的影响。结果表明:较高浓度镉(CdCl29mg/L)处理引起血清GtH水平降低,GH水平升高;提高水中钙浓度,能使由镉引起的GtH水平的降低恢复到正常水平,并对镉引起的GH水平升高起延迟作用;镉处理使鲤对LHRH-A刺激GtH分泌的反应性下降,提高水中钙浓度也不能恢复正常。实验结果提示:镉引起的GtH和GH的变化可能主要是镉干扰了钙的生理作用。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 俞菊华  李红霞  李建林  唐永凯  董在杰  
GHS-R基因在哺乳类为候选的肥胖和生长数量性状位点。本实验使用RT-PCR及PCR的方法,从建鲤(Cyprinus carpio var.jian)分离到2个jlGHS-R1s,称为jlGHS-R1a和jlGHS-R1b(分别简称1a和1b)。jlGHS-R1s的阅读框编码360个氨基酸,两者间相似性高达96%;另外还存在2个jlGHS-R1s的转录变体(分别简称1a'和1b'),选择性切割了翻译起始碱基后第490-680 nt的191 bp片段,该片段两端碱基分别为gt-ag,这种选择性切割导致翻译提前终止,仅翻译184个氨基酸,包括前面3个半跨膜区,这与已报道的罗非鱼等的保留内含子的转录...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 赵茹茜  
鸡生长激素基因表达及分泌调控的研究进展根据中德农业科技合作的协议,笔者于1994年3月赴德国联邦农业科学院Cede/J’动物研究所Dr.R.Grossmann的实验室从事合作科研。研究课题为:鸡生长激素基因表达及分泌的调控。实验采用两种不同品种的鸡—...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 朱文进  陈娟  关学敏  吴建华  耿立英  杨彩然  宋瑜  张艳英  
【目的】克隆驴生长激素基因DNA和cDNA的全序列,分析其序列和cDNA编码的蛋白序列特征及其在不同物种中的遗传差异。【方法】根据不同物种同一基因序列的同源性比对结果设计引物,应用RT-PCR和PCR技术克隆基因,用生物信息学方法对获得的DNA和cDNA及推定的氨基酸序列进行分析。【结果】从驴肝组织和血液中分别得到驴GH基因全序列1 928 bp和包括完整的编码区的cDNA序列706 bp,两者序列比对后证明驴GH基因DNA序列由5个外显子和4个内含子组成,编码216个氨基酸的GH前体蛋白,其中包括26个氨基酸的信号肽和190个氨基酸的成熟肽。序列比较结果表明,驴GH基因的序列与马同源性最高,...
[期刊] 水产学报  [作者] 贡成良  曹广力  薛仁宇  张传溪  
序列分析表明:欧洲鳗鲡GH基因从ATG到TAG共计2393bp,有4个外显子、3个内含子,推测编码209个氨基酸。第一内含子存在3个重复单体构成的微卫星序列。同源性分析表明:欧洲鳗鲡GH可分为5个结构域,GDI-GD4区域与GH的活性有关,为GH与其受体专一性结合区域,GD5区域与GH分子的结构、稳定性有关。进化分析表明,鱼类GH分可成3个不同的组,欧洲鳗鲡GH基因属Ⅰ组,Ⅱ组可分含4个内含子基因及含5个内含子基因二个亚组,Ⅲ组GH基因有5个内含子。推测原始的GH基因在进化过程中,通过丢失或增加内含子导致基因歧化。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 马晓  胡毅  熊钢  何湘蓉  王晓清  
生长激素(growthhormone,GH)参与动物的生长、发育等代谢过程.GH发挥生理作用,首先是与靶细胞膜表面的生长激素受体(growth hormone receptor,GHR)结合,启动细胞内信号传导,促进胰岛素样生长因子(Insulin_like growth factor,IGF_I)的表达,再通过血液循环到达生物体局部组织,促进细胞的代谢过程.GHR是一种特异、高效的膜蛋白.GHR对GH的功能发挥有重要的影响,其在细胞内的表达量对生长激素发挥作用有重要影响,从而影响了生物器官组织的生理功能.就生长激素受体及生长激素受体基因的研究进展进行综述.
[期刊] 华北农学报  [作者] 武枫林  刘为民  张盛友  毛鑫智  
对 3头年龄为 2~ 3岁的去势水牛 ,安装颈静脉血管瘘管 ,定时采血 ,用放射免疫法测定血浆中GH的水平。结果表明 :水牛全天生长激素 (GH)分泌的脉冲频率为 1 14 3± 0 0 6次 /h ,脉冲基线为 14 4 6 7± 0 4 6ng/mL ,脉冲高度为 18 719± 0 76ng/mL ,脉冲幅度为 4 2 4 7± 0 5 1ng/mL ;白天的脉冲基线显著高于夜间 ,脉冲频率、脉冲高度、脉冲幅度均高于夜间 ;春季和夏季夜间GH分泌的脉冲频率基本相同 ,其余 3种参数春季均显著高于夏季
[期刊] 华北农学报  [作者] 李红霞  李建林  唐永凯  俞菊华  阮瑞霞  魏可鹏  夏正龙  董在杰  
应用RT-PCR及PCR分离到鲤鱼2个jlGHSR2s基因,jlGHSR2a和2b,分别编码366,367个氨基酸,相似性高达98%,和金鱼、斑马鱼GHSR2的相似性高达95%。jlGHSR2s基因的内含子位于起始密码子793 bp后,2a和2b内含子的长度和序列均存在明显差异。试验首次发现了jlGHSR2a的转录变体(Variant)jlGHSR2a',由选择性剪切靠近内含子的57 bp外显子1和保留靠近外显子2的28 bp内含子构成,编码350个氨基酸,缺失最后2个跨膜区,剪切序列两端碱基为CT-AC。荧光定量RT-PCR结果表明,jlGHSRs在脑和精巢表达量最高,1s在检测的组织均有表...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 江世贵  张殿昌  
根据生长激素(growthhormone,GH)基因的保守性序列设计1对引物,利用RT PCR技术从鲮(Cirrhinamolitorella)脑垂体组织中克隆出鲮生长激素成熟肽cDNA片段,将纯化的DNA片段克隆到pUCm T载体上。克隆的鲮GHcDNA开放阅读框全长567bp,编码由188氨基酸残基组成的生长激素成熟肽。序列分析结果表明,鲮GH成熟肽氨基酸序列与另2种鲮—印鲮(Cirrhinamrigal)和南亚野鲮(Labeorohita)的成熟肽氨基酸序列同源性分别为87%和83%,与鲤的成熟肽氨基酸序列同源性为96%,并对9个科的17种鱼进行了分子系统进化树分析,结果与根据传统的形态...
[期刊] 华北农学报  [作者] 张焱如  乌尼尔夫  芒来  
为进一步探明三河马遗传分化,参考牛(M57764)、羊(AF002110)、猪(M17704)、人(J03071)和鼠(X12630)等哺乳动物GH基因序列,设计一对特异引物,用PCR方法从三河马基因组中扩增出一条长约2kb的DNA片段。PCR产物经pGEM-Teasy载体转化感受态DH5α株大肠杆菌,获得重组克隆子。DNA测序表明:三河马生长激素基因DNA序列长1923bp,含完整的5个外显子和4个内含子,与猪、狗、牛、羊的GH的cDNA序列同源性分别为94.47%,92.63%,90.06%和90.37%。其cDNA所编码氨基酸与猪、狗、牛、羊同源性分别为97.21%,96.74%,88....
[期刊] 中国水产科学  [作者] 马骞  柳淑芳  庄志猛  唐启升  
根据已克隆的半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生长激素(GH)基因和生长激素受体Ⅰ(GHR-Ⅰ)基因的cDNA序列信息设计引物,用于扩增半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因序列。随后,分别利用表达载体pET-32a和pGEX-6P-1成功构建了包含半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因ORF全序列及不同ORF片段的6个重组质粒,并将获得的重组质粒在表达宿主菌大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示:重组GH的pET-32a-CSGH质粒在40 kD处有特异性的蛋白条带,重组GHR-Ⅰ胞内区的pGEX-6P-1-CSG...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 刘峰  刘臻  鲁双庆  张建社  谢新民  唐建洲  匡刚桥  
为探索鳜(Siniperca chuatsi)、大眼鳜(S.kneri)、斑鳜(S.scherzeri)生长性状差异与基因差异间的联系,以3种鳜野生群体为材料,采用PCR-SSCP分析及测序方法,对3种鳜野生群体的生长发育相关基因——生长激素(GH)基因的差异进行了检测。结果表明,在生长激素基因5′侧翼区至第2外显子区域检测到4种多态型,均为群体特有多态型;在第2内含子3′段至第3内含子5′段区域检测到5种多态型,其中3种为群体特有多态型;在第4外显子至第5外显子5′段区域及第5外显子3′段至3′侧翼区均检测到4种多态型,均有3种为群体特有多态型。对各多态型编码区的分析表明,斑鳜与鳜、大眼鳜在...
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