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[期刊] 中国农业科学
[作者]
王振 邓欣 赵廷昌 刘学敏
【目的】研究转基因抗虫棉根际卡那霉素抗性细菌的种群动态,检测转基因棉卡那霉素抗性细菌nptII基因漂移。【方法】采用常规培养方法分析了转基因抗虫棉GK12、GK19、33B、SGK321,常规棉泗棉3号、33、石远321等7个棉花品种根际卡那霉素抗性细菌种群在棉花整个生育期的种群动态变化。以质粒pBI121为对照,设计nptII基因特异性引物,采用PCR方法对分离的根际卡那霉素抗性细菌菌株进行nptII基因漂移检测。【结果】7个棉花品种根际卡那霉素抗性细菌数量随时间延长而减少,同一棉花品种不同采样时间卡那霉素抗性细菌数量差异显著,而同一采样时间抗虫棉和对应的受体棉间差异不显著。Simpson、...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
邓欣 赵廷昌 高必达
【目的】研究转基因抗虫棉叶围卡那霉素抗性细菌的种群动态变化,并监测nptⅡ基因向叶围细菌漂移的情况。【方法】采用常规培养的方法分析转基因抗虫棉33B、SGK321和GK12、受体棉33、石远321和泗棉3号叶围具有卡那霉素抗性的细菌在整个生育期的种群动态变化,并以质粒pBI121为对照,根据nptⅡ基因设计特异性引物,采用菌落PCR方法对分离的叶围卡那霉素抗性细菌进行nptⅡ基因漂移监测。【结果】6个棉花品种的叶围卡那霉素抗性细菌总数量和群落多样性指数随着时间的变化,在同一棉花品种不同采样时间之间差异显著,而同一采样时间抗虫棉和对应的受体棉间多数差异不显著。在转基因抗虫棉品种SKG321,GK...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
邓欣 赵廷昌 高必达 王振 孙福在
【目的】研究转基因抗虫棉叶围细菌的种群动态变化,并鉴定主要的细菌种群。【方法】采用常规培养的方法与RISA法相结合,分析转基因抗虫棉花33B、SGK321和GK12、受体棉花33、石远321和泗棉3号的叶围细菌在整个生育期的种群动态变化,并对主要细菌种群的ITS序列进行克隆测序,与数据库的序列进行比对鉴定细菌。【结果】6个棉花品种的叶围细菌的数量和群落多样性指数随着时间的变化,同一棉花品种不同采样时间之间差异显著,而同一采样时间抗虫棉和对应的受体棉间的差异较小。用RISA法分析棉花叶围细菌群落结构,能够得到清晰的指纹图谱,图谱表明叶围细菌群落结构复杂,多样性丰富,聚类分析结果表明,叶围细菌群落...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王敏 戴伟民 强胜 宋小玲
[目的]本文旨在为转基因水稻抗性基因漂移频率的检测提供科学的抽样技术,包括抽样方法和最佳抽样量,以达到既能真实反映田间实际发生的基因漂移频率,又能节省检测时间和经济成本。[方法]把同种常规水稻的红墨水染色种子与非红墨水染色种子按照混杂比为2.5%、1.25%、0.8%、0.625%、0.5%、0.4%、0.3%、0.2%、0.1%、0.05%、0.025%共11个比例充分混合,通过模拟转基因水稻向花粉受体(非转基因栽培水稻、普通野生稻和杂草稻)抗性基因漂移后形成的杂交种混杂在收获的花粉受体种子中的空间分布型,确定抽样方法;以抽样得到的混杂比与实际混杂比的偏离系数小于0.05为标准,研究抗性基因漂移频率为0.025%～0.5%时的最佳抽样量。[结果]抗性基因漂移后形成的杂交种混杂在收获的花粉受体种子中的空间分布型均符合随机分布;在混杂比为0.025%时,最佳检测量为40 000粒种子;在混杂比为0.05%和0.1%时,最佳检测量为30 000粒种子;在混杂比为0.2%、0.3%和0.5%时,最佳检测量为20 000粒种子。[结论]在检测转基因水稻抗性基因漂移频率时,应采取随机抽样法抽样。根据本研究获得的不同混杂比下的最佳抽样量,建议在检测抗性基因漂移频率时,可先检测20 000粒花粉受体种子,若得到的漂移频率大于0.2%,则不需要增加花粉受体种子的检测量;若得到的抗性基因漂移频率小于0.2%,则需再检测10 000粒花粉受体种子,这时若得到的抗性基因漂移频率大于0.05%,则不需要增加检测量;若抗性基因漂移频率小于0.05%,还需再检测10 000粒花粉受体种子。
[期刊] 华北农学报
[作者]
闫喜中 张锐 孟志刚 孙国清 周涛 郭三堆
采用花粉管通道法将含有Bt杀虫基因的pG4AB质粒导入受体棉花中23中,通过卡那霉素筛选,Bt免疫检测条检测,PCR扩增对转基因抗虫棉的各个自交世代进行跟踪研究。结果表明,具有卡那霉素抗性的单株能扩增出Bt基因,而且均有Bt杀虫蛋白表达。Bt基因与npt Ⅱ基因均整合进了棉花基因组中,相互之间紧密连锁遗传,均稳定表达,因此报告基因npt Ⅱ可用于研究Bt基因的遗传情况。
关键词：
Bt基因 npt Ⅱ基因 遗传 表达
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王娟 刘丽 王旭文 孔宪辉 余渝
利用田间卡那霉素抗性鉴定法和Bt基因PCR扩增法联合检测共9个回交群体的抗虫性,对180株NPTII阳性的植株进行PCR扩增,获得170个Bt基因条带。结果表明,符合率在阳性植株上为94.4%,非阳性植株上为96.7%,认为分子特异性标记检测法与卡那霉素涂抹鉴定法相结合,是选育转基因抗虫材料的一条有效途径。同时,本试验选育出一批高世代的抗虫棉材料,为抗虫棉新品种的选育提供资源。
关键词：
抗虫棉 Bt基因 PCR检测 抗性鉴定
[期刊] 华北农学报
[作者]
魏爱民 张文珠 杜胜利 韩毅科 张桂华 刘楠
研究了不同浓度卡那霉素(Km)对未转化黄瓜种子萌发及幼苗生长的影响,建立了转基因黄瓜卡那霉素抗性筛选体系。种子首先播在含Km 200 mg/L的1/2MS培养基中,能有效地抑制黄瓜幼苗生长,10 d后剪掉根系扦插移栽于蛭石中,能促使非转基因植株衰弱或死亡,有效地加速筛选。应用该筛选体系对花粉管通道法获得的抗虫转基因黄瓜T0种子进行初步筛选,获得Km抗性植株,抗性植株筛选率为1.6%,其中8.9%经PCR分子检测为阳性植株,初步证实EQKAM抗虫基因已整合到黄瓜基因组中。
关键词：
黄瓜 花粉管通道法 卡那霉素
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
朱龙付 张献龙 聂以春 吴家和
利用简单重复序列 (SSRs)和随机扩增多态性DNAs(RAPDs) 2种分子标记对来自我国各个棉区的 30份陆地棉转基因种质材料进行了遗传多样性分析 ,材料包含有我国的 3种转基因类型。利用NTSYS -pc 2 .10统计分析软件 ,采用Jaccard’s相似系数UPGMA法进行聚类。结果表明 ,3类转基因材料大致分为不同的 2类 ,而且不同棉区的转基因材料交叉分布。相似系数分析表明 ,我国转基因材料的遗传多样性相对较为丰富。同时对我国转基因材料的生产应用提供了参考意见
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘丽英 戴茂华 吴振良 岳海旺 郭秀林
以河北省当年棉花区试对照品种DP99B为对照,在足水和干旱两种条件下对衡科棉369抗旱性生理特性进行了研究,结果表明:衡科棉369离体叶片失水速率较低,在干旱胁迫下叶片含水量的变化较小。脯氨酸增加较多,超氧化物歧化酶(SOD)含量增加较多。说明衡科棉369比对照DP99B抗旱性强。
关键词：
衡科棉369 抗旱 生理特性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
吕孟雨 董福双 张俊敏 王海波
为了建立简单有效地筛选抗卡那霉素标记基因玉米的方法,分别用玉米自交系"昌7-2"和杂交种"郑单958"为试验材料,用不同浓度、不同体积的卡那霉素溶液分别浸种3、4 d后播种,调查播种10 d后的玉米幼苗白化率,确定玉米对卡那霉素的抗性,结果表明用卡那霉素浸泡玉米种子,玉米苗的白化率不但与卡那霉素浓度有关,而且与浸种的用液量有关,杂交种和自交系之间差异并不大,利用100 mL浓度为200 mg/L的卡那霉素溶液浸种3 d后播种,白化苗率基本可以达到100%,用100 mL浓度为150mg/L的卡那霉素溶液浸种20粒种子3 d后播种进行抗性筛选,经过对玉米T1代转基因植株的筛选试验进行验证准确度达...
关键词：
转基因玉米 卡那霉素 筛选方法
[期刊] 世界农业
[作者]
何忠伟 陈艳芬 伍小松
[期刊] 农业技术经济
[作者]
李昭琰 郭艳琴 乔方彬
本文基于对我国黄河流域棉区河北、河南和山东三省的农户实地调研数据,采用非线性损失控制函数,实证分析了双价转基因抗虫棉在实际大田生产中的经济效率。研究结果表明,双价转基因抗虫棉与单价转基因抗虫棉无论是在棉花单产还是在农药施用方面的差异都不显著。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
曾华兰 何炼 叶鹏盛 刘朝辉 韦树谷 张骞方
采用系统调查方法,研究了在转基因抗虫棉的棉田害虫群落情况。结果表明:在四川棉区,转基因抗虫棉对棉田昆虫群落组成无影响。转基因抗虫棉能有效控制棉铃虫、棉红铃虫等鳞翅目害虫的发生数量,并将其种群控制在较低水平;转基因抗虫棉对棉田中棉蚜、红蜘蛛的群落数量无影响,但蝽类的群落数量比常规棉田高。
关键词：
转基因 棉花 昆虫 群落
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王建 闫静 张庆玲 郑爱琴 强胜 刘琳莉 伏建国 宋小玲
［目的］了解抗除草剂转基因油菜（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）向不同种群野芥菜（ｗｉｌｄ Ｂ．ｊｕｎｃｅａ）漂移的可能性，为抗除草剂转基因油菜的安全性评估提供依据。［方法］以抗草甘膦和抗草丁膦转基因油菜为父本，１７个种群野芥菜为母本，研究人工授粉条件下的结实能力和抗性基因的传递频率及Ｆ＿１在温室（套袋自交）和田间（开放授粉）的适合度；统计Ｆ＿１后代的出苗率及抗性基因的传递频率。［结果］供试的野芥菜授２种转基因油菜花粉后每角饱粒数大于８粒；获得的Ｆ＿１植株对相应除草剂都具有抗性；温室和田间种植后营养生长良好；温室条件下自交不结实；田间种植后单株有效角果数、角果长及每角饱粒数均显著低于各自的亲本野．．．
关键词：
野芥菜 转基因油菜 亲和性 F1 适合度
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