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[期刊] 实验技术与管理
[作者]
雷敏 刘斌 阮梅林 罗云
分子量是蛋白质的重要特征参数,准确测定蛋白质分子量对研究蛋白质结构与功能具有重要意义。该文以牛血清蛋白(BSA)和人血清免疫球蛋白(IgG)为研究对象,采用分析超速离心-沉降速率法(AUC-SV)测定2种蛋白的分子量,并系统研究了样品初始浓度、离心转速、离心时间、离心温度、样品上样体积和缓冲液体系等实验条件对测定结果的影响。结果表明:离心转速为20 000～40 000 r/min时,影响不明显,样品初始浓度、离心时间、离心温度、缓冲液体系的适宜范围较宽,样品上样体积对测定结果的影响显著。在优化的实验条件下,测得未知蛋白的分子量为39.9 kDa,与质谱法测定结果(40.0 kDa)一致。该方法具有适宜条件范围宽、非破坏性、无需标准品和普适性高等优点,适用于未知蛋白分子量的测定。此外,相关研究结论还可供AUC-SV初学者学习借鉴。
关键词：
分析超速离心 沉降速率 蛋白质分子量
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
褚文丹 芦亚菲 李文奇
分析超速离心（analytical ultracentrifugation,AUC）技术可以记录溶液中不同聚合状态的蛋白质在离心场中的沉降运动轨迹，分析获得其沉降系数分布，进而测定自聚集平衡常数。分析超速离心-沉降速率法（AUC-SV）是分析蛋白质自聚集的经典方法，可以测量从pmol/L到mmol/L的自聚集平衡常数。该实验室与美国国立卫生研究院Peter Schuck团队合作，以常见商用蛋白β-lactoglobulin (βLGB)的同源二聚作为模型，准确测定了其自聚集平衡常数Kd。文章详细介绍了蛋白质自聚集实验中沉降速率实验设计、数据分析的操作步骤，建立了一套应用沉降速率法研究蛋白质自聚集的标准方法，并利用该方法对脱落酸（ABA）受体蛋白PYL3，以及结合ABA的PYL3的自聚集平衡常数进行测定，进一步验证了该方法的可靠性。
关键词：
分析超速离心 蛋白质自聚集 沉降速率
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王宝杰 刘梅 蒋克勇 张国范 王雷
应用超速离心技术对中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)血浆样品进行处理,比较去除和未去除高丰度蛋白血浆的双向凝胶电泳(2-DE)图谱。结果表明:对虾血浆高丰度蛋白经去除后,血浆样品中的低丰度蛋白得到较好的分离和浓缩。未处理样品的2-DE图谱分离的蛋白质170个,而去除高丰度蛋白后血浆2-DE图谱上分辨率增高,分离出蛋白质点520个,一些低丰度蛋白质被有效分离出来。研究证实,超速离心技术可有效去除对虾血浆高丰度蛋白(血蓝蛋白),提高低丰度蛋白的检出敏感性,为对虾等甲壳动物的血浆蛋白质组学研究提供了基础保障。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
马传喜 徐风 蒋国梁
面包小麦ＳＤＳ沉降值的变异及其与蛋白质含量的关系马传喜１徐风１蒋国梁２（１安徽农业大学农学系，合肥２３００３６；２南京农业大学农学系）ＶＡＲＩＡＴＩＯＮＯＦＳＤＳＳＥＤＩＭＥＮＴＡＴＩＯＮＶＯＬＵＭＥＡＮＤＩＴＳＲＥＬＡＴＩＯＮＴＯＰＲＯＴＥＩＮＣ...
[期刊] 华北农学报
[作者]
卢学琴 胡尚连
以14个绵阳系列小麦品种为材料,研究不同品种籽粒蛋白质含量、蛋白组分和SDS-沉降值的变化规律,以及籽粒蛋白质含量及其组分与SDS-沉降值的关系,为绵阳系列小麦品种的选育提供理论依据。研究结果表明,不同小麦品种籽粒蛋白质含量不同,变幅为7.30%~13.09%,多数品种属于低蛋白质含量类型。多数品种的SDS-沉降值分布在20~30 mL范围内。不同品种籽粒蛋白组分各异。籽粒蛋白质含量、贮藏蛋白含量、谷蛋白和醇溶蛋白含量都与SDS-沉淀值成极显著的正相关关系。高的籽粒蛋白质含量和谷蛋白与醇溶蛋白含量是绵阳系列小麦品种获得较好烘烤品质的前提。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
尹燕霞 佟丽 李小蒙 向本琼
对分子筛层析实验进行改革,优化分子筛层析分离标准蛋白的实验条件、建立良好的标准曲线。以分子筛Sephacryl S-200 HR作为层析填料,对蛋白、蛋白浓度、样品上样量、上样顺序、流速等关键因素和环节进行了摸索,通过实验条件的筛选和优化获得了线性关系较好的标准曲线和洗脱峰图谱。该方法具有较高的分辨率和重复性,为进一步研究层析技术奠定了基础,在本科生的实验教学中取得了良好教学效果。
关键词：
分子筛层析 标准曲线 实验教学
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张海方 宗亚锋 邹思湘 陈伟华 秦宜德
目的探讨猪乳一高分子量蛋白质B(HMWP-B)是否来自于血液以及是否为猪乳所特有等问题。方法利用兔抗HMWP-B的多克隆抗体,通过免疫印迹实验来检测泌乳母猪血液中是否存在HMWP-B。结果实验结果证实HMWP-B在泌乳母猪血液中不存在,由此推测HMWP-B可能为来源于乳腺细胞自身合成而非血源性的乳蛋白;同时,结果还表明牛乳和兔乳中不存在HMWP-B,提示HMWP-B可能为猪乳所特有的乳蛋白。结论本实验为证明HMWP-B是由猪乳腺细胞自身合成而不是来自于血液的乳蛋白提供了一定的证据,这为深入开展该蛋白质的功能研究奠定了基础。
关键词：
猪乳 高分子量蛋白质 血源性
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
秦宜德 徐银学 邹思湘 Walter L Hurley
采用SDS PAGE法对 16 2头二花脸母猪和 5 0头大约克母猪乳中一组高分子量蛋白质 (HMWP)进行了检测 ,计算了该位点基因型频率、等位基因频率和遗传多样性指数 ,并运用线性模型统计方法分析二花脸母猪该位点不同基因型与母猪泌乳性能的关系。结果表明 ,在猪种群中 ,乳中HMWP存在A (相对分子质量 14 6 80 0± 14 0 0 ) ,B ( 114 80 0± 4 0 0 ) ,C ( 10 86 0 0 )和D ( 10 14 0 0± 6 0 0 ) 4种带型 ,分别受 4个等位基因HA、HB、HC 和HD 控制。在二花脸猪乳中HMWP表现出BB、BD和DD 3种基因型 ,...
关键词：
猪乳 高分子量蛋白质 多态性 泌乳性能
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
阎巧娟 李道娥 刘向阳 郭佩玉 韩鲁佳
研究了加热法提取工艺条件对苜蓿叶蛋白蛋白质含量的影响。通过不同pH值和苜蓿的不同生长期的单因素，以及不同加水比例、加盐比例、提取液pH值和絮凝温度对蛋白质含量影响的多因素试验，得出了制取高蛋白质含量叶蛋白的提取工艺条件。
关键词：
苜蓿 叶蛋白 加热法 蛋白质含量
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘三才 朱志华 李为喜 刘方 李燕 黄蓉
【目的】对中国谷子地方品种资源进行硒和蛋白质含量的测定与评价,以了解谷子品种资源中硒和蛋白质含量的变异及其与地理分布的关系,为谷子种质创新和育种提供基础。【方法】硒和蛋白质含量测定分别采用氢化物原子荧光法和微量凯氏定氮法。【结果】①中国谷子地方品种资源硒含量平均53.3μg·kg-1,变异范围20.8～89.2μg·kg-1;蛋白质含量平均15.8%,变异范围11.01%～20.77%。②不同生态区的材料硒和蛋白质含量存在明显差异,西北内陆和黄土高原来源的品种硒含量分别排列第一和第二,以下依次是东北平原、华北平原,最低是内蒙古高原;不同生态区来源的品种蛋白质含量排列次序与硒的排列较为一致,依次...
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
李铁军 贺建华 陈孝珊
通过研究脱毒桐饼 (粕 )不同重量和粒度、碱溶液的浓度及 p H值、搅拌时间与离心时间以及离心速度等对蛋白质溶解度的影响 ,确定了测定脱毒桐饼 (粕 )蛋白质溶解度的适宜条件。结果表明 ,其适宜的条件是 :脱毒桐饼(粕 )样品 1.5 g(± 0 .0 0 1) ,需置于 75 m l的 p H值为 13.8的 3% (w/ v) KOH溶液中 ,经磁力搅拌 30 min,取搅拌液5 0 ml于离心机内离心 10 min,转速为 30 0 0转 / min(Rpm) ,再取离心上清液 15 m l,通过凯氏半微量定 N法测定其蛋白质含量 ,最后计算脱毒桐饼 (粕 )蛋白质溶解度
关键词：
蛋白质溶解度 脱毒桐饼(粕)
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
熊邦喜 龙良启 苏夏 常青
对我国８家饲料厂生产的１０种鳗鱼配合饲料中的粗蛋白（ＣＰ）和必需氨基酸（ＥＡＡ）进行了测定。结果为每１００ｇ鳗料中ＣＰ和ＥＡＡ的含量（％）成鳗料分别为（４６．７０±１．６７）、（２０．３０±０．６９），幼鳗料分别为（４７．１７±１．０１）、（２０．４７±０．４７），仔鳗料分别为（５１．１０±０．１９）、（２２．２４±０．００）。方差分析表明，国产成鳗、幼鳗和仔鳗料中ＣＰ含量差异极显著（Ｐ＜０．０１），而ＥＡＡ含量差异不显著（Ｐ＞０．０５）。并且对国产鳗鱼饲料测定结果与有关指标进行了比较和讨论。
关键词：
鳗鲡,国产饲料,粗蛋白,必需氨基酸
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈喜文 陈德富 李永君
对小麦回交后代的蛋白质含量进行了分子标记辅助选择研究。先对2个与蛋白质含量相关的Xgwm570和E41M62-168标记进行验证,表明其与蛋白质含量密切相关。再通过表型选择、分子标记辅助选择(MASBC2)和不加选择(RNDBC2)产生的BC2中,蛋白质含量的平均值和群体中蛋白质含量高于16.5%的植株比例在PHEBC2和MASBC2之间没有显著差异,但均显著高于RNDBC2。对群体中的植株按两分子标记的类型分为A(2个位点)、B(1个位点)和C(无)3大类,蛋白质含量的平均值和植株中蛋白质含量高于16.5%的比例从高到低的排列顺序为:A类植株>B类植株>C类植株。由此看来,利用分子标记辅助选...
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
周佳 毕秀成 吴承明
考马斯亮蓝-G250和牛血清蛋白反应生成蓝色络合物,蛋白质浓度与产物的颜色深度存在对应关系.在误差传递规律基础上利用手机比色法,考察了光照和手机类型等影响取样的外在因素,建立了蛋白质含量测定的新方法.实验表明,在最优测定条件下,间接测量值XB与蛋白质浓度在1～7μg/mL范围内存在明显的线性关系,标准样品测定的相对标准偏差为3.47%(n=8),检出限为0.67μg/mL.对花生、葵花籽、南瓜子等坚果的水溶性蛋白质进行加标回收实验,回收率在100.3%～107.5%之间,该方法简便快捷、灵敏度高、回收率好,可用于坚果中水溶性蛋白质含量的测定.
关键词：
误差传递 手机比色法 水溶性蛋白质 坚果
[期刊] 中国农业科学
[作者]
周瑞莲 杨树德 赵哈林 Westgate E.Mark
【目的】通过测定变温处理过程中种子生长速率、蛋白质、脂肪和淀粉含量,以期了解发育早期变温对种子发育和组分的影响。【方法】采用液体组培法在种子发育早期的分裂期(开花10～20d)和积累期(开花20～32d)对种子和子叶进行变温处理。具体做法:将盆栽的3个不同基因型大豆品种(Evans,低蛋白品种;Proto,高蛋白品种;PI132.217,高蛋白质稳定品种)置于均温为24℃[昼/夜温度,27/20℃(Mo)]的生长箱中培养。在开花后10d,将它们分别置于温度为31℃[35/27℃(Ho)]、24℃[27/20℃(Mo)]和16℃[20/12℃(Lo)]的生长箱中。在开花后20d,从生长在不同温度...
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