- 年份
- 2024(5346)
- 2023(7446)
- 2022(6157)
- 2021(5551)
- 2020(4582)
- 2019(9943)
- 2018(9797)
- 2017(17740)
- 2016(10017)
- 2015(10939)
- 2014(10779)
- 2013(10152)
- 2012(9255)
- 2011(8221)
- 2010(7994)
- 2009(7370)
- 2008(7016)
- 2007(6165)
- 2006(5198)
- 2005(4397)
- 学科
- 济(33161)
- 经济(33110)
- 管理(27604)
- 业(24988)
- 企(19272)
- 企业(19272)
- 方法(14217)
- 数学(12590)
- 数学方法(12487)
- 农(10994)
- 学(10190)
- 财(10028)
- 中国(9786)
- 制(8369)
- 贸(7868)
- 贸易(7867)
- 业经(7805)
- 易(7662)
- 农业(7170)
- 体(7096)
- 银(6327)
- 银行(6277)
- 地方(6083)
- 技术(6068)
- 融(5963)
- 金融(5956)
- 行(5954)
- 务(5926)
- 财务(5906)
- 环境(5899)
- 机构
- 学院(139265)
- 大学(138886)
- 济(51891)
- 研究(50982)
- 经济(50833)
- 管理(49675)
- 理学(43723)
- 理学院(43154)
- 管理学(42187)
- 管理学院(41964)
- 农(37031)
- 中国(36460)
- 科学(35837)
- 农业(29798)
- 京(29316)
- 业大(29272)
- 所(27595)
- 研究所(25816)
- 财(22898)
- 中心(22754)
- 江(20861)
- 农业大学(19994)
- 院(18598)
- 财经(18487)
- 北京(17732)
- 技术(17454)
- 省(17437)
- 范(17010)
- 经(16939)
- 室(16687)
- 基金
- 项目(103342)
- 科学(79315)
- 基金(74558)
- 家(69528)
- 国家(68960)
- 研究(67123)
- 科学基金(56871)
- 社会(42363)
- 省(41778)
- 基金项目(40099)
- 社会科(40073)
- 社会科学(40063)
- 自然(39516)
- 自然科(38626)
- 自然科学(38608)
- 自然科学基金(37936)
- 划(35654)
- 教育(30702)
- 资助(29190)
- 编号(25286)
- 重点(23764)
- 计划(22548)
- 创(21849)
- 发(21680)
- 部(21514)
- 科研(20723)
- 科技(20609)
- 创新(20512)
- 业(19573)
- 成果(19317)
共检索到196426条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄晓荣 张涛 冯广朋 赵峰 刘鉴毅 王妤 章龙珍 庄平
选取６ ｉｎｄ健康的雄性俄罗斯鲟（Ａｃｉｐｅｎｓｅｒ ｇｕｅｌｄｅｎｓｔＡｅｄｔｉ），经人工催产后获得成熟的精子，研究超低温冷冻（－１９６℃）对俄罗斯鲟精子顶体酶活性及ｄｎＡ损伤影响。结果显示：俄罗斯鲟鲜精中顶体酶的平均活性为（３６．１８±２．５４）μｉｕ·１０－６，经过超低温冷冻后，精子顶体酶活性显著降低，添加抗冻保护液精子中顶体酶活性降至（２１．５５±０．７９）μｉｕ·１０－６，未添加抗冻保护液精子中顶体酶活性降至（９．５８±１．０８）μｉｕ·１０－６，且三者间有显著性差异（ｐ＜０．０５）。单细胞凝胶电泳结果表明，俄罗斯鲟鲜精彗星率为（３７．３３±７．７７）％，添加抗冻剂后冻精的彗星率为（．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
徐滨 江琪 庄平 章龙珍 黄晓荣 王斌 张涛 闫文罡
研究了超低温冷冻保存(-196℃)对俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti)精浆和精子中总三磷酸腺苷酶(AT-Pase)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)等酶活性的影响,并分别测定了冷冻前后俄罗斯鲟精浆和精子中酶的活性。结果显示,经过超低温冷冻保存后,俄罗斯鲟精子活力下降,精子内各酶活性均显著降低,添加冷冻保护液组精子中总ATPase、SDH、LDH和CK的活性分别从(198.47±14.43)U/mL、(30.00±2.65)U/mL、(6 982.29±24.32)U/L和(1.94±0.05)U/mL下降至(110.19±2.32)U/m...
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄晓荣 张涛 冯广朋 赵峰 刘鉴毅 王妤 章龙珍 庄平
选取6 ind健康的雄性俄罗斯鲟(Acipenser gueldenstaedti),经人工催产后获得成熟的精子,运用扫描电镜和透射电镜,观察了超低温冷冻前后精子的形态结构。结果显示,经过超低温冷冻后精子形态结构发生了较大变化,其中冻精顶体长度、头中部宽度及中段宽度与鲜精相比显著增加(P<0.05);中段长度及后外侧延伸物与鲜精相比显著减少(P<0.05)。冻后有38.6%的精子在形态结构上受到不同程度的损伤。精子的结构损伤主要表现在精子顶体不明显或与核发生糅合,后外侧延伸物消失,甚至顶体脱落;精子核膜皱
[期刊] 水产学报
[作者]
章龙珍 刘鹏 庄平 王斌 闫文罡
为改进西伯利亚鲟精子超低温冷冻保存技术,探讨精子损伤机制,应用扫描和透射电子显微镜,观察了西伯利亚鲟鲜精与冷冻后精子的形态结构。结果显示,经过冷冻保存后精子的形态发生了很大变化。精子顶体长、精子头中部宽、头中部宽与前部宽比值及中段宽与鲜精相比显著增加(P<0.05);中段长度、后外侧延伸物长度比鲜精显著变短(P<0.05)。精子经过冷冻后有30.5%的精子在形态、结构上受到不同程度损伤,受损精子显微结构表现为顶体后外侧延伸物与核糅合,顶体内容物丢失;核膜囊泡化、核膜断裂,核内出现空泡;线粒体内嵴弥散,线粒体脱落;鞭毛外膜松弛与鞭毛脱离等。部分受损伤精子出现顶体丢失,中段脱落,鞭毛自中段基部断裂...
关键词：
西伯利亚鲟 精子超微结构 冷冻损伤
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄晓荣 章龙珍 庄平 江琪 刘鉴毅 姚志峰 张涛 冯广朋 赵峰
研究超低温冷冻保存(-196℃)对日本鳗鲡精子内总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)等酶活性的影响。运用试剂盒分别测定了冷冻前后日本鳗鲡精子内酶活性的变化。结果表明,经过超低温冷冻保存后,日本鳗鲡精子的活力下降,精子内GR活性显著升高(P
关键词：
超低温冷冻 日本鳗鲡 精子 酶活性
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄晓荣 章龙珍 庄平 刘鉴毅 张涛 冯广朋 赵峰
研究超低温(-196℃)冷冻保存对大黄鱼(Pseudosiaena crocea)精子内总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)等酶活性的影响。运用试剂盒分别测定了冷冻前后大黄鱼精子内酶活性的变化。结果表明,经过超低温冷冻保存后,大黄鱼精子的活力下降,精子内GR活性从(4.42±0.29)U·L-1增加到(58.93±2.26)U·L-1(P<0.05);其它几种酶的活性均显著下降(P<0.05),总ATP酶、CK、SDH的活性分别从冻前的(60.16±5.88)U·mL-1、(11.91...
关键词：
超低温冷冻保存 大黄鱼 精子 酶活性
[期刊] 水产学报
[作者]
浦蕴惠 许星鸿 高焕 刘兆普 阎斌伦
研究了超低温冷冻保存(-196℃)对脊尾白虾精子内琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na+/K+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)与顶体酶活性的影响,以期为提高脊尾白虾精子超低温冷冻效果提供理论依据。设置对照组(未添加抗冻剂)、3个实验组[分别添加DMSO(V/V)10.0%、12.5%、15.0%],于冷冻0、1、3、5、7、15 d取样测定各酶活性。结果表明,经冷冻后,除GR外,其他所测酶活性均出现显著下降(P<0.05),在冷冻...
关键词：
脊尾白虾 精子 超低温冷冻 酶活性
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
杨培民 杨爱国 刘志鸿 周丽青
应用透射电镜和扫描电镜技术,研究了超低温冷冻保存前后虾夷扇贝精子超微结构和形态的变化。结果显示,虾夷扇贝精子由头部、中段和尾部3部分组成,外被光滑质膜;顶体位于头部最前端,呈倒"v"形,细胞核近似圆柱状,电子密度较高;4个线粒体和两个相互垂直的中心粒构成了精子的中段;鞭毛细长,轴丝为典型的"9+2"结构。经超低温冷冻保存后,冷冻损伤的精子表现为:精子被膜肿胀、被膜与核膜分离、丢失;顶体破裂、内容物流出;线粒体解体、线粒体嵴变形;鞭毛被膜肿胀、部分精子鞭毛脱落。可以推测,超低温冷冻保存对精子膜、顶体、线粒体和鞭毛的损伤可导致冻精活力和受精能力的下降。
关键词：
虾夷扇贝 精子 冷冻损伤 超微结构
[期刊] 水产学报
[作者]
丁小雨 李振通 段鹏飞 邱弈树 王心怡 黎琳琳 王林娜 刘阳 李文升 王清滨 赵侠 李胜忠 田永胜
为探究长期超低温冷冻保存中鞍带石斑鱼精子质膜、活力、超微结构及酶活性的变化，阐明影响鞍带石斑鱼精子冷冻保存质量的相关机制。实验采集2022年鞍带石斑鱼鲜精及储存时间分别为23、49、61个月冷冻保存精液，用伊红-苯胺黑染色方法检测精子质膜完整性；用计算机辅助精子分析仪（CASA）检测精子运动参数；测量精浆和精子中琥珀酸脱氢酶（SDH）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽还原酶（GR）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和肌酸激酶（CK）共六种酶活性的变化及三磷酸腺苷（ATP）浓度变化；用扫描电镜和透射电镜观察鲜精和冻精超微结构。结果显示，伊红-苯胺黑染色检测结果发现，鲜精质膜完整性最高，为83.43%±2.73%，经过超低温冷冻后，精子质膜完整性显著降低，且随着冷冻保存时间的延长而逐渐降低。CASA结果显示，鲜精活力最高，为90.47%±3.34%，经过超低温冷冻后精子活力显著降低，但长期保存23-61个月精子活力无显著性差异，精子活力保持在(63.95%±3.66%)～(68.58%±2.73%)，具有稳定的活力，且鲜精与冻精之间精子平均直线运动速度（VSL）、平均曲线运动速度（VCL）和平均路径速度（VAP）均没有显著差异。精子超微结构显示，鲜精形态结构正常、线粒体排列结构规则、形态大小正常。经过超低温冷冻保存后，精子形态结构损伤明显，表现为精子头部质膜破损、细胞质外漏、细胞核膜破损、尾部鞭毛断裂或脱落等损伤；鞍带石斑鱼精浆和精子超低温冷冻前后六种酶活性的变化及ATP含量结果显示，经过超低温冷冻后，精子内SOD、GSH-PX和CAT三种酶及ATP含量均有显著性降低。精浆中酶活力升高，除GR和CAT外，其余酶活性均差异显著。研究表明，长期超低温冷冻对鞍带石斑鱼精浆和精子酶活性、精子活力及精子超微结构均具有较显著影响。本研究结果为鱼类精子冷冻损伤机理研究积累了丰富的数据，为鱼类精子长期冷冻保存提供了技术参考和评价指标。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄晓荣 章龙珍 庄平 江琪 姚志峰 刘鉴毅
研究了超低温冷冻保存(-196℃)对斑尾刺虾虎鱼成熟卵中总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)等酶活性的影响。结果表明,经过冷冻保存后,总ATP酶、CK、SDH和LDH的活性显著下降(P<0.05),同时可见添加抗冻剂组比未添加抗冻剂组下降幅度更大(P<0.05);SOD、CAT和GSH-PX的活性也显著下降(P<0.05),未添加抗冻剂组比添加抗冻剂组下降更明显(P<0.05);MDA的活性显著升高,且未添加抗冻剂组显著高于添加抗冻剂组(P<0.05)。超...
关键词：
超低温冷冻 斑尾刺虾虎鱼 卵 酶活性
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄晓荣 章龙珍 庄平 冯广朋 赵峰 刘鉴毅 张涛 侯俊利
为了解超低温冷冻对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)胚胎线粒体DNA影响,选取细胞分裂期胚胎为研究对象,研究了4种玻璃化液处理和超低温冷冻对胚胎线粒体DNA的影响。结果表明:经过玻璃化液处理和冷冻后,胚胎线粒体上的Cytb基因能被稳定扩增,PCR电泳产物大小约1 600 bp,产物经回收后进行双向测序、比对和校正,获得10条Cytb基因全序列,长度为1 135 bp,其中有5个核苷酸变异位点,1 135 bp的Cytb基因序列一共编码378个氨基酸残基,从ATG第一位起始密码子开始到1 140位终止。经过玻璃化液处理和冷冻后,胚胎线粒体上的COI基因也能被稳定扩增,PCR电泳产...
[期刊] 海洋渔业
[作者]
陈张帆 程鹏 胡谋 王洁 张婷婷 黄红涛 杜合军 陈松林
为了解抗冻剂对施氏鲟(Acipenser schrenckii)精子冷冻保存效果的影响及其冷冻损伤机理，比较了添加不同浓度海藻糖和蔗糖作为冷冻保护剂的精子稀释液处理后施氏鲟精子冷冻复苏的活力、快速运动时间和寿命。结果表明，添加60 mmol·L~(-1)海藻糖1.0 mmol·L~(-1)氯化钾的稀释液处理后，精子冻后快速运动时间和寿命与鲜精相比无显著差异(P>0.05);且活力较其他处理组有所提高，达到(26.67±3.32)%,但仍显著低于鲜精(P<0.05)。利用透射电镜和扫描电镜对施氏鲟精子超低温冷冻保存前后的超微结构进行观察，并对其能量代谢酶和抗氧化酶活进行测定和比较，结果表明，低温冻存造成施氏鲟精子的膜系统和细胞器(主要为线粒体和轴丝)损伤；能量代谢酶[总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)]和抗氧化酶[过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)]活性均显著下降(P<0.05),而抗氧化酶谷胱甘肽还原酶(GR)活性显著上升(P<0.05),表明冷冻精子的生理功能损伤、内环境稳定性下降，能量供给系统被破坏。未添加抗冻剂组精子的总ATP酶、CK、CAT、SOD及GR酶活性相比添加抗冻剂组有显著差异，说明含有海藻糖的抗冻剂可对冷冻精子起到一定的保护作用。研究结果可为后期进一步优化施氏鲟抗冻剂的配方提供理论基础与研究思路。
[期刊] 水产学报
[作者]
金春华 闫家强 竺俊全
以HBSS溶液为稀释液,DMSO为抗冻剂,0.25 mL麦细管为冻存管,两步降温法超低温冻存黄姑鱼精子,并用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术检测了冻精的DNA损伤,荧光双染色流式细胞仪技术(FCM)检测了冻精的细胞膜性结构损伤。结果表明,DMSO质量分数在5%～20%时,冻精的活力与鲜精相比无显著差异;其中DMSO质量分数在10%时,冻精的激活率、运动时间及寿命分别为85.25%±3.95%、(3.23±0.27)min及(3.83±0.33)min。DMSO质量分数在25%、30%时,冻精的活力显著下降。SCGE检测显示,DMSO质量分数在5%～15%时、冻精的DNA损伤与鲜精相比差异不显著,...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
舒雪密 叶欢 仲嘉 张鸣 罗江 刘源 杜浩
中华鲟(Acipenser sinensis)是我国一级重点保护水生动物,其精原干细胞等种质资源冷冻保护技术尚不完善。本研究在前期建立的匙吻鲟(Polyodon spathula)精原干细胞冷冻保存液配方基础上,研究解冻温度、抗氧化剂和抗冻蛋白对中华鲟精原干细胞冷冻保存效果的影响,以期建立高效的中华鲟精原干细胞超低温冷冻保存方法。研究结果表明,实验设置的解冻温度(20、25、30和40℃)中25℃组冷冻保存效果最佳:解冻后细胞数目为(3.86±0.51)×10～5,细胞存活率可达(96.36±0.53)%;比较不同浓度组(500、1000和1500 mg/L)的谷胱甘肽、抗坏血酸和α-生育酚等3种抗氧化剂对中华鲟精原干细胞冷冻保存效果的影响,结果显示,冷冻保存液中添加1000 mg/L α-生育酚的实验组,解冻后得到的细胞数目最多(7.64±0.34)×10～5,显著高于其他抗氧化剂添加组,细胞存活率可达(92.82±0.72)%;通过比较不同浓度(0.1、1.0和10μg/mL)的两种类型抗冻蛋白(AFPI和AFPIII)对中华鲟精原干细胞的冷冻保存效果,发现添加了1.0μg/m L AFPI的实验组解冻效果最好,解冻后得到的细胞数目为(6.85±0.19)×10～5,显著高于其他实验组,细胞存活率为(86.89±0.73)%。综上所述,中华鲟精原干细胞冷冻保存的最佳解冻温度为25℃,1000 mg/L α-生育酚作为抗氧化剂,和1.0μg/m L AFPI作为抗冻蛋白对其冷冻保存效果最佳。
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
