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[期刊] 海洋渔业  [作者] 黄晓荣  章龙珍  庄平  江琪  姚志峰  刘鉴毅  张涛  冯广朋  赵峰  
研究了超低温冷冻保存(-196℃)对罗氏沼虾胚胎内总三磷酸腺苷酶(ATPase)、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)等酶活性的影响。运用试剂盒分别测定了冷冻前后罗氏沼虾胚胎内酶活性的变化。结果表明,经过超低温冷冻保存后,胚胎内7种酶的活性均显著下降(P
[期刊] 水产学报  [作者] 浦蕴惠  许星鸿  高焕  刘兆普  阎斌伦  
研究了超低温冷冻保存(-196℃)对脊尾白虾精子内琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na+/K+-ATP酶、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)与顶体酶活性的影响,以期为提高脊尾白虾精子超低温冷冻效果提供理论依据。设置对照组(未添加抗冻剂)、3个实验组[分别添加DMSO(V/V)10.0%、12.5%、15.0%],于冷冻0、1、3、5、7、15 d取样测定各酶活性。结果表明,经冷冻后,除GR外,其他所测酶活性均出现显著下降(P<0.05),在冷冻...
[期刊] 水产学报  [作者] 王梅芳  余祥勇  刘永  毛勇  于非非  
通过比较不同pH值(5.5~9.5)、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响,选择其中无激活精子作用又对其生理特性(活力,寿命,受精能力等)无影响者,加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液,精液与保护液按1∶10和1∶20的比例混合,样品按4组不同的降温程序平衡后转入液氮冷冻,比较其超低温冻存的效果。结果表明:以海水(pH7.5~8.0)为基础液,配制10%DMSO作为抗冻保护液,精液与保护液比例为1∶20,在低温(0~4℃)中平衡约30min,在距液氮面15cm、5cm处分别停留5min、10min后转入液氮(-196℃),冻存精子效果良好。冷冻24h、48h及5个月后...
[期刊] 海洋渔业  [作者] 黄晓荣  章龙珍  庄平  刘鉴毅  张涛  冯广朋  赵峰  
研究超低温(-196℃)冷冻保存对大黄鱼(Pseudosiaena crocea)精子内总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)等酶活性的影响。运用试剂盒分别测定了冷冻前后大黄鱼精子内酶活性的变化。结果表明,经过超低温冷冻保存后,大黄鱼精子的活力下降,精子内GR活性从(4.42±0.29)U·L-1增加到(58.93±2.26)U·L-1(P<0.05);其它几种酶的活性均显著下降(P<0.05),总ATP酶、CK、SDH的活性分别从冻前的(60.16±5.88)U·mL-1、(11.91...
[期刊] 华北农学报  [作者] 陈霜莹  常永健  赵艳华  张浡  刘瑜  章德明  
将苹果、梨、桃、李和樱桃等树种的39个品种的花粉干燥至含水量10%~20%,直接投入液氮中(-196℃),经过一段时间保存后,再以40℃水浴快速化冻1min,然后鉴定其生活力和萌发力.结果表明,花粉的生活力没有明显变化,其离体萌发率与新鲜花粉相近.新鲜花粉含水量在60%左右,不宜用于液氮保存.花粉含水量是影响保存效果的关键因子之一,只要花粉含水量适宜,可以多次反复冷冻—化冻,生活力不受影响.此项技术可用于果树花粉的长期保存.
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 刘燕  周慧  方标  
为了探讨超低温保存技术广泛应用于园林花卉种子保存的可能性 ,对 18个科 47种花卉种子进行了超低温保存研究 .除了 2种花卉种子进入液氮后炸裂外 ,其余 45种花卉种子保存后都有一定发芽率 ,有些花卉种子保存后种子发芽率还高于保存前 .结果表明 ,①超低温保存技术可以广泛应用于园林花卉的种子保存 ;②花卉种子在自然含水量状态即可存于液氮中 ;③从液氮中取出后 ,采用 35~ 40℃温水浴化冻有较高的发芽率 ;④超低温保存对一些花卉种子萌发表现出促进作用
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 张亚利  尚晓倩  刘燕  
为满足种质资源保存和交换以及杂交育种工作的需求,花粉超低温保存研究日渐兴起并逐步深入,保存材料从农作物、果树逐渐扩展到药用植物、园林植物等各类植物花粉.花粉超低温保存研究最初主要集中在保存技术方面,随着研究工作的深入和完善,花粉超低温保存机理的研究也逐渐展开,超低温保存花粉效果的评价,也从花粉染色法、离体萌发法,逐渐发展到田间杂交育种的实际应用.该文对20世纪80年代以来成功进行了花粉超低温保存研究的植物材料进行了总结,重点介绍了花粉超低温保存技术程序,同时对保存效果的评价及超低温保存机理的研究进展进行了综述.
[期刊] 林业科学  [作者] 郑郁善  陈礼光  李庆荣  林镇斌  吴擢溪  
The quality character, the dehydrogenase activities and the α amylase activity of Castanea mollissima conserved materials, including the seeds and the excised embryos, were analyzed for purpose of the feasibility of long term storage associated with cryopreservation. The results showed that mo...
[期刊] 海洋渔业  [作者] 黄晓荣  章龙珍  庄平  江琪  姚志峰  刘鉴毅  
研究了超低温冷冻保存(-196℃)对斑尾刺虾虎鱼成熟卵中总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和丙二醛(MDA)等酶活性的影响。结果表明,经过冷冻保存后,总ATP酶、CK、SDH和LDH的活性显著下降(P<0.05),同时可见添加抗冻剂组比未添加抗冻剂组下降幅度更大(P<0.05);SOD、CAT和GSH-PX的活性也显著下降(P<0.05),未添加抗冻剂组比添加抗冻剂组下降更明显(P<0.05);MDA的活性显著升高,且未添加抗冻剂组显著高于添加抗冻剂组(P<0.05)。超...
[期刊] 水产学报  [作者] 章龙珍  鲁大椿  柳凌  郭峰  张洁明  
泥鳅胚胎 (胚孔封闭期 )用 10 #玻璃化液作为低温保护剂 ,经低温 (- 196℃ )冷冻保存 17h后 ,38℃水浴解冻 ,解冻后的胚胎获得了成活。在稀释液B1、B2、B3中分别有 2 6 .7% ,15 .0 % ,3.0 %成活的胚胎。解冻后的胚孔封闭期胚胎经过 5 0h的培养 ,胚胎从胚孔封闭期发育至尾鳍出现期。
[期刊] 水产学报  [作者] 黄晓荣  庄平  章龙珍  冯广朋  刘鉴毅  张涛  赵峰  侯俊利  
为了解超低温冷冻对胚胎形态结构的影响,以中华绒螯蟹为研究对象,运用石蜡切片、扫描电镜和透射电镜观察细胞分裂期、原肠期和原溞状幼体期胚胎,分别用玻璃化液处理和经超低温冷冻后外部形态和内部结构的变化。结果发现:(1)显微观察表明,细胞分裂期胚胎在玻璃化液中用二步平衡法处理后吸水膨胀明显,三步平衡后胚胎形态无明显变化,超低温冷冻后,卵黄物质从细胞中溢出,细胞破损严重;原肠期胚胎在玻璃化液中用二步平衡法处理后,外部形态与鲜胚无明显差异,经过冷冻后,所有胚胎内部变成粉红色,胚体由原来的透明变成不透明状,细胞膜边缘模糊似绒毛状;(2)扫描电镜观察,玻璃化液处理后的所有原肠期胚胎表面褶皱呈沟壑状,形成一层网...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 葛海伦  朱锦裕  赵臣泽  苗淑彦  
通过向养殖水体中泼洒糖蜜构建生物絮团养殖模式,分析生物絮团营养组成,并探讨生物絮团对罗氏沼虾体组成和消化酶活性的影响。试验分对照组和试验组(生物絮团组),其中试验组在养殖过程中泼洒糖蜜。试验在室内水泥池内(2 m×2 m×0.6 m)进行,每个处理有3个重复,每个重复225尾虾(0.26 g±0.02 g),试验周期为90 d。养殖过程中不换水,糖蜜的泼洒量根据饲料投喂量进行计算(C/N为20)。结果显示:添加糖蜜能够显著促进生物絮团的形成,到第90天时,试验组的絮团体积达21.22 mL/L;而对照组为
[期刊] 华北农学报  [作者] 吴永杰  赵艳华  周明德  
苹果金冠品种的休眠茎尖经3种不同方法(玻璃化法、包埋-干燥法和两步降温法)超低温保存后,均获得成功,存活率达到了83%。休眠茎尖由于经受了冬季的深冷驯化和具有较低的含水量,因而成为超低温保存的良好试材。经过玻璃化液(PVS3:50%甘油+50%蔗糖)预处理80min(25℃条件下)后或经蔗糖溶液预培养并于无菌空气中干燥脱水至含水量30%左右后,休眠茎尖可直接投入液氮进行超低温保存。保存后的休眠茎尖经离体培养后可直接再生植株。试验进一步验证了试材生理状态的选择是超低温保存成功的一个关键因素,这不仅可以简化超低温保存的程序,而且可以提高此方法的实用性,为早日建立植物种质的超低温保存库奠定了基础。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 熊兴耀  李炎林  
超低温保存是目前木本植物长期保存的理想方法。综述国内外超低温保存技术在木本植物种质资源保存方面的应用现状和超低温条件下的低温伤害及细胞超微结构改变,阐述超低温保存技术的发展及各类超低温保存技术的优缺点和影响因素,指出广谱适用性问题、保存方法的可重复性问题和可操作性问题、投入产出问题是影响超低温保存技术推广应用的主要问题,认为扩大超低温保存木本植物资源的种类、根据植物种类和外植体类型发展相应的超低温保存技术、根据保存目的合理选取保存材料及其保存方法、优先发展经济优势物种的保存技术、增加财政投入以研发新型超低温保存技术是解决上述问题的重要途径。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 沈秋林  毕旸  陈礼光  蒋建立  黄宇  
探讨了超低温保存过程中预培养的蔗糖含量、DMSO含量,冰冻和解冻方式、防冻剂的种类和含量等因子对三尖杉悬浮细胞保存效果的影响.结果表明:效果较好的防冻剂为DMSO、PEG;在含有4%蔗糖和6%DMSO的液体培养基上培养得到的悬浮细胞,加入15%PEG、9%DMSO和5%山梨醇的防冻剂,采用快冻和缓解处理的悬浮细胞活力最强.
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