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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 黄耀凌  邹思湘  
用两批各 48只小鼠分 4组 (n =12 )每天分别灌喂生理盐水和 3 4mmol·kg-1的谷氨酰胺、谷氨酸和天冬酰胺 ,连续 10d。结果显示 ,三者都可提高小鼠血清、肝和骨骼肌中的肌酸磷酸激酶活性 ,降低乳酸脱氢酶活性 ,并显著增加肝、骨骼肌糖原积累。其中有相同碳架结构的谷氨酰胺、谷氨酸能极显著提高小鼠的游泳耐力 ,但与谷氨酰胺有相等酰胺氮的天冬酰胺作用不强。结果提示 ,谷氨酰胺提高机体抗疲劳作用与其碳架结构有关
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 王培鑫  陈悦宇  王睿  林佳馨  曾红亮  郑宝东  张怡  
对抗疲劳肽的来源、制备方法、分离纯化技术、序列鉴定、功能评价方法等内容进行综述,为抗疲劳肽的进一步研究提供依据.
[期刊] 水产学报  [作者] 张秋爽   叶彩媚   牛银杰   林强   梁红茹   罗霞   李宁求   付小哲  
为了研究鳜弹状病毒(SCRV)如何调控鳜c-Myc (Sc-c-Myc)进而调控谷氨酰胺代谢的分子机制,本研究通过免疫共沉淀联合蛋白质谱寻找可能与Sc-c-Myc互作的病毒蛋白,初步分析确定为核衣壳蛋白(N蛋白);Co-IP结果显示,SCRV的N蛋白与Sc-c-Myc存在相互作用。通过PCR扩增获得了带有Flag标签序列的SCRV-N基因的ORF片段,并构建了SCRV-N蛋白过表达载体pcDNA-N-Flag;将pcDNA-N-Flag质粒转染鳜脑组织细胞系(CPB细胞系),荧光共定位结果显示,Sc-c-Myc与SCRV-N在细胞质内存在共定位现象;通过逆转录实时定量PCR(RT-qPCR)和免疫印记(Western blot)检测转染pcDNA-N-Flag的CPB细胞系中Sc-c-Myc及谷氨酰胺代谢通路关键酶(GLS1、GDH和IDH2)的表达变化,发现Sc-c-Myc、GLS1的转录水平和蛋白水平均显著上调。综上表明,SCRV的N蛋白与Sc-c-Myc互作促进Sc-c-Myc的表达,进而调控宿主细胞谷氨酰胺代谢途径,为SCRV防控提供了新的靶点。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 杨奇慧  周歧存  谭北平  迟淑艳  董晓慧  杜昌钱  王杏芬  
以初始体质量为(9.87±0.20)g的全雄奥尼罗非鱼(Oreochromis niloticus♀×O.aureus♂)为实验对象,研究饲料中不同水平谷氨酰胺对奥尼罗非鱼生长、饲料利用及抗病力的影响。实验共设6个处理组,每组谷氨酰胺添加量分别为饲料质量的0、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%和2.0%,各设3个平行。用开放式流水养殖,饲养8周。之后注射嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行感染实验,观察7d,计算成活率。结果表明,饲料中添加谷氨酰胺对杂交罗非鱼的增重率、特异生长率、成活率及饲料系数均无显著影响(P>0.05),但对蛋白效率和蛋白质沉积率影响显著(P<...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 张春红  张佰清  孙焕  刘长江  
利用氮气和微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)对大豆分离蛋白(SPI)进行了复合改性。复合改性SPI的吸水性、保水性和吸油性分别比对照提高121%、222%和156%,溶解性比对照降低35.5%。经MTG改性后SPI可在其分子间生成共价键,形成相对分子量较大的聚合物。复合改性可在MTG改性的基础上进一步增加SPI分子间的交联程度。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 黄六容  何冬兰  刘梅芳  
利用设计的低廉简便的凝胶法从土壤中分离得到1株高产谷氨酰胺转胺酶(microbialtransglutami-nase,MTG)的菌株,初步鉴定属于放线菌纲的链霉菌属(Streptomycessp.)。摇瓶发酵试验表明,其最适产酶氮源和碳源分别是蛋白胨和葡萄糖,通过正交试验确定最适产酶培养基为(g/L):葡萄糖20.0,蛋白胨20.0,酵母提取物3.0,MgSO4·7H2O2.0,K2HPO4·3H2O2.0,KH2PO42.0,CaCO35.0。单因素试验确定最佳培养时间和最适pH分别为72h和7.0;在优化条件下,发酵液中MTG酶活达1.04U/mL。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘颖  田沛霖  陈佳  高红亮  鲁伟  鲁心安  常忠义  金明飞  
【目的】用醋酸纤维素膜和96孔板2种方法高通量筛选高产谷氨酰胺转胺酶(MTG)的茂原轮枝链霉菌菌株。【方法】利用紫外诱变获得茂原轮枝链霉菌突变体库后,分别利用醋酸纤维素膜和96孔板2种方法高通量初筛产MTG菌株,然后依次用试管和摇瓶发酵法复筛,并对96孔板高通量筛选方法的条件进行了优化。【结果】利用醋酸纤维素膜显色法从3 000株紫外诱变的菌株中筛选出1株高产MTG茂原轮枝链霉菌,其MTG活性为4.9U/mL,较出发株(MTG活性2.7U/mL)提高了80%。优化的96孔板高通量筛选方法为:直径为3mm左右的单菌落接种至150μL发酵培养基中,30℃200r/min培养72h;利用该法从3 4...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 邵坤彦  彭宝玉  叶程  刘威  何冬兰  
以吸水链霉菌基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到谷氨酰胺转胺酶基因片段,构建pGEX-TGase重组质粒,并转化到大肠杆菌中得到重组菌BL21/pGEX-TGase。重组菌经乳糖诱导产生融合蛋白,并对诱导条件进行了优化。表达产物主要以包涵体形式存在,采取稀释及尿素梯度液相色谱结合的方法,成功地实现了包涵体蛋白的复性。通过GST亲和柱纯化目的蛋白,得到酶活为29U/mg的电泳纯目的蛋白。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 田沛霖  朱一辰  金明飞  陈佳  刘颖  高红亮  常忠义  刘莉  袁涵  
【目的】考察茂原链霉菌单菌落表面纹饰特征及边缘特征与产微生物谷氨酰胺转胺酶(MTG)能力的关系,建立一种根据菌落形态快速初筛高产株的方法。【方法】通过自然选育,将原始菌株分离纯化后得到不同形态的单菌落,从中选出典型的表面纹饰特征和边缘特征单菌落。用试管发酵48h后测定各形态菌落的酶活,并通过摇瓶发酵验证依据菌落形态特征初筛MTG酶高产株方法的可行性。【结果】表面厚实饱满呈馒头型且边缘毛糙的菌落酶活最高,而表面平薄、边缘光滑的菌落酶活最低。根据这一形态鉴定法,通过摇瓶发酵,筛选出了一株产MTG酶活高达6.33U/mL的菌株,其活性比原始出发株提高了20.1%。【结论】根据菌落形态筛选MTG酶高产...
[期刊] 水产学报  [作者] 王桂芹  芦洪梅  牛小天  李子平  韩宇田  赵朝阳  秦贵信  
以初始体质量为(33.52±0.17)g建鲤为研究对象,在室内单循环养殖系统中进行8周(w)生长试验,分别配制成添加0.0%(对照)和0.5%(试验)丙氨酰—谷氨酰胺(Ala-Gln)的等氮等能(35%CP、17 kJ/g)饲料,采用5种投喂方式:连续8 w投喂对照饲料(Ⅰ);试验饲料2 w间隔投喂(Ⅱ);前4 w投喂试验饲料,后4 w投喂对照饲料的间隔投喂(Ⅲ);前4 w投喂对照饲料,后4 w投喂试验饲料的间隔投喂(Ⅳ);8 w连续投喂试验饲料(Ⅴ)。养殖试验结束时,进行急性拥挤胁迫试验。探讨Ala-Gln投喂方式对建鲤生长和抗急性拥挤胁迫能力的影响。结果表明,Ala-Gln连续投喂和间隔投...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 边连全  陈静  刘显军  
研究谷氨酰胺处理对断奶仔猪小肠粘膜形态变化和抗氧化作用的影响。试验选用40头(28±1)d断奶、体重均一的长白×约克夏仔猪,按单因素完全随机化设计随机分为2组,一组为对照组,喂基础日粮;一组为试验组,基础日粮添加1.2%的谷氨酰胺。在断奶后7d每个处理随机选取4头仔猪屠宰,取小肠组织,测定肠粘膜的形态变化和生化指标。结果表明:日粮中添加谷氨酰胺提高了小肠绒毛高度和固有层厚度,提高了GSH含量和CAT活性,降低了MDH含量,对肠粘膜起到了保护作用。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 黄业伟  邵宛芳  冷丽影  张冬英  
研究普洱茶生茶对小鼠的抗疲劳作用,为普洱茶保健功效研究提供一定的理论依据。将80只昆明种小鼠(雌雄各半,体重25±4 g)随机分为4组(20只/组),即空白对照组和普洱茶生茶高、中、低剂量组,分别灌胃0.9%生理盐水和2.0 g/kg.bw、1.0g/kg.bw、0.5 g/kg.bw的普洱茶生茶。按照小鼠体重给予不同体积的受试物,自由摄食与饮水,连续灌胃30 d,测定小鼠力竭游泳时间。采血、分离血清并取组织样,测定血乳酸(BLA)、血尿素氮(BUN)、血乳酸脱氢酶(LDH)及肝糖元(LG)、肌糖元(MG)指标。结果显示:与空白对照组相比,普洱茶生茶中、低剂量组显著延长了小鼠游泳时间(P<0....
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 林松毅  刘静波  程胜  姜轶群  王二雷  
分析了不同停留时间对受试小鼠血清中的谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酐(CREA)、碱性磷酸激酶(AKP)、葡萄糖(GLU)、尿激酶(CK)、尿素氮(BUN)8项血清生化指标的影响情况。通过试验研究发现,样品不同停留时间对血清中生化指标影响程度不完全相同,各指标相互间变化规律也很难找寻,根本无法直观判断其抗疲劳功效特性,故成功地构建出以8项血清生化指标直接评价抗疲劳功能特性的新方法。
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 陈静  刘显军  边连全  
选用(28±1)d断奶和平均体重为(6.16±0.13)kg的长白×约克夏仔猪96头,按体重相近原则随机分为6个处理,试验日粮分别在基础日粮中添加浓度为0%、0.3%、0.6%、0.9%、1.2%和1.5%的谷氨酰胺。试验期21d。结果表明,随着谷氨酰胺的添加量增加,仔猪血中红细胞、血小板数目逐渐增加,而白细胞、嗜酸白细胞数目逐渐减少。且随着断奶后时间的延长,仔猪自身免疫力和合成谷氨酰胺能力的加强,这种影响逐渐减小,到断奶后第21天,处理组间各指标均差异不显著(P>0.05)。谷氨酰胺的最佳添加剂量为1.2%。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 朱文娴  房婉萍  成浩  王丽鸳  黎星辉  徐玉琴  
在不同诱导条件下,对谷氨酰胺合成酶催化合成茶氨酸体系进行优化,确定最适诱导表达条件,为微生物发酵合成茶氨酸提供技术依据。研究结果表明:基因工程菌最佳培养温度为30℃,最佳诱导剂异丙基硫代-β-D半乳糖苷浓度为0.1 mmol.L-1,最佳诱导温度为28℃。合成茶氨酸的最适pH值为9.5,适合的缓冲液为100 mmol.L-1咪唑;反应体系中咪唑缓冲液优于磷酸钾缓冲液;低浓度L-谷氨酸钠、高浓度盐酸乙胺和高浓度三磷酸腺苷对茶氨酸的合成均有一定的促进作用,可以提高茶氨酸的生成量。
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