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[期刊] 西南农业学报  [作者] 梁明山  吴书惠  李薇  梁珊玲  
 以甘蓝型油莱奥罗(Oro)为受体,诸葛菜(Orychophragmusviolaceus)为供体,用花粉管通道法,在自花授粉24小时后导入诸葛菜总DNA,其后代发生了显著变异。变异率达9.8%。分析比较变异株DI-10和Oro的经济性状表明,主花序有效长度增加29.8%,第一次有效分枝数增加33.3%,有效荚果数增加176.9%,每荚粒数增加18.5%,千粒重增加44.2%,单株产量增加3.67倍;含油量增加2.42%,油酸含量增加14.33%,芥酸减至0.68%。Southren杂交表明,转化油菜(DI-10)产生优良遗传特性是诸葛菜DNA导入所致。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 吴沿友  蒋九余  帅世文  姚良珍  
本文报导诸葛菜的细胞遗传学研究结果。通过观察诸葛菜体细胞染色体数目及其频率,发现诸葛菜的体细胞组成很复杂,只有60.68%的2n=24的细胞.其它细胞的染色休数呈6的倍数变化,证实了诸葛菜是四倍体的假设。诸葛菜花粉母细胞的减数分裂观察结果表明,中期Ⅰ,除有正常的12个二价体的细胞存在以外,还有24个单价体的细胞存在。后期Ⅰ和后期Ⅱ都出现了染色体分割现象。此外,在诸葛菜体内还存在细胞融合现象。细胞融合-染色体分割是造成诸葛菜的体细胞染色体数目变化的原因。而体细胞的组成多样性及四倍性又是诸葛菜的叶形、株型、花色多样性的内在原因。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李再云  刘后利  
从甘蓝型油菜与诸葛菜属间杂种(2n=31)自交后代中,鉴定出一个新杂种植株(2n=25)。该新杂种在表型上为亲本中间型,且雄性不育。将其与甘蓝型油菜回交时,通过幼胚培养获得8个回交第一代植株(2n=44)。所有回交后代植株均可育,在花粉母细胞中形成22个二价体。来自诸葛菜的6条染色体可被全部丢失或部分进入末期核,也可在后期Ⅰ运动至细胞一极。首次获得的新材料可用于培育甘蓝型油菜与诸葛菜的附加系,并为研究诸葛菜的染色体组结构提供新信息。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 韩德俊  袁本威  胡甘  陈耀锋  李振岐  
综述了农杆菌介导的油菜等芸薹属植物高效转化体系建立的影响因素,总结了基因工程在改良油 菜等芸薹属植物性状中的最新研究进展,评述了植物in Planta转化法在油菜中的应用。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 石淑稳  周永明  孙学成  张献龙  
以甘蓝型油菜(BrasicanapusL.)9506品系的下胚轴为受体,用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)介导,进行了除草剂Glufosinate抗性基因(pat)的转化试验,得到了抗卡那霉素(Kan)选择剂的小植株,并对影响转化的一些因素进行了研究。试验结果表明:Kan和羧苄青霉素(Cb)对芽再生均具有很强的抑制作用;用含2,4-D的培养基对下胚轴进行预培养和选择培养基中附加AgNO3均能促进转化细胞的生长和芽的再生。转化植株对Glufosinate除草剂的抗性和分子验证工作正在进行中。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 丁广大  王改丽  叶祥盛  李权  石磊  徐芳森  
氮是植物生长发育所必需的大量营养元素。油菜对氮肥的需求量较大,氮肥利用率低。不同油菜品种的氮效率存在较大的基因型差异。与氮低效基因型油菜相比,氮高效基因型油菜在氮的吸收、转运、代谢、光合作用以及再利用等方面表现出显著的优势。同时,参与上述过程的基因包括硝酸根转运基因(NRT)、铵离子转运基因(AMT)、编码植物氮代谢相关酶类的基因以及其他基因等的表达水平也受到氮水平的显著影响,并在氮高、低效基因型间表现出显著的差异。本文主要从甘蓝型油菜氮效率的基因型差异、氮高效的生理与分子遗传基础等方面简要介绍了近年来关
[期刊] 西南农业学报  [作者] 梁明山  陶震  
利用启动子探针型载体pSUPV2首次从诸葛菜总DNA中克隆了7个具有启动功能的DNA片段。转化E.coli表明最高卡那霉素(kna)抗性为140μg/ml,最低为20μg/ml。含启动子片段的7个重组质粒分别命名为pSUPZ1-7。Southren印迹表明pSUPZ6对Kna的抗性功能来源于诸葛菜的10kb、5kb和3.9kb片段。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李再云  刘后利  
对诸葛菜减数分裂的研究表明,染色体在终变期表现出30多种配对构型。其中主要的9种为:12Ⅱ,10Ⅱ+1Ⅳ,8Ⅱ+2Ⅳ,9Ⅱ+1Ⅳ,6Ⅱ+2Ⅵ,8Ⅱ+1Ⅶ,6Ⅱ+1Ⅵ+1Ⅶ,7Ⅱ+1Ⅹ,5Ⅱ+1Ⅳ+1Ⅹ。121Ⅱ的构型与其它构型各约1/2。四、六、八、十等多价体为环状或链状。在中期Ⅰ时观察到高频率的次级联会。以上结果表明诸葛菜的染色体间存在高度同源性,故其可能为一自然多倍体种。另外,诸葛菜的10条染色体形成一个完整的染色体环,这表明其12对染色体中有5条非同源染色体发生了相互易位。文中还对诸葛菜染色体组所具有的特殊结构的意义等进行了讨论。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王爱云  李栒  胡大有  
用苯胺蓝染色法,在荧光显微镜下观察了诸葛菜的花粉在甘蓝型油菜、白菜型油菜和芥菜型油菜的柱头上的黏附、萌发及萌发花粉管在柱头和花柱中的生长、伸长情况.结果表明,诸葛菜花粉很难在3种类型油菜的柱头上黏附和萌发,同时在花粉黏附的部位及其附近柱头乳突细胞内产生大量胼胝质;萌发的少量花粉粒,其花粉管生长迟缓,且发生严重扭曲、肿胀等畸形现象,从而导致其进入柱头也比较困难;少数花粉管能穿过柱头进入花柱,但时常有异常胼胝质沉积在花粉管中.另外,诸葛菜花粉与3种类型的油菜柱头的相互作用不同,即亲和力不同,表明诸葛菜与芸薹属杂交,存在严重的生殖隔离障碍,而且主要是受精前障碍.
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 张玮玮  袁素素  王财成  叶秀娟  
通过柱层析技术从诸葛菜种子中分离抗真菌蛋白,并采用纸片扩散法、琼脂平板稀释法和凹玻片法对抗真菌蛋白的抑菌活性和稳定性进行研究.结果表明:从诸葛菜种子中分离出一种分子质量约为10 ku的抗真菌蛋白,命名为Zp;经QE质谱鉴定,Zp蛋白可能是诸葛菜种子中的一种防御素蛋白.Zp蛋白对11种植物病原真菌均具有较强抑制作用,其中对尖孢镰刀菌生长的半抑制浓度(IC_(50))为54.36μg·mL~(-1),对其孢子萌发的IC_(50)为15.97μg·mL~(-1).Zp蛋白的抑菌活性在温度0~100℃和pH 1~14的范围内稳定,其对有机溶剂(15%甲醇、乙醇、异丙醇、乙醚和丙酮)和金属阳离子(50~250 mmol·L~(-1) Mg~(2+)、K~+、Mn~(2+)和Ca~(2+))也具有较强的耐受力.
[期刊] 华北农学报  [作者] 邢蔓  谭太龙  李健  邬贤梦  官春云  熊兴华  
为提高油菜含油量,构建了基于油菜磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因(PEPC)的ihPRNA植物表达载体。分别从甘蓝型油菜基因组中克隆了种子储藏蛋白NAPiN基因启动子(315 bP)、PEPC基因的外显子片段(246 bP)及PEPC基因的内含子(754 bP),包含了其剪切位点之前4 bP和之后18 bP片段。通过中间载体PbluEsCRiPtⅡsK(+)再构建到Pbi121中,构成种子特异表达的内含子剪接的PEPC基因的RNA干扰载体P bi121.NP+iP-。利用农杆菌介导法对湘油15号进行遗传转化,获得卡那霉素抗性转化植株9株,PCR检测证实外源片段成功导入其中7株油菜基因组中。对t2种子...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 张羽  张晓娟  李英  谌国鹏  孙晓敏  
为探索SCOT标记在油菜遗传多样性研究中的应用,本利用36对有多态性的SCOT标记和在油菜多样性分析中广泛使用的30对SRAP标记,对65份陕南地区甘蓝型油菜高代材料进行遗传多样性分析。结果表明,SCOT标记平均每个标记检测到5个等位变异,每个SCOT位点的遗传多态性信息含量在0.28~0.81,平均值为0.57,供试材料的遗传相似系数集中在0.56~0.89。平均每个SRAP标记检测到4个等位基因,每个SRAP位点的遗传多态性信息含量在0.17~0.85,平均值为0.51。供试材料的遗传相似系数集中在0.50~0.88。本试验得出,SCOT标记的聚类结果和SRAP标记近似,SCOT标记的多态...
[期刊] 华北农学报  [作者] 黄镇  许婷  班元元  刘欢  范胜栩  杨丽  徐爱遐  
甘蓝型油菜的白花性状是一种有用的指示性状,本研究以甘蓝型白花油菜及其分离群体为材料,对甘蓝型油菜的白花性状的遗传规律进行了研究。结果表明,甘蓝型油菜的白花性状受1对不完全显性基因控制。利用集团分离法(BSA)对白花基因进行AFLP分析,在256对AFLP引物中共获得6个与白花基因紧密连锁的分子标记。EA11MC04与EA12MC01为基因两侧最近的分子标记,其遗传距离分别为0.8,1.0 cM。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 刘志文  单连民  韩旭  毛玮  
总结了小孢子培养技术在油菜新品种选育和材料创新、群体构建、复杂性状的遗传分析和转基因等上的应用,概述了转基因技术在油菜品质改良、抗性提高、雄性不育系的选育等方面的进展,综述了DNA分子标记在油菜遗传图谱构建和基因定位、指纹图谱和分子标记辅助选择等各个方面的进展,并对这三大现代生物技术的应用前景进行了展望。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 林良斌  官春云  周小云  熊兴华  
为了选育出稳定的转基因抗虫油菜新品种 ,采用卡那霉素抗性分析和 PCR检测技术对转基因抗虫油菜中Bt杀虫蛋白基因的遗传行为进行了研究 .连续三代的研究结果表明 :Bt杀虫蛋白基因以单拷贝、杂合地整合到转基因植株 (T0 1,T0 2 ,T0 3,T0 5 ,T0 6 ,T0 7,T0 8)的基因组中 ,并稳定地遗传给后代 .纯合转基因株系杂交分析表明 ,在不同 T0 转基因植株中 Bt杀虫蛋白基因整合位点是不同的 ,T0 1和 T0 5或 T0 3和 T0 8的 Bt杀虫蛋白基因整合位点是同源染色体的不同座位 ,而其他转基因植株的 Bt杀虫蛋白基因整合位点是在非同源染色体上
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