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[期刊] 中国水产科学
[作者]
蔡云川 林黑着 吴开畅 李有宁 苏天凤 江世贵
解剖成熟珠母贝 (Pinctadamargaritifera)并采集其精子 ,在不同 pH、盐度和温度条件下进行激活实验。结果显示 ,水温 2 5℃、盐度 34、pH 8.5以下时 ,珠母贝精子的激活率与活力均很低 ,pH 9.0～ 10时激活率与活力均较高 ,pH 9.5时的激活率最高 ;在水温 2 0℃ ,盐度 34时珠母贝精子只能在pH 9.5～ 10激活 ,且激活率与活力均比 2 5℃时低。在水温 2 5℃ ,pH 9.5时 ,精子在盐度 10～ 4 5能激活 ,盐度 2 5～ 35时激活率和活力很高 ;在水温 2 0℃ ,pH 9.5时 ,精子只能在盐度 2 0～ 4 0时激活。当盐...
关键词：
珠母贝 精子 激活 pH 盐度 温度
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
赛务加甫 张立 彭新荣 郭志林 杨丽 李向臣 何宽军 安志兴 张涌
研究了绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞的孤雌激活作用,确定了绵羊精子提取物的最佳注射剂量,并将其孤雌激活效果与离子霉素联合6-DM AP法的激活效果进行了比较。结果表明,绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞有孤雌激活作用,最佳注射剂量为每个绵羊卵母细胞注入2~4 pL浓度5~6 m g/mL的绵羊精子提取物;绵羊精子提取物的孤雌激活效果与离子霉素联合6-DM AP法的激活效果差异不显著。
[期刊] 水产学报
[作者]
王梅芳 余祥勇 刘永 毛勇 于非非
通过比较不同pH值(5.5~9.5)、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响,选择其中无激活精子作用又对其生理特性(活力,寿命,受精能力等)无影响者,加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液,精液与保护液按1∶10和1∶20的比例混合,样品按4组不同的降温程序平衡后转入液氮冷冻,比较其超低温冻存的效果。结果表明:以海水(pH7.5~8.0)为基础液,配制10%DMSO作为抗冻保护液,精液与保护液比例为1∶20,在低温(0~4℃)中平衡约30min,在距液氮面15cm、5cm处分别停留5min、10min后转入液氮(-196℃),冻存精子效果良好。冷冻24h、48h及5个月后...
关键词：
马氏珠母贝 精子 超低温保存
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
邓正华 陈明强 李有宁 赵旺 林先鑫 黄桂菊 王雨
比较运输方式及环境温度对合浦珠母贝稚贝运输中的存活影响,从而为稚贝运输过程中的运输方式、环境温度及运输时间的把握提供借鉴和参考。以3月龄稚贝为实验材料,运用无水干露、加水淹没及包装充氧等3种方式,分别在环境温度为5、13、21和29℃下模拟运输。每隔3 h从每组运输条件下取出1组实验贝,转移到正常养殖环境下暂养恢复,经48 h后统计其存活率。对运输时间与存活率之间进行非线性参数曲线拟合,计算每组运输条件下的致死时间(T_0)、半致死时间(T_(0.5))及全致死时间(T_1);运用双因素方差分析,Duncan氏方法比较3种运输方式及4种环境温度间的均值。结果显示:包装充氧优于其他两种运输方式,而加水淹没又优于无水干露;温度为13℃和21℃时优于其他2个环境温度,环境温度为17.60～20.05℃是稚贝运输的最佳温度。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
敖红 王海 连正兴 李宁 夏国良
激活是体细胞核移植技术的关键步骤。本研究对常用化学激活剂乙醇、钙离子载体A2 3187和离子霉素以及添加 6 二甲基氨基嘌呤 (6 Dimethylaminopurine ,6 DMAP)和放线菌酮 (cycloheximide ,CHX)对山羊卵母细胞的激活效果以及不同卵龄的卵母细胞激活后体外发育效果进行了比较。结果表明 :离子霉素处理组激活率显著高于乙醇和A2 3187处理组 (89.6 %vs 6 3.5 % ,6 8.7% ;P
关键词：
绵羊 卵母细胞 化学激活
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
邱达观 兰帅勤 陈煜 毛晶 臧战 VASQUEZ Hebert Ely 於锋 王爱民 郑兴 顾志峰
栉江瑶(Atrina pectinata)是我国重要的海洋经济双壳贝类，近年来其养殖生产活动备受养殖企业关注，为发展和优化其人工繁殖技术，本研究探查了人工海水中铵离子浓度和pH的变化对新鲜精子游泳运动的激活作用，定量描述了高度活化状态下精子曲线运动速率(VCL)、直线运动速率(VSL)、平均路径速度(VAP)、鞭毛摆动频率(BCF)的运动学特征，并对精子ATP含量、ATP酶和SOD酶活性进行了记录。结果显示，简单提高海水pH可略微提高精子运动率，但无法使精子进入高度活化状态；有铵离子存在的碱化海水可有效激发精子游泳运动，3 mmol/L氨海水激活效果最佳。经3 mmol/L氨海水激活后，精子活力等级(MI)在21 min内一直保持在MI≥4的状态，在激活的前3 min内精子运动率都在80%以上，VCL>56 μm/s，VSL>17 μm/s，VAP>30 μm/s，BCF>6 Hz。精子ATP含量在激活5 min后降低至初始含量的30.29% [(128.80±66.92) μmol/g prot]，随后无显著变化(P>0.05)。精子Na~(+)K~(+)-ATP酶和Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP酶活性在运动过程中较为稳定，其中，Na~(+)K~(+)-ATP酶活性较低[(0.62±0.029) μmol Pi/mg prot/h]，Ca~(2+)Mg~(2+)-ATP酶活性较高[(6.08±0.036) μmol Pi/mg prot/h]。精子SOD酶活性15 min内呈逐渐降低的趋势，随后维持稳定。本研究可为栉江瑶精子激活机制研究奠定基础，助力发展栉江瑶人工繁育技术。
[期刊] 企业管理
[作者]
周怀民
长尾理论为利用互联网技术,满足分散的个性化小批量需求,开创新的盈利模式提供了方向性指导,但如何应用长尾理论设计自己独特盈利模式却因"企"而异。下面两个案例也许能给你一些启发。
[期刊] 企业管理
[作者]
陈春花
原来是雇员需要了解组织的需求,现在是组织必须了解雇员的需求;过去是成员依赖于组织才可以创造价值,今天是组织要依赖于成员才可以创造价值。急速发展的互联网和悄然兴起的技术革命巨浪般奔涌而来,以排山倒海之势冲击着几乎所有组织,而被冲击的组织,既要沉稳地承受改变的压力和不适,更需要寻找机会努力上
[期刊] 中国水产科学
[作者]
张涛 柳凌 郭峰 张洁明
在6种不同盐度(34、32、30、28、26和22)激活液、3种不同K+浓度(25 mmol/L、30 mmol/L和35 mmol/L)稀释液和不同保存时间(0 h、24 h、48 h、72 h和96 h)条件下,对日本鳗鲡(Anguilla japonica)精子的活力进行观察和测定。结果表明,激活液盐度为30时精子活率和运动精子百分比均最高,对应平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(VSL)和平均路径速度均最高,由此推测自然界中日本鳗鲡产卵环境的盐度在30左右;稀释液中K+浓度为30 mmol/L时精子活率和运动精子百分比均最高,对应平均曲线运动速度(VCL)、平均直线运动速度(...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘红林 范必勤 陈宜峰 汪河海
昆明鼠卵母细胞ｈＣＧ注射后１８￣１９ｈ用体积分数为７％的乙醇作用５￣６ｍｉｎ，能够获得较为理想的激活效果，激活率高达９０％。乙醇激活处理时，卵丘细胞以及细胞外Ｃａ＼＋＼｛２＋＼｝、Ｍｇ＼＋＼｛２＋＼｝的有无对卵子的激活效果均无显著影响。３７℃下激活处理与３０℃下相比，激活率无显著差异，但卵子碎裂率显著提高。性成熟前小鼠超排的卵子虽然也能被激活，但激活率低于成熟后小鼠超排的卵子。哺乳动物卵母细胞成熟分裂抑制剂ＮａＦ和ＩＢＭＸ不能抑制乙醇处理卵的孤雌激活，但显著地抑制了激活卵子的卵裂。
关键词：
小鼠 卵母细胞 乙醇 激活
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李裕强 张琇 安志兴 张涌
比较了Ionomycin(离子霉素)和乙醇及其与其他物质的组合激活牛卵母细胞的效果,并研究了去核时间、细胞松弛素B、末期去核等对去核效率的影响。结果表明,配合使用6-二甲氨基嘌呤(6-DMAP)或放线菌酮(CHX)可显著提高Ionomycin或乙醇激活牛卵母细胞的效率,Ionomycin+6-DMAP激活的牛孤雌胚在8/16细胞之后的发育率明显高于乙醇+6-DMAP(或CHX)。牛卵母细胞的去核在成熟培养20h或之前进行效果较好,此时有较高比率的卵母细胞中第一极体与染色体位置靠近。牛卵母细胞在不含细胞松弛素B的操作液中可进行去核,但所得核移植胚胎的卵裂率明显下降,而对8/16细胞胚之后的发育...
关键词：
卵母细胞 牛 去核 激活
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李雪峰 安志兴 郭继彤 张涌
为确定牛体细胞核移植胚胎的激活条件 ,比较了几种不同化学激活方法对牛卵母细胞激活的影响。选择明显具有第一极体的成熟卵母细胞 ,随机分为 9组 :1Ionomycin(I) +6 -甲氨基嘌呤 (D) (ID) ;2 I+D+细胞松弛素 B(CCB) (IDC) ;3I+放线菌酮 (X) (IX) ;4 I+X+CCB(IXC) ;5体积分数 7%乙醇 (E) +D(ED) ;6E+D+CCB(EDC) ;7E+X(EX) ;8E+X+CCB(EXC) ;9Sr2 + +CCB(SC)。Ionom ycin和乙醇的处理时间为 5min,6 - DMAP± CCB的处理时间为 4 h,放线菌酮± ...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
叶荣 陈学进 郭宪 杨利国
比较 3种化学激活方法和 4种电化学激活方法对牛体外成熟卵母细胞进行孤雌激活的效果。结果显示 ,单独用离子霉素和用离子霉素 + 6 DMAP +CB或 +CHX +CB激活牛卵母细胞 ,两者之间差异极显著 (P 0 0 5 )。结果表明 ,虽然电化学激活方法最高可获得 82 9%的卵裂率 ,比化学激活方法中最好的高 4 8% ,但后者不需电融合仪 ,操作相对简便。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
李莉 赵浩斌 魏庆信
为提高核移植的效率 ,采用SHIMADZU生产的SSH 2电融合仪进行小鼠卵母细胞电激活及 2 细胞胚胎电融合 ,结果表明 :①不同脉冲强度的卵激活率有极显著差异 (P
关键词：
核移植 卵母细胞 激活 电融合
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
曹鸿国 刘俊平 张涌
对小鼠卵母细胞进行孤雌激活用于单性生殖研究。取成年昆明白小鼠进行超数排卵,乙醇激活,同小鼠输卵管上皮细胞共培养并添加mM16培养基培养至早期囊胚阶段,移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,换成ES细胞培养液继续培养,分离消化ICM,重新接种,对分离出的ES样细胞集落进行分离培养鉴定。结果显示,小鼠卵母细胞激活率为96.99%,2-细胞发育率为93.17%,桑椹胚发育率为80.33%,囊胚发育率为73.22%。小鼠孤雌激活囊胚中分离的ES样细胞集落具有一系列ES细胞所特有的特征,如呈现出岛屿状形态,碱性磷酸酶染色为阳性,体外能够自发分化成上皮样或单个散在分布的细胞等。试验证明,小鼠孤雌胚中可以分离出...
关键词：
小鼠 卵母细胞 孤雌激活 ES细胞样集落
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