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[期刊] 中国水产科学
[作者]
孙丽萍 薛长湖 许家超 李兆杰 蔡跃飘 赵雪
采用硫酸铵沉淀、离心超滤、DEAE-SephadexA25、SephadexG-100和SephacrylS-300HR柱层析等方法从海洋食藻性锈凹螺(Chlorostomarustica)消化腺中分离纯化出一种褐藻胶裂解酶(Alginatelyase),得到电泳纯酶制品,并对此酶的酶学性质进行了研究。结果表明:此褐藻胶裂解酶的分子量为28kD,反应的最适温度为40℃,具有热不稳定性,最适pH为7.0;酶的反应受多种离子的影响,Mn2+、Co2+和Cd2+对此褐藻胶裂解酶活性具有明显的抑制作用,而Mg2+、Zn2+、Na+和K+则具有促进作用;采用透明圈法和底物法验证了此裂解酶对聚甘露糖醛酸和...
关键词：
锈凹螺 褐藻胶裂解酶 特异性
[期刊] 水产学报
[作者]
康平 汪秋宽 宋琳琳 徐玲
采用(NH4)2SO4分段盐析、透析、阴离子(DEAE-52)交换柱层析、SephadexG-200凝胶柱层析等分离纯化技术,通过SDS-PAGE电泳分析了皱纹盘鲍内脏酶的组成,结果表明鲍内脏酶主要含有两种褐藻胶裂解酶Ⅰ,Ⅱ,一种纤维素酶,一种琼脂酶。对酶的酶学性质分析结果表明两种褐藻胶裂解酶Ⅰ,Ⅱ的最适pH分别为8.6,7.2,最适温度为35℃,分子量分别为35.2 ku,67 ku;两种褐藻胶裂解酶的热稳定性比较差,且易受金属离子影响;纤维素酶的最适pH为5.0,最适温度为40℃。并确定了皱纹盘鲍内脏酶分离纯化的方法及参数,为进一步研究鲍内脏复合酶的性能提供了基础参数。
关键词：
皱纹盘鲍 褐藻胶裂解酶 纤维素酶 纯化
[期刊] 水产学报
[作者]
袁丽 高瑞昌 薛长湖 郝淑贤 于刚
采用化学氧化法制备了分子量大于6 ku的褐藻胶裂解物HDX-A,研究其提高凡纳滨对虾保水性的机理。结果表明,经1%的HDX-A溶液浸泡1 h凡纳滨对虾虾仁增重率为14.6%,且经冻藏20 d后解冻损失率和蒸煮损失率均低于水浸泡和3%复合磷酸盐处理。冻藏后,HDX-A处理组ATPase活性降低了40%,显著低于未处理和水处理样品变化量(P0.05),而流变性特征与新鲜样品比较除破断力降低外均无显著差异(P>0.05)。组织学结果显示,HDX-A能影响冻藏过程中冰晶的生成和生长,单位面积横切面内孔洞的数目较多且较小,其中面积小于100μm2的孔洞比...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
袁丽 高瑞昌 薛长湖 郝淑贤 于刚
以褐藻酸钠为原料,采用过氧化氢氧化法制备褐藻酸钠裂解物,分析了裂解物对南美白对虾Penaeus vannamei虾仁质量的效果,并研究了对虾仁冷冻后品质的影响。结果表明,褐藻酸钠裂解物中的分子量大于6kDa的裂解物HDX-A能有效改善冷冻后水分流失,虾仁经1%的浸泡液处理1h后进行冻藏不同时间后再解冻,HDX-A能够有效地阻止水分流失,从而保持虾仁水分且随时间的延长其保持能力并不减弱,而且随浸泡溶液浓度的增加效果增强。HDX-A主要是通过增加自由水含量而避免了冷冻后虾仁水分和营养流失。HDX-A还可有效地降低冷冻虾仁的蒸煮损失,1.5%处理的样品蒸煮损失最低,整体上蒸煮损失低于20%,120d...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王斌 甘纯玑 管华诗 谢苗
以九孔鲍(Haliotis diversicoloeaquatilis)为原料制备一定纯度的褐藻酸酶,并对影响其降解褐藻胶的条件和产物的性质进行分析。该酶的最适温度和pH分别为45℃和7.0;与磷酸盐缓冲液相比,其在Tris-HCl缓冲液中与底物的亲和力相对较高。动力学曲线表明酶解反应主要发生在1 h之内,在2 h之内达到平衡,酶的剂量和底物的浓度对该平衡起到一定的影响作用。反应2 h之后,添加同数量的酶或者底物发现,产物的反馈抑制只是反应达到平衡的一个影响因素,而酶的变性失活也起到了重要的作用。金属离子对酶的活性具有明显的影响,Co2+、Mg2+对酶的活性具有较强的促进作用,而Cu2+、Ag...
关键词：
九孔鲍 褐藻酸酶 降解
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
刘荣厚
生物质热裂解制取生物油技术是在中温(500～650℃),高加热速率(104～105℃/s)和极短气体停留时间(小于2s)的条件下,将生物质直接热解,产物经快速冷却,可使中间液态产物分子在进一步断裂生成气体之前冷凝,从而得到高产量的生物油。该技术是一种环境友好的新型生物质能利用技术,具有广阔的应用前景。对生物质热裂解机理、生物质热裂解反应器类型、生物质快速热裂解过程的影响因素、生物油特性、生物油的精制及应用等方面进行了阐述,以期为该技术的发展提供参考。
关键词：
生物质快速热裂解 生物油 反应器
[期刊] 水产学报
[作者]
管卫兵 王桂忠 李少菁
In general,crab receives copious quantities of seminal fluid during mating,and stores them in special seminal receptacles,viz.spermatheca,for a prolonged period.The spermatheca of the advanced brachyuran crabs has been described for many species.The spermatheca is a dilation of the proximal region o...
关键词：
蟹 精荚 转移 纳精囊
[期刊] 水产学报
[作者]
杨蕙萍 童圣英 王子臣
利用分光光度计比色法测定了２～３ｃｍ的皱纹盘鲍（ＨａｌｉｏｔｉｓｄｉｓｃｕｓｈａｎｎａｉＩｎｏ）的淀粉酶和褐藻酸酶的最适温度和最适ｐＨ以及１１种金属离子对其的影响。结果表明：最适温度分别为３０℃、３５℃，最适ｐＨ分别为６．２４、７．１９，在最适温度下的活化能分别为５．０３×１０４Ｊ／ｍｏｌ和１．３３×１０４Ｊ／ｍｏｌ；皱纹盘鲍的三种主要消化酶的活性依次为：褐藻酸酶＞蛋白酶＞淀粉酶。Ｃｕ２＋、Ｈｇ２＋、Ａｇ＋、Ｐｂ２＋对淀粉酶活性具有显著的抑制作用，其他离子则具有促进作用，其中又以Ｍｎ２＋、Ｂａ２＋、Ｃａ２＋三种金属离子尤为突出，其促进作用比对照组高一倍以上。而对褐藻酸酶，Ｚｎ２＋、Ａｇ＋、Ｈｇ...
关键词：
皱纹盘鲍,淀粉酶,褐藻酸酶,金属离子
[期刊] 水产学报
[作者]
穆惠敏 沈照鹏 林月 崔欣 孟蕾 江晓路
为解决当前低黏度及超低黏度褐藻胶生产工艺中存在的不足,本实验以海带为原料,利用褐藻胶裂解酶降解制备低黏度及超低黏度褐藻胶,研究了分子量、p H、温度对黏度的影响,确定了碱消化的最佳条件,探究了酶解工艺中加酶量、酶解时间及原料的初始黏度对褐藻胶产品的影响。结果显示,通过控制加酶量(100~500 U/g),酶解30 min即可得到低黏度及超低黏度褐藻胶,其中加酶量为100~330 U/g时可得到低黏度褐藻胶,加酶量增加至330~500 U/g时,可得到超低黏度褐藻胶,且酶解法得到的褐藻胶样品分子量均一度高,工艺节水率高达10%~50%;同时研究发现酶解样品黏度与原料初始黏度相关性不大,只在较短时间内表现出相关性,该工艺具有较高的原料适用性。
[期刊] 水产学报
[作者]
唐学玺 杨震 黄健 严小军
利用生物化学的方法，研究了海带被褐藻酸降解菌感染过程中的抗氧化酶活性的变化。结果表明，（１）在褐藻酸降解菌感染的初期，海带细胞内超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）的活性急剧升高，随着感染的进行，二者的活性逐渐下降。（２）抗坏血酸过氧化物酶（ＡＰＸ）的活性在感染的初期变化不明显，而在感染的后期活性有所增加。（３）在整个感染的过程中，谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＰＸ）的活性的变化无规律性，没有表现出明显的升降变化。说明这四种酶在海带抵抗褐藻酸降解菌感染的过程中所起作用的大小和作用的时期有所差异．
关键词：
海带 褐藻酸降解菌 感染 抗氧化酶
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
许加超 卢伟丽 高昕 付晓婷 薛长湖
采用氯化钙体系制作的褐藻酸钠凝胶,其性能受氯化钙浓度、温度及褐藻酸钠的甘露糖醛酸(M)及古罗糖醛酸(G)的比值(即M/G)影响较大。当氯化钙溶液的温度为50℃、浓度为2.0%时,凝胶的性能最佳;高G的褐藻酸钙凝胶的拉伸强度优于高M的,但是吸水性能却不如高M的褐藻酸钙凝胶。通过红外光谱分析褐藻酸钠成凝胶前后结构变化,主要是-OH峰位置向高波数方向偏移以及C-H伸缩振动变弱,这是褐藻酸钠与Ca2+之间发生交链的结果。
关键词：
M/G 褐藻酸钠凝胶 氯化钙
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王斌 谢苗 曾竞华 邓海燕 甘纯玑
利用反相悬浮交联法制备磁性壳聚糖微球(magneticchitosanmicrospheres,M-CS),并对褐藻酸酶进行固定化研究。结果表明,M-CS呈规则的圆球形,具有较好的磁响应性,可稳定地保存在弱酸和弱碱中。其弱碱交换量随着戊二醛用量的增加而减少,悬挂醛基则相应地增加。M-CS对褐藻酸酶的吸附动力学实验表明,M-CS容易吸附褐藻酸酶,但吸附的酶量受载体与酶的比例、溶液的离子浓度、戊二醛的用量、溶液pH的影响明显,而温度对吸附的酶量的影响则相对较弱。酶学性质研究表明,相对于游离的褐藻酸酶,固定化酶的最适温度略有升高,可明显改善其热稳定性和酸碱稳定性,与底物的亲和力也有所增强。
[期刊] 华北农学报
[作者]
徐欢 段盛文 冯湘沅 郑科 杨琦 汪启明 成莉凤 彭源德
为使苎麻生物脱胶果胶裂解酶PelG403高效表达。将pelG403从重组质粒pEASY-Blunt E1-G403更换至质粒拷贝数更高的pET28a载体中,导入Escherichia coli BL21(DE3)后进行诱导表达。采用DNS法进行酶活力测定,通过SDS-PAGE和Western Blot分析检验PelG403表达效果,并对其序列进行分析鉴定。结果表明:pET28a-G403/BL21的果胶裂解酶活力为335.8 U/mL,较pEASY-Blunt E1-G403/BL21提高了3.05倍;工程菌pET28a-G403/BL21表达产物分子量比预测带His标签的融合蛋白分子量(43.6 ku)略小;PelG403含387个氨基酸,N末端前35个氨基酸为信号肽;理论pI值为7.64,有4个半胱氨酸,不稳定系数为27.42;其蛋白结构域含有典型的右手β-螺旋结构,属于Pec lyase C家族。因此,将pelG403从重组质粒pEASY-Blunt E1-G403更换至pET28a载体中,并导入E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,是苎麻脱胶果胶裂解酶基因pelG403高效表达的方法和途径,同时对其序列进行分析鉴定,为果胶裂解酶的纯化、关键位点分析、分子改造及其脱胶功能特性研究奠定基础。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王艳玲 唐学玺 杨震
采用安藤芳明选择性培养基从自然发病明显的海带幼苗上分离出8株褐藻酸降解菌。研究表明,8株菌能够不同程度地降解褐藻酸钠,菌株A1和A2表现出较强的降解能力,接种1d后液体培养基即变清。温度是该菌大量繁殖的决定性因子,其生长的最适温度为20℃,最适pH7.5。褐藻酸钠质量分数为0.5%～0.6%时,不同氮源和碳源对菌体生长的影响不同,其中有机氮和铵态氮有利于菌体生长,尿素和硝酸钠抑制菌体生长;只有在培养基中含有褐藻酸钠时,菌体才能正常生长。
关键词：
褐藻酸降解菌 生长条件 海带
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