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[期刊] 西南农业学报
[作者]
梁芳 邓祖丽颖 许申平 张燕 崔波
【目的】建兰花叶病毒(CyMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)是侵染蝴蝶兰最主要的2种病毒,给蝴蝶兰产业造成巨大经济损失。本文建立了快速检测这2种病毒的方法,并为培育同时抗CyMV和ORSV的蝴蝶兰新品种奠定基础。【方法】根据2种病毒CP基因序列设计了2对特异性引物,运用RT-PCR方法同时检测这2种病毒,利用反义RNA技术构建2种病毒CP基因的融合表达载体。【结果】利用设计的特异性引物检测12株蝴蝶兰样品,有25%同时检测出2种病毒,在同一PCR反应体系中,扩增出2个目的条带清晰无杂带。从感病蝴蝶兰叶片总RNA中克隆出CyMV CP基因的125 bp片段和ORSV CP基因的164 bp片段。将CyMV的CP基因片段以3’→5’方向与表达载体p CAMBIA1300连接,命名为p CAMBIA1300-CyMV,经酶切及菌落PCR鉴定可获得125 bp的小片段;再将ORSV的CP基因片段以3’→5’方向与p CAMBIA1300-CyMV连接,命名p CAMBIA1300-CyMV-ORSV,经酶切及菌落PCR鉴定可获得289 bp的片段。【结论】所设计的2对特异性引物能够在同一PCR体系中快速高效地检测出CyMV和ORSV,含2种病毒CP基因的反义融合表达载体构建成功。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈和明 吕复兵 李佐 肖文芳 朱根发
为构建蝴蝶兰品质综合评价体系及分级标准,2010—2012年对收集保存的213份蝴蝶兰资源主要品质性状进行观察统计,应用变异分析、主成分分析、层次分析、聚类分析和判别分析建立综合评价体系。18项品质性状的平均变异系数为34.28%,花梗侧分枝数的变异系数最大,为128.45%,类型的变异系数最小,仅为9.71%。运用主成分分析将18项评价指标压缩成10个综合因子,并确定株幅、叶长、叶宽、花梗数、花梗侧分枝数、花梗长、花梗粗、花朵长度、花朵宽度、花瓣厚、花朵数、花朵间距、花色、感病指数、花香、类型等16项指
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
魏雪涛 李银 鲍恩东
根据已发表的马立克氏病病毒(MDV)血清I型与鸡白介素2(IL2)DNA序列,设计两对引物,用PCR扩增出MDVgB基因和IL2基因,并克隆入pEGFPC1载体,构建了载体pC1gBIL。通过酶切分离外源基因表达盒,并将外源基因表达盒插入pTK2B质粒,成功构建了转移载体pTCgBIL。将转移载体pTCgBIL转染CEF细胞,培养36～48h后,经荧光显微镜观察,有荧光出现,证明该载体得到表达,并通过Westernblotting鉴定证明MDVgB和IL2的融合基因得到了有效的表达。
[期刊] 林业科学
[作者]
王俊 王慧瑜 赵玉安 杨书才
‘郑农红玉’是郑州市农林科学研究所以２００３年从蝴蝶兰实生开花苗中选出的优良单株为亲本、采用杂交育种的方法选育出的蝴蝶兰优良单株，经过河南、陕西、河北等地区域试验选出。株形紧凑，好养易催；花朵平均横径１０～１１ ｃｍ，平均主枝着花１０朵左右，颜色亮丽，花序排列整齐；货架期长。
关键词：
蝴蝶兰 良种 郑农红玉
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘秀清 章铁 孙晓莉
为建立一个稳定的蝴蝶兰RAPD反应体系,对RAPD反应体系中模板DNA、Taq DNA聚合酶用量、随机引物浓度、Mg2+浓度和dNTPs浓度等各项参数进行筛选比较。结果表明,最佳反应体系为:25μl反应体系中,其中含模板DNA(20 ng/μl)1.5μl,Taq DNA聚合酶(5 U/μl)0.4μl,随机引物(20μmol/L)1μl,Mg2+(25 mmol/L)2.5μl,dNTPs(10 mmol/L)0.5μl,10×PCR Buffer2.5μl,ddH2O 16μl。
关键词：
蝴蝶兰 RAPD 反应体系
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
卜朝阳
以蝴蝶兰花梗为初次诱导的外植体,对蝴蝶兰的离体繁殖途径进行了研究。结果发现,通过花梗腋 芽萌发可获得无菌芽,再以所得的嫩芽茎段和叶子作为离体培养的增殖材料,2-3个月后便可获得大量的不定芽。 该结果表明:(1)在初次培养中加入PVP并进行暗培养,其抗褐化效果最佳。(2)增殖培养基以MS+6-BA 0．5 mg／L+KT 1．0 mg／L+NAA 0．2 mg／L或MS+6-BA 2．0 mg／L+NAA 0．5 mg／L组合较好,其茎段萌发率均高 达90％,增殖倍数分别高达2．8和2．9;叶片芽的诱导率分别为56％和57％,增殖倍数最高达4．8和4．6。(3)经济 有效的壮苗和生根诱导培养基为...
[期刊] 华北农学报
[作者]
翟玉山 彭磊 杨永庆 邓宇晴 程光远 郑艳茹 徐景升
为探索甘蔗条纹花叶病毒与甘蔗的互作机制，利用酵母双杂交技术筛选与ＳＣＳＭＶ互作的甘蔗因子基因，利用ＰＣＲ技术克隆了ＳＣＳＭＶ的ＨＣ－ＰＲｏ、Ｐ３Ｎ－ＰＩＰｏ、ＣＰ和ＶＰｇ的编码区，构建到酵母双杂交诱饵载体Ｐ ｇＢＫＴ７上，获得了Ｐ ｇＢＫＴ７－ＨＣ－ＰＲｏ、Ｐ ｇＢＫＴ７－Ｐ３Ｎ－ＰＩＰｏ、Ｐ ｇＢＫＴ７－ＣＰ和Ｐ ｇＢＫＴ７－ＶＰｇ ４个诱饵载体。结果显示，将重组质粒转化酵母Ｙ２Ｈｇｏｌｄ酵母菌株后，酵母菌株在Ｓｄ／－ＴＲＰ平板上生长良好，表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性；在Ｓｄ／－ＴＲＰ／Ｘ－α－ｇａｌ平板上长出白色菌落未变蓝，在Ｓｄ／－ｌｅｕ、Ｓｄ／－ＴＲＰ／－ａｄｅ、Ｓｄ／－Ｔ．．．
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
饶雪琴 李华平
利用PCR重叠延伸技术(genesplicingbyoverlapextension,SOE)将番木瓜环斑病毒(Papayaring-spotvirus,PRSV)Vb株系的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因和Ys株系的复制酶(replicaseprotein,RP)基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了改进,并对改进的SOE的反应体系进行了优化,其中以Py-robestDNA聚合酶和60℃的退火温度为最佳。将融合基因VY构建在植物表达载体pCAMBIA2300上,测序结果表明,该融合基因的序列与设计相符。融合基因VY植物表达载体的构建,可为进一步获得对PRSV广谱抗性的...
关键词：
番木瓜 番木瓜环斑病毒 PCR 融合基因
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
陈之光 徐言 葛红 杨树华 赵鑫 寇亚平 朱晋宇 贾瑞冬 武荣花
【目的】研究萼脊蝴蝶兰Phalaenopsis japonica的开花特性与繁育特性，为萼脊蝴蝶兰杂交育种提供理论依据，也为濒危蝴蝶兰属Phalaenopsis植物种质资源保护提供研究基础。【方法】以温室条件下栽培的萼脊蝴蝶兰为材料，记录其花器官特性和开花进程，测定花粉活力与柱头可授性，分析花粉组织化学，估算杂交指数并进行人工控制授粉试验。【结果】(1)萼脊蝴蝶兰群体花期4月中旬至5月底，单株花期30～40 d，单花花期约30 d，开放时有香味。花蕾期为开花前1～7 d，初花期为开花后1～5 d，盛花期为开花后6～25 d，末花期为开花后26～30 d，凋谢期为开花后30～40 d。(2)总状花序，单株花序多为1～2个，单花序约有10朵花。(3)萼脊蝴蝶兰花粉为近圆形四合花粉，主要由脂质组成，适合虫媒授粉。(4)雌雄同株，且同步成熟，在盛花期(开花6～25 d)花粉活力与柱头可授性均达到最强，花粉活力高达84.98%，杂交指数为4。(5)自然授粉、自然自花授粉、去雄不授粉3种处理后的结实率均为0，而人工自花授粉、人工同株异花授粉和人工异株授粉的结实率高达60.00%、80.00%和93.33%，且人工异株授粉果实质量最好，种子最大，种子活力最高(82.69%)，单果实中种子数量约43 000粒。【结论】萼脊蝴蝶兰开花始于4月中旬，结束于5月底，盛花期持续约20 d，其繁育系统属于兼性异交，需要传粉者的类型。图4表3参26
[期刊] 西南农业学报
[作者]
闫海霞 何荆洲 黄昌艳 邓杰玲 王晓国 卜朝阳
为降低蝴蝶兰组培苗生产成本、缩短种苗繁育周期，利用瓶外生根技术，研究不同蝴蝶兰品种、组培苗的不同培养阶段、不同激素种类和浓度对组培苗瓶外生根的影响。结果表明，不同蝴蝶兰品种的组培苗瓶外生根有所差异，３个蝴蝶兰品种瓶外生根效果由好到次的排序是：＂柳林黑玫瑰＂＞＂文景天使＂＞＂大辣椒＂；经过壮苗培养的组培苗适宜进行瓶外生根；用１００ ｍｇ／Ｌ的ＩＢＡ溶液处理，瓶外生根效果最好，生根率为９４．８０％，平均根数为３．７２条，平均叶数４．２４片，生根时间为３８．００ ｄ；用１００ ｍｇ／Ｌ的ＮＡＡ溶液处理，瓶外生根效果较好，生根率为８６．８０％，平均根数为３．８４条，平均叶数３．３０片，生根时间为３６．．．．
关键词：
蝴蝶兰 组培苗 瓶外生根 激素
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
陈和明 吕复兵 李佐 肖文芳
为了更有效地克服蝴蝶兰属间杂交障碍，提高属间杂交成功率，从蝴蝶兰近缘属种质资源、属间杂交育种情况、属间杂交存在的问题和克服属间杂交障碍的方法等方面进行了阐述，并在此基础上对蝴蝶兰属间杂交的发展进行了展望。结果表明：1）与蝴蝶兰属间杂交成功的近缘属种质资源主要有21个；2）蝴蝶兰属间杂交组合最早于1931-01-01在英国皇家园艺学会（RHS）上正式注册登录，截至2020-12-31，在RHS上登录成功的蝴蝶兰属间杂交组合共有546个；3）从研究报道可知，蝴蝶兰与近缘属的杂交效率不高，属间杂交成功率在2.78%～12.50%，且主要以蝴蝶兰杂交种为主要亲本；4）通过扩大蝴蝶兰亲本杂交范围、重复授粉、正反杂交和胚拯救等手段能有效克服属间杂交不亲和性。因此，开展蝴蝶兰属间杂交能够为蝴蝶兰育种提供一些新的思路和方向。
关键词：
蝴蝶兰 近缘属 属间杂交 杂交障碍 展望
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李杰 匡萍 王芝娜 张银洁
为了获得抗冷性蝴蝶兰株系,测定了低温胁迫及温度回升对Phalaenopsis‘Taida Salu’×P.‘Dinghan Orange Anne’杂交后代4个不同株系及亲本的抗氧化酶活性、渗透调节物质和膜脂过氧化作用的影响,用主成分分析对各指标的变化率进行综合评价分析。结果表明:抗冷性程度不同的株系超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性所表现出来的差异,随温度降低,差值呈增大趋势;抗冷性强的株系在温度回升到正常条件时,可溶性糖、脯氨酸和丙二醛(MDA)含量、电解质渗漏率能恢复至处理前水平,而抗冷性弱的株系难以恢复。综合评价排序表明,P6为强抗冷株系,P4、P...
关键词：
蝴蝶兰 抗冷性 生理指标
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王冬云 汪建亚 蔡桁 蒋祥娥
以黄花蝴蝶兰的花梗腋芽诱导出的不定芽为外植体,利用正交设计法研究了培养基的无机营养、TDZ、有机添加物和蔗糖4种因素对不定芽增殖的影响。结果表明:蝴蝶兰不定芽增殖的最佳培养基配方为KC+TDZ 0.20 mg/L+椰子水200 mL/L+蔗糖14 g/L+柠檬酸30 mg/L,其中有机添加物的种类和浓度对不定芽增殖的影响最大。
关键词：
蝴蝶兰 不定芽增殖 正交设计 组织培养
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
刘荣维 梅庆超
１９８８一１９９０年，以蝴蝶兰为试验材料，进行了温度、光照和肥料对其花芽分化等过程影响的研究。结果表明：（１）在深圳的正常气候条件下，蝴蝶兰在９月遇２０℃左右的低温，１０月份抽出花芽，第２年的３月以后陆续开花。若能提早进行低温诱导，则花期可以提前。（２）从花芽形成到花芽抽出达１０公分长这段时间，重施磷肥，有助于花芽分化。待花芽分化稳定后，增施氮肥，花将开得更好。（３）光照强度对蝴蝶兰花芽分化影响不大。
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