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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
董秉义 陈永萱 许少玉 祁方巧 郭永红
从各地的蜜蜂和植物花上得到70多个螺原体(spiroplasma)分离物.用微量注射法接种健康蜜蜂,证明在蜜蜂和植物花上分离到的螺原体均对蜜蜂致病,并引起死亡.每头蜜蜂接种量:蜜蜂代表分离物Hs-1为1.4×10~7,荆条花的分离物 Fs-14为3.4×10~8,接种后3～6d,供试蜜蜂100%死亡,而对照蜜蜂全部存活.血清学的变形试验和 ELISA 方法测定各螺原体分离物血清学关系的结果,证明蜜蜂螺原体的抗血清,对蜜蜂上和植物花上分离到的螺原体大多数分离物都呈阳性反应,但反应强弱有明显差异,说明其间血清学关系比较复杂.根据以前的研究和本实验的结果,目前我国在蜜蜂上和植物花上分离到的螺原体,主...
关键词：
蜜蜂螺原体 花螺原体 致病性 血清学
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
阮康勤 于汉寿 张晶 纪燕玲 王志伟 陈永萱
为进一步了解蜜蜂螺原体的生长、生殖及致病特点,以分离自患"爬蜂病"蜜蜂体内的螺原体菌株M10为研究对象,测定了其生长曲线,利用透射电镜观察其不同生长期的形态。结果表明:在R-2培养基中,不同生长期的蜜蜂螺原体M10形态差异很大,但其形态变化又具有一定的规律性。延滞期的M10以粗短的形态为主;在对数期和稳定期,M10具有丰富的形态多样性,如芽状、分支状、串珠状等;到达衰亡期,M10则变得细长,菌体自身及菌体之间极易缠绕并聚集成团。此外,观察到M10具有尖端结构和纤毛状结构,大多数菌体具有"一尖一圆"结构,纤毛状结构长度差异显著。本研究首次描述了不同生长期蜜蜂螺原体的形态变化,发现螺原体纤毛状结构...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
秦浩然 和绍禹 吴杰 李继莲
【目的】明确东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)对密林熊蜂(Bombus patagiatus)的侵染性及致病机理。【方法】采用传统生物学和电镜超微结构观察的方法,结合qPCR定量分析对东方蜜蜂微孢子虫在密林熊蜂上的致病机理进行探讨。【结果】感染初期工蜂除取食减少和行动迟缓外无明显外观染病特征,感染后期工蜂萎靡、衰弱、飞翔无力。解剖后镜检发现中肠仅存少量孢子,但充满大量细菌;熊蜂肠道组织切片发现东方蜜蜂微孢子虫侵染中肠上皮细胞后导致核膨大并变形、线粒体体积变小甚至解体,内质网紊乱,但孢子只侵染寄主细胞质而不侵入细胞核,最终导致线粒体解体,细胞破裂;qPCR定量分析得出接种后3—4 ...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
危蓉萍 杨东航 卜莹莹 纪燕玲 于汉寿
［目的］通过表达载体ｐ ＥＴ－２８ａ（＋）在大肠杆菌中克隆表达蜜蜂螺原体ＳｐｉｒｏｐｌａＳｍａ ｍＥｌｌｉｆＥｒｕｍ ＣＨ－１中可能与致病相关的几丁质脱乙酰酶（ＣＨｉＴｉｎ ｄＥａＣＥＴｙｌａＳＥ，Ｃｄａ）基因ＣＨｉｄ，并测定其部分酶学性质，为进一步研究该基因在蜜蜂螺原体致病过程中的作用奠定基础。［方法］利用ｏｖＥｒｌａｐ ＥｘＴＥｎＳｉｏｎ ｐＣｒ（ｏＥ－ｐＣｒ）定点突变技术，在引物设计时插入目的突变，通过３次ｐＣｒ获得突变后的目的片段，测序验证后构建重组质粒ｐ ＥＴＣＨｉｄ，挑取ＢｌＣＨｉｄ表达菌株。ｉｐＴＧ诱导表达目的蛋白，ｎＴａ－ｎｉ２＋柱纯化，ＷＥＳＴＥｒｎ ＢｌｏＴＴｉｎＧ验证，紫．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
秦明 王红芳 刘振国 王颖 王帅 郗学鹏 刘春蕾 张卫星 胥保华
【目的】研究中华蜜蜂(Apis cerana cerana,简称中蜂)和意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica,简称意蜂)体内抗寒系统的组成,为探究中蜂和意蜂耐寒性能的差异提供理论依据。【方法】试验选取室外相同环境条件越冬的中蜂和意蜂各5群,于2015年12月20日每群随机选取蜜蜂立即测定两者的过冷却点、冰点,比较其耐寒性能差异。然后分别测定蜂体游离水、结合水、脂肪、糖原和蛋白质含量以及海藻糖酶的活性。利用高效液相色谱测定血淋巴中山梨醇、海藻糖、甘露醇的含量。在海藻糖的生物合成通路中
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
黄少康
蜜蜂对糖的消化和吸收是维持其血糖平衡的基础 .西方蜜蜂血糖主要有 3种 ,即海藻糖、葡萄糖、果糖 ,蛹可能还含有五碳糖 .多种因素影响其血糖平衡 ,内部因素主要包括亚种、发育阶段、级型、血淋巴中的酶、激素等 ;外部因素主要包括食物、饥饿、活动、农药、物理刺激等
关键词：
蜜蜂 血淋巴 血糖
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘志勇 王子龙 王欢 曾志将
【目的】分析不同地理群体中华蜜蜂(Apis cerana cerana)csd的多态性。【方法】以吉林长白山、海南海口、广西南宁、湖北神农架和江西靖安5个省市的中蜂工蜂为试验材料,提取每个工蜂样品的基因组DNA,对csd 3区进行PCR扩增、克隆和测序,分析csd的多态性。【结果】对中国5个省市的中蜂csd 3区基因组序列进行了克隆测序,获得32条csd基因单倍型,其中吉林长白山和江西靖安群体csd的多态性显著高于其它群体,而吉林长白山群体和江西靖安群体之间,广西南宁群体、海南海口群体和湖北神农架群体之间csd的多态性没有显著差异。利用csd进行群体分析表明江西靖安中蜂与吉林长白山中蜂的核苷酸...
关键词：
中华蜜蜂 csd 多态性 单倍型
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
蔚添添 和静芳 李志国 苏松坤
从多种应激因子角度综述遗传多样性与蜜蜂健康之间的关系.此外,总结了蜜蜂基因型、表型和应激因子三者之间的交互关系,表明了保护蜜蜂遗传多样性的重要性,同时为未来开展遗传多样性与蜜蜂健康关系研究提供可借鉴的理论基础.
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
周姝婧 徐新建 朱翔杰 高景林 周冰峰
采用线粒体DNA tRNAleu-COII片段的序列分析方法,对海南16个样点的715群中华蜜蜂(Apis cerana cerana)进行遗传多样性研究,明确了海南中华蜜蜂线粒体DNA tRNAleu-COII片段序列的遗传多样性及单倍型的分布特点.结果共发现48种单倍型,其中新发现43种单倍型.共检测到38个变异位点,包括12个单一多态位点、23个简约信息位点、1个插入位点和3个缺失位点.海南中华蜜蜂单倍型多样度为0.742±0.017,平均核苷酸差异数为1.248,核苷酸多样度为0.00354±0.00013,这表明海南中华蜜蜂线粒体DNA tRNAleu-COII片段具有丰富遗传多样性...
关键词：
海南 中华蜜蜂 线粒体DNA 遗传多样性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
曾爱平 游兰韶 周志成 刘新桃 陈绍鹄
斯氏蜜蜂茧蜂是寄生中蜂的寄生蜂.用中蜂为寄主,采用人工接蜂、定期解剖的方法,在室内进行了斯氏蜜蜂茧蜂的生物学特性观察.结果表明,斯氏蜜蜂茧蜂在贵州仁怀1年3代,以蛹茧越冬,第1代卵至老熟幼虫历期36～39 d,在人工接蜂条件下寄生率平均为23.33%,羽化率高达100%.
关键词：
斯氏蜜蜂茧蜂 中蜂 防治
[期刊] 中国农业科学
[作者]
房宇 李建科
【目的】比较王浆高产蜜蜂(Apis mellifera L.浆蜂)与原种意大利蜜蜂(Apis mellifera L.原意)雄蜂卵期3d发育阶段蛋白质组的特点。【方法】根据双向电泳所得表达谱,对两个蜂种雄蜂卵期发育的蛋白质的种类、等电点、分子量和表达量进行分析。【结果】浆蜂雄蜂卵期所表达的蛋白数(332、377和339)显著的高于相应日龄原意雄蜂卵期3个日龄所表达的蛋白数(283、305和293)(P<0.05),其中在两蜂种3个日龄共同表达的蛋白数为254个。通过雄蜂卵期3d发育过程蛋白质表达谱的比较,两个蜂种分别检测到274、298和285个共有蛋白。在这些共有蛋白中,浆蜂雄蜂分别有54、...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
夏晓翠 周冰峰 魏太云
应用Gateway重组技术构建CSBV非结构蛋白,RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RdRp)的原核表达载体,将重组表达载体转化大肠杆菌Rosetta,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(Isopropylβ-D-1-Thiogalactopyranoside,IPTG)诱导获得RdRp基因原核表达蛋白.以重组蛋白为抗原免疫新西兰兔制备相应的多克隆抗体,Western blot检测表明,该抗体能与RdRp重组蛋白和感病中华蜜蜂幼虫蛋白特异性结合,说明获得的抗体特异性高.利用制备的抗体进行免疫荧光标记,发现其能特异地定位在感病中华蜜蜂血淋巴细胞内.
[期刊] 西南农业学报
[作者]
梁盛凯 洪日新 周大维 陆启皇 孙甜 秦献泉 覃斯华 陆宇明
【目的】探索蜜蜂对荔枝访花行为及活动规律,研究蜜蜂授粉对促进荔枝坐果和果实品质的差异,为华南地区荔枝蜜蜂授粉关键技术集成提供理论支撑。【方法】设置网内强化蜜蜂授粉和蜜蜂自由授粉、网内隔离无蜂授粉3个处理,测定蜜蜂出巢时间、不同时段采粉蜂比例、坐果数、坐果率、落果率、产量和果实品质等指标。【结果】荔枝蜜蜂授粉平均单花访花时间为29. 3 s,69. 31%的蜜蜂单花访花时间为10～40 s,同时表现出"掠夺性"的采集行为,早上10:00-11:00为蜜蜂有效授粉高峰期;蜜蜂授粉可有效降低落果率,提高荔枝相对坐果率,网内强化蜜蜂授粉和蜜蜂自由授粉结果数分别比网内无蜂授粉处理提高70. 41%和230. 60%;网室强化蜜蜂授粉处理产量分别比蜜蜂自由授粉和网内无蜂授粉处理提高了22. 40%和169. 76%;蜜蜂授粉可提高荔枝果实糖酸含量比例和维生素C含量。【结论】荔枝蜜蜂授粉可提高坐果和产量,改善果实品质,是一项绿色简约化栽培配套技术。
关键词：
荔枝 蜜蜂授粉 访花特性 坐果 果实品质
[期刊] 中国农业科学
[作者]
冯毛 李建科
【目的】对王浆高产蜜蜂(浆蜂)(A.m.ligustica)和原种意大利蜜蜂(原意)(A.m.ligustica)1、3、6日龄工蜂咽下腺进行蛋白质组研究,揭示咽下腺在此阶段的发育特征。【方法】采用双向电泳方法对浆蜂和原意咽下腺进行蛋白质组研究,通过与已鉴定蛋白功能的咽下腺和蜂王浆蛋白质组图谱比较,推断部分蛋白的功能。【结果】浆蜂咽下腺在3个日龄表达的蛋白数(210、192、230)分别显著的高于原意(169、188、212),两蜂种均在6日龄表达蛋白最多(P<0.05)。浆蜂咽下腺3个日龄表达的共有蛋白数为119个,其中21个蛋白表达量随咽下腺的发育显著上调,14个蛋白显著下调;原意咽下腺3...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张凯遥 赵浩东 张艺琼 赵萧 高旭泽 邹培缘 张奎昊 陈大福 郭睿 牛庆生
[目的]对前期鉴定所获得的东方蜜蜂微孢子虫的nce-miR-11248进行表达和序列验证,预测、分析其靶基因,并检测nce-miR-11248及其靶基因在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂过程中的表达谱,为进一步开展nce-miR-11 248调控东方蜜蜂微孢子虫侵染的功能及作用机制研究提供参考。[方法]利用Stem-loop RT-PCR和Sanger测序验证nce-miR-11248的真实性;利用相关生物信息学软件预测nce-miR-1 1248的靶基因,并分析其编码蛋白的分子特性;使用MEME和TBtools软件预测SGT1蛋白的保守基序和结构域,通过Mega 11.0软件进行氨基酸序列多重比对,采用邻接法构建系统进化树。采集东方蜜蜂微孢子虫孢子侵染1,2,4,6和8 d的意蜂工蜂中肠组织,采用RT-qPCR检测nce-miR-11248及其靶基因SGT1的表达谱。[结果]nce-miR-11248在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在,其序列长度为25 bp。nce-miR-11248的靶基因为SGT1。SGT1蛋白分子式为C_(765) H_(1213)N_(195)O_(241)S_4,分子质量约为17.10 ku,脂溶系数为82.67,等电点为5.50,亲水系数为-0.709,不含典型的信号肽和跨膜结构域,可同时定位于细胞核、线粒体和过氧化物酶体。东方蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫、泛胞虫、肠脑炎微孢子虫和蚱蜢脑炎微孢子虫的SGT1中均含有4个保守基序(Motif 1、Motif 2、Motif 3和Motif 4)和1个结构域(SGT1超家族结构域)。东方蜜蜂微孢子虫、家蚕微孢子虫、肠脑炎微孢子虫和蚱蜢脑炎微孢子虫的SGT1聚为一支,且东方蜜蜂微孢子虫与家蚕微孢子虫的SGT1进化距离最近。相较于侵染东方蜜蜂微孢子虫后1 d,侵染后2,4,6和8 d nce-miR-11248的表达量均显著下调(P
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