- 年份
- 2024(637)
- 2023(931)
- 2022(902)
- 2021(815)
- 2020(789)
- 2019(1740)
- 2018(1746)
- 2017(2859)
- 2016(1940)
- 2015(2092)
- 2014(2117)
- 2013(2120)
- 2012(2044)
- 2011(1743)
- 2010(1812)
- 2009(1609)
- 2008(1880)
- 2007(1702)
- 2006(1371)
- 2005(1232)
- 学科
- 管理(7687)
- 业(7067)
- 企(6912)
- 企业(6912)
- 财(4861)
- 务(4449)
- 财务(4446)
- 财务管理(4438)
- 济(4361)
- 经济(4359)
- 企业财务(4243)
- 学(3001)
- 制(1935)
- 水产(1901)
- 方法(1832)
- 数学(1523)
- 数学方法(1483)
- 动物(1469)
- 银(1288)
- 银行(1257)
- 体(1239)
- 动物学(1205)
- 及其(1090)
- 划(1088)
- 行(1078)
- 体制(1050)
- 策(997)
- 业经(994)
- 家(941)
- 农(859)
- 机构
- 大学(26525)
- 学院(26250)
- 农(11299)
- 研究(10994)
- 科学(9648)
- 农业(9525)
- 中国(8798)
- 业大(7758)
- 所(7305)
- 管理(6946)
- 研究所(6784)
- 京(6358)
- 济(6232)
- 农业大学(6207)
- 经济(6001)
- 室(5927)
- 理学(5839)
- 理学院(5742)
- 实验(5645)
- 管理学(5536)
- 管理学院(5510)
- 实验室(5463)
- 业(5300)
- 省(5236)
- 重点(5162)
- 江(4969)
- 中心(4889)
- 财(4638)
- 技术(4634)
- 部(4267)
共检索到40722条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李东 汤贝贝 王颖洁 纪艳芹 王飞 路镇宇 王曼 张亚妮 李碧春
【目的】探究蛋白质代谢在鸡雄性生殖细胞分化过程中的作用机制，为完善鸡胚胎干细胞（ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ，ｅｓｃ）体外向雄性生殖细胞诱导分化体系研究提供依据。【方法】采用流式分选的方法获取高纯度的ｅｓｃ、原始生殖细胞（ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ ｇｅｒｍ ｃｅｌｌｓ，ｐｇｃｓ）和精原干细胞（ｓｐｅｒｍａｔｏｇｏｎｉａ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ，ｓｓｃｓ），分别提取细胞的总ｒｎａ，采用ｒｎａ－ｓｅｑ方法对３种细胞的转录本进行深度测序，然后进行Ｗｅｇｏ（Ｗｅｂ ｇｅｎｅ ｏｎｔｏｌｏｇｙ）和Ｋｅｇｇ（Ｋｙｏｔｏ ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ ｇｅｎｅｓ ａｎｄ ｇｅｎｏｍｅｓ）通路富集分析，筛．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
左其生 张蕾 连超 肖天荣 王颖洁 汤贝贝 王飞 纪艳芹 路镇宇 赵瑞峰 张文慧 张亚妮 李碧春
【目的】探索家鸡雄性生殖细胞分化过程中脂代谢相关基因以及信号通路的调控机制,以期为完善体外诱导体系提供依据。【方法】采用流式细胞分选法获得纯度较高的胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)、原始生殖细胞(primitive germ cells,PGC)和精原干细胞(spermatogonial stem cell,SSC),提取细胞总RNA。利用RNA-seq高通量分析方法对这三种细胞进行转录组水平测序,进行GO(Gene ontology)分析和KEGG通路富集,寻找脂代谢相关基因以及信号通路;并利用脂代谢--视黄醇代谢通路终产物视黄酸(retinoic acid,RA...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杜军慧 曹文广
诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)是借助基因导入技术将某些转录因子导入人或动物的体细胞,使体细胞重编程而得到的多能性细胞。iPS细胞来源丰富,研究表明利用不同的载体诱导系统或不同的转录因子组合,多种体细胞都可被重编程为iPS细胞,如成纤维细胞、肝细胞、角质细胞及脐带血细胞等。作为干细胞中新的一员,iPS细胞在克隆形态、基因表达模式、表面标志物、拟胚体形成、畸胎瘤及嵌合体形成(小鼠)、分化能力等方面与胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)非常相似。与胚胎干细胞一样,在特定的诱导条件下,iPS细胞在体外可被诱导分化为多种细胞...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
罗钧秋 陈代文 余冰 张峻豪 刘杰
［目的］研究支链氨基酸（ＢＣＡＡ）对大鼠骨骼肌细胞蛋白质代谢的影响，探讨氨基酸转运载体在ＢＣＡＡ调控细胞蛋白质代谢途径中的作用机制。［方法］用缺失支链氨基酸（Ｌｅｕ－，ＩＬｅ－，ＶＡＬ－）的无血清高糖型ＤＭｅＭ培养液培养Ｌ６肌管细胞，先后在培养基质中添加１００ ｎＭｏＬ·Ｌ－１雷帕霉素、支链氨基酸（Ｌｅｕ＋，ＩＬｅ＋，ＶＡＬ＋）和胎牛胰岛素，ＲＴ－ＰＣＲ法检测细胞表面氨基酸转运载体ＬＡＴ１、ＣＤ９８和ＳｎＡＴ２以及氨基酸调控因子ＧＣｎ２和ＡＴＦ４ ＭＲｎＡ表达，并结合ＷｅＳＴｅＲｎ－ＢＬｏＴ法考察蛋白合成关键因子磷酸化Ｓ６Ｋ１蛋白表达量及蛋白降解关键因子ＭｕＲＦ１和ＭＡＦＢｘ ＭＲｎＡ表达水平．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李莲军 韦精卫 黎宗强 卢盛晟 卢克焕
体外培养雄性新生仔猪生殖细胞,并检测其碱性磷酸酶活性及O ct-4蛋白,探讨用雄性新生仔猪生殖细胞建立干细胞系的可行性及检测方法。结果表明,雄性新生仔猪生殖细胞在BRL细胞饲养层上培养2 d,大部分生殖细胞呈碱性磷酸酶阳性(AP+),而全部呈O ct-4蛋白阴性(O ct-4-);培养1周后,生殖细胞及细胞克隆均为AP-和O ct-4-。雄性新生仔猪生殖细胞体外培养时出现2类细胞克隆,一类体积较小,数量众多,形成1周后又开始分化,仅能传至第2代;另一类细胞克隆的形态与猪原生殖细胞来源的胚胎生殖细胞(EGC)克隆相似,细胞克隆与周围细胞分界明显,而克隆中细胞相互间界限不清,这类细胞克隆易于分化,...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
芮荣 邱妍 胡元亮 范必勤
以质粒DNA为增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的载体 ,对处于快速增殖期的 8株猪胚胎生殖 (EG)细胞 (4～ 9代 )进行转基因试验。用 1μgDNA和 2 μLLipofecTamine 2 0 0 0转染EG细胞后 ,共获得 4株转染EGFP基因的EG细胞系 (EG EGFP) ,可发出强绿色荧光 ;EG EGFP细胞连续培养 2周以上可分化为多种细胞类型。显微注射EG EGFP细胞至卵裂期胚胎、桑椹胚卵周隙内或囊胚腔中 ,共注射 135枚胚胎 ,其中 112枚存活并发育至囊胚 (83 0 % ) ;86枚嵌合体胚培养后含有荧光细胞 ,其中 5 7枚囊胚在内细胞团 (ICM)上发现有E...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨鹏 韩锦峰 黄晋玲
【目的】对棉花晋A细胞质雄性不育系及其同核异质保持系MB177(JB)雄性败育关键时期的花药进行差异蛋白质组研究,为进一步揭示棉花细胞质雄性不育机理奠定基础。【方法】运用双向电泳技术对晋A细胞质雄性不育系及其保持系小孢子发育的造孢细胞时期和小孢子母细胞时期表达的蛋白质进行分离(考马斯亮蓝染色);采用PDQuest8.0.1软件进行斑点检测,并经统计学分析确定获得差异表达蛋白质;对这些差异蛋白质斑点进行LC-Chip-ESI-QTOF-MS质谱分析,用Mascot软件搜索NCBInr绿色植物,鉴定差异表达蛋白质;对差异表达蛋白质进行GO和KEGG功能分析。【结果】PDQuest8.0.1软件分析...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
丛义梅 马婧 孙瑞珍 王健宇 薛冰华 胡魁 尹智 刘忠华
【目的】探讨猪类胚胎生殖细胞向神经细胞分化的潜能。【方法】采用性腺-中肾区基质细胞与猪原始生殖细胞共培养的方法得到猪类胚胎生殖细胞,通过直接分化的方法进行神经细胞定向诱导。【结果】(1)与小鼠成纤维细胞作为饲养层相比,性腺-中肾区基质细胞作为饲养层同样能够支持猪类胚胎生殖细胞生长,二者对猪类胚胎生殖细胞的增殖能力不存在显著影响;(2)猪类胚胎生殖细胞有较强的碱性磷酸酶活性,Q-PCR结果显示多能性基因Oct4、Sox2及Nanog表达,增殖能力呈现"S"型,即生长的潜伏期、对数期及平台期,猪类胚胎生殖细胞经体外悬浮培养能够形成拟胚体;(3)经过诱导猪类胚胎生殖细胞能够分化形成表达神经干细胞、神...
关键词：
类胚胎生殖细胞 体外诱导 神经细胞 猪
[期刊] 中国农业科学
[作者]
朱翠 蒋宗勇 蒋守群 周桂莲 林映才 陈芳 郑春田 洪平
【目的】研究日粮中不同代谢能(ME)和蛋白质(CP)水平对产蛋高峰期(30—39周龄)岭南黄羽肉种鸡生长性能、产蛋性能和孵化性能的影响。【方法】采用3(ME:11.09、11.51和11.92 MJ.kg-1)×3(CP:15.5%、16.5%和17.5%)两因子试验设计,选取1 134只健康的30周龄快大型岭南黄羽父母代肉种鸡,随机分成9组,每组6个重复,每个重复21只。试验期10周。统计各个重复的体增重、料蛋比、产蛋率、日产蛋重、平均蛋重、种蛋破损率、不合格蛋比率、受精率、18日活胚率、孵化率和健雏率。【结果】(1)11.92 MJ.kg-1ME处理组试验鸡只的体增重显著高于11.51 M...
[期刊] 水产学报
[作者]
吴谋胜 彭宣宪
采用蛋白质组学的方法之一二维电泳技术 ,对嗜水气单胞菌生长周期中各不同阶段的蛋白质组成进行了分析。结果显示 ,在不同生长阶段 ,其蛋白质组成均发生明显变化。发现了与细菌生长代谢各阶段生理活动有关的差异蛋白质 ,有助于深入了解嗜水气单胞菌生长周期中不同阶段的基因组表达情况。同时 ,还对二维电泳和普通SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳进行比较。结果表明 ,二维电泳技术是研究蛋白质组学的有效工具
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王竹伟 陈继兰 胡娟 文杰 赵桂苹 郑麦青 刘冉冉 李新 刘国芳 赵丽红 郭艳丽 史兆国
为研究日粮能量、蛋白质水平对北京油鸡种公鸡后期繁殖性能的影响,将99只50周龄北京油鸡种公鸡随机分为9个处理,每个处理11只鸡,分别饲喂由能量(11.30、11.72和12.14 MJ/kg)和蛋白质(12%、14%和16%(质量分数))以3×3因子组合的9种日粮(设为处理1~9)。试验结果显示,蛋白质水平对种公鸡的生长性能和繁殖性能无显著影响(P>0.05),但精子活力随蛋白质水平的升高有降低的趋势;能量为12.14 MJ/kg时对采食量和精子活率有显著性影响(P<0.05);处理9的畸形率显著高于其他组(P<0.05)。孵化验证试验显示,处理8的受精率、孵化率和健雏率较佳。本试验结果建议北...
关键词：
种公鸡 代谢能 粗蛋白质 繁殖性能
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赖呈纯 赖钟雄 方智振 何园 姜顺日
【目的】通过龙眼(Dimocarpus longan Lour.)体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质组学研究,为植物胚胎发育相关蛋白基因分离和植物体细胞胚发生相关机制等的深入研究奠定基础。【方法】利用已建立的龙眼体细胞胚发生再生系统,经同步化培养获得龙眼体细胞胚发生早期5个阶段胚性培养物,并采用双向电泳和质谱技术对龙眼体细胞胚发生早期的蛋白质组变化进行分析。【结果】龙眼体细胞胚发生早期5个阶段的蛋白质2D表达谱可检测到1 203—1 798个蛋白点,其在龙眼体细胞胚发生早期各阶段大部分具有阶段差异表达特性,有小部分是阶段特异表达,根据其蛋白数目、表达丰度、分子量和等电点等变化,确定了龙眼体细胞胚...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
孟祥南 张迪 范海延 于洋 崔娜 宋铁峰
以黄瓜幼苗的叶片为材料,分别采用酚提取法、盐提法、尿素提取法和真空渗透提取法分离细胞壁蛋白,比较不同提取方法的提取效果,以期为黄瓜细胞壁蛋白质组学研究的开展奠定基础。结果表明:盐提法的蛋白产率最高,尿素提取法次之,真空渗透提取法和酚提取法的蛋白产率较低;采用六磷酸葡萄糖脱氢酶活性测定法检测细胞质蛋白的污染率,其中,真空渗透提取法获得的细胞壁蛋白污染率最低(1.07%),其次为盐提法(2.17%),而酚提法和尿素提取法的污染率分别高达25.90%和2.60%;SDSPAGE电泳分析表明盐提法的蛋白条带清晰,且细胞质中高丰度蛋白Rubisco的条带不明显。
[期刊] 华北农学报
[作者]
邢浩然 刘丽娟 刘国振
细胞是生命形式的基本组成单元,各种蛋白质按照其功能有序地分布在细胞的每个分区中。植物细胞的主要分区包括细胞膜和其他内膜系统、细胞核、细胞质以及位于其中的线粒体、叶绿体、高尔基体和内质网等各种细胞器。植物蛋白质的亚细胞定位是功能基因组学的重要内容。主要的植物蛋白质亚细胞定位技术包括:融合报告基因定位法、免疫组织化学定位法、蛋白质组学定位技术以及共分离标记酶辅助定位法,而生物信息学预测也成为亚细胞定位研究的一种重要手段。高通量蛋白质亚细胞定位技术的发展和应用,为构建定位数据库积累了数据。在模式植物拟南芥中,有亚细胞定位信息的蛋白质已经超过4 000个。
[期刊] 华北农学报
[作者]
边立娜 范宝莉 孙德岭 彭永康
为了探讨花椰菜细胞质雄性不育机理，利用比较蛋白质组学研究技术，对花椰菜细胞质雄性不育系（ＣＭＳ）、保持系花粉母细胞减数分裂期、双－三核期及花粉粒时期的蛋白质组差异作了比较，发现ＣＭＳ在花粉败育期（双－三核期）蛋白质组呈现明显变化，ＣＭＳ中有４个蛋白质斑点（斑点１，９，１９，２０）缺失，有７个蛋白质斑点（斑点４，６，７，８，１５，１７，１８）表达量明显减少，有１０个蛋白质斑点（斑点２，３，５，１０，１１，１２，１３，１４，１６，２１）表达量增加。差异蛋白斑点的质谱分析表明，ＣＭＳ中的差异蛋白其功能涉及信号转导、能量代谢、蛋白质合成、光合作用与植物的防御与抗性等。该研究结果对于花椰菜不育机理探讨及．．．
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
