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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
谭烽 兰文升 崔峰 乔传令 陈雯莉
利用Trizol法从尖音库蚊中提取总RNA,构建cDNA文库,并克隆出乙酰胆碱酯酶外显子序列;利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对蚊虫乙酰胆碱酯酶进行真核表达,并利用Ni-琼脂糖对酶进行纯化。采用SDS-PAGE对纯化产物进行检测,结果表明得到了纯度较高的乙酰胆碱酯酶。参照Ellman法对酶的活性进行测定,结果显示纯酶的活力为2.219×10-4 mol/(min.g)。
[期刊] 水产学报
[作者]
王学锋 陈海刚 蔡文贵 秦洁芳 贾晓平
为探讨鱼体抗氧化系统以及神经系统对水体中汞胁迫的响应机制,在实验条件下研究了汞离子对红鳍笛鲷幼鱼[体长为(4.95±0.79)cm,体重为(4.57±2.02)g]的急性毒性及对鱼体肝脏、鳃组织的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及脑组织乙酰胆碱酯酶(AChE)活力的影响。结果表明:半静水实验条件下,汞离子对红鳍笛鲷幼鱼的安全浓度为0.040mg/L。汞离子暴露6h时,各浓度组的肝脏SOD酶活均比对照组有显著升高(P<0.05)。随暴露时间的增加,低浓度组SOD的活性变化较小,而高浓度组鱼体肝脏SOD的活性出现被诱导或被抑制的现象,表明鱼体在高浓度汞胁迫下抗氧化系统出现一定程度的紊乱。...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
黄亮亮 吴志强 胡茂林
研究了乙酰甲胺磷对鲫24 h、48 h、72 h的半致死浓度(LC50)和不同乙酰甲胺磷浓度梯度下鲫脑乙酰胆碱酯酶(AChE)活力。结果:在18～21℃下,乙酰甲胺磷对鲫的24 h、48 h、72 h的半致死浓度(LC50)分别为59.3 mg/L、47.4 mg/L、40.3 mg/L。鲫在几组低浓度乙酰甲胺磷下暴露5 d,在同一检测时间内,脑AChE活力随浓度升高而下降;在同一浓度下检测,脑AChE活力随暴露时间的延长而升高。在乙酰甲胺磷暴露浓度为28.4 mg/L时,24 h取样检测,乙酰甲胺磷对鲫脑乙酰胆碱酯酶的抑制作用极显著(P≤0.01),72 h、120 h取样检测,抑制作用减弱...
[期刊] 华北农学报
[作者]
周琳
雷公藤生物碱是雷公藤Tripterygium wilfordii Hook中的主要杀虫活性物质。为进一步阐明雷公藤总生物碱的杀虫活性及杀虫作用机理提供线索和依据,研究采用载毒叶片法测定了雷公藤总生物碱对粘虫(Mythimna separata(Walker))三龄幼虫的胃毒毒力,观察了粘虫五龄幼虫的中毒症状,并测定了其对不同中毒阶段粘虫五龄幼虫头部乙酰胆碱酯酶(AChE)活性和乙酰胆碱(ACh)含量的影响。结果表明,雷公藤总生物碱对粘虫三龄幼虫48,72,96,120 h的胃毒LC50分别为306.39,216.12,157.18,129.92 mg/L;试虫中毒后行动迟缓,停止取食,继而软瘫...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
金剑雪 李凤良 程英
为明确羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶与七星瓢虫抗药性的关系,对用吡虫啉处理的七星瓢虫品系体内的羧酸酯酶、乙酰胆碱酯酶2种酶活性进行测定。结果表明:抗性品系体内的羧酸酯酶酶源蛋白含量稍高于敏感品系,比值为1.0858,二者间有显著差异。羧酸酯酶比活力的比值为1.0219,无显著差异;抗性七星瓢虫乙酰胆碱酯酶酶源蛋白含量与敏感品系的比值为1.2314,无显著差异,乙酰胆碱酯酶比活力的比值为0.7693,差异不显著。说明,七星瓢虫对吡虫啉产生抗性后,其羧酸酯酶的量有显著增加,羧酸酯酶可能参与七星瓢虫抗性的产生;而抗性七星瓢虫乙酰胆碱酯酶活力无明显的变化,酶源蛋白量的变化不显著,初步推断,这可能与七星瓢虫抗性...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
何永盛 陈舒迟 王弘 韩双艳 杨琼 刘细霞 董洁娴 杨武英 孙远明
【目的】构建表达家蚕乙酰胆碱酯酶(BmAChE)的毕赤酵母菌株,实现BmAChE在毕赤酵母中分泌表达并对其活性进行分析。【方法】从家蚕头部提取总RNA,经RT-PCR反转录成cDNA,通过PCR扩增出家蚕乙酰胆碱酯酶基因bmace并进行序列测定。采用PCR及重叠延伸PCR去除原bmace中的信号肽和疏水肽,并对序列中存在的2个A+T富含区进行同义密码子替换的改造。将改造后的bmace与表达载体pPIC9K连接,转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白,以Ellman法测定酶活力,毒扁豆碱和有机磷及氨基甲酸酯类农药抑制试验分析重组BmA...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
谭娟 尚蕾 肖雅元
用急性染毒法研究6种浓度(0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5μg/L)的甲氰菊酯对(34.89±9.99)g的尼罗罗非鱼(Tilapia nilotica)分别处理6、12、24、48、96 h后,其组织内乙酰胆碱酯酶(AChE)、谷丙转氨酶(GPT)和谷胱甘肽(GSH)的动态变化。结果显示:AChE活性在同一时间内不同浓度间差异不显著(P>0.05),而同一浓度不同时间点有极显著差异(P0.05),表明在低浓度范围内,甲氰菊酯对尼罗罗非鱼肝脏GPT活性影响很小。GSH活性在各浓度间和不同浸毒时间间均有显...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
王明学 周志刚 张财兵
本文研究了溴氰菊酯对草鱼种脑ＡＣｈＥ活性的抑制情况。试验表明，草鱼种脑的ＡＣｈＥ活性为２８２±０１６单位，在离体情况下溴氰菊酯对草鱼种脑的ＡＣｈＥ活性无明显影响。
关键词：
溴氰菊酯,乙酰胆碱酯酶,草鱼,鱼种
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
兰平 张蜀秋 娄成后
用生化分析结合细胞显微观察研究了黄化玉米幼苗节和节间细胞中乙酰胆碱酯酶 (acetylcholinesterase ,AChE)的活性和分布特征。结果表明乙酰胆碱酯酶的专一性抑制剂可以抑制该酶的活性。节细胞具有较高的、特异水解乙酰胆碱酯酶活性 ,是节间组织中该酶活性的近 2倍。组织化学定位结果显示 ,在节细胞中 ,乙酰胆碱酯酶的反应产物主要分布于细胞核中 ,而在节间组织中 ,酶反应产物多位于细胞间隙。这些结果提示AChE在玉米幼苗节和节间中可能具有不同的生理功能。
关键词：
玉米 乙酰胆碱 乙酰胆碱酯酶
[期刊] 淡水渔业
[作者]
朱新平 刘家照 夏仕玲 张跃 林礼堂
本文分析和比较了对照鲮鱼和在受精卵时期显微注射了鲤鱼总ＤＮＡ的鲮鱼以及鲤鱼在不同温度下的脑乙酰胆碱酯酶活力，发现实验鲮鱼的酶活力介于对照鲮鱼和鲤鱼之间，也即外源ＤＮＡ对鲮鱼的脑乙酰胆碱酯酶活力有一定的影响。对外源ＤＮＡ的作用本文作了进一步的讨论。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
熊玉芬 王暄 梁中伟 李红梅
利用RT-PCR和RACE技术克隆了一个松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)乙酰胆碱酯酶基因Bx-ace-2,该基因cDNA全长为2010bp,有1878bp的开放阅读框(ORF),推测其编码的蛋白有625个氨基酸;Bx-ace-2基因组克隆长为2192bp,含有7个内含子。氨基酸序列比对和同源性分析显示:松材线虫Bx-ace-2编码的乙酰胆碱酯酶与已报道的秀丽小杆线虫ACE-1、ACE-3和ACE-4型乙酰胆碱酯酶的相似性为28%～31%,而与秀丽小杆线虫ACE-2及甘薯茎线虫、南方根结线虫、大豆胞囊线虫、马铃薯白线虫和胎生网尾线虫的ACE-2型乙酰胆碱酯酶的氨基...
[期刊] 林业科学
[作者]
刘立宏 王峰 马玲 王步勇 陈俏丽 刘晓晗 董婉莹 薛羿
【目的】为提高苦参碱的杀虫效果,对松材线虫的药剂防治靶标乙酰胆碱酯酶1基因(Bx ACE1)进行研究。【方法】松材线虫采集自广东省内马尾松,贝曼漏斗法分离,灰葡萄孢菌苔上25℃避光培养扩繁线虫。克隆Bx ACE1基因全长并进行序列分析,通过基因沉默和蛋白抑制2种技术阻断该基因功能,研究苦参碱的杀虫效果,并应用Q-PCR技术鉴定RNAi效果。【结果】5'和3'序列拼接得到基因全长2 145 bp,命名为Bx ACE1。同源序列多序列比对表明线虫ACE的进化速度与线虫进化速度一致。蛋白质三维结构分析表明,Bx ACE1由14个α螺旋包围着13个β折叠,鉴于氢键数量越多结合越稳定,利用docking...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
任晓霞 韩召军 王荫长
用久效磷对采集于山东聊城抗性地区的棉铃虫Helicoverpaarmigera (H櫣ｂｎｅｒ)进行抗性品系选育。经过 10代的室内选育 ,抗性倍数达 2 11 88倍 ,为选育前的 6 6 7倍。同时发现筛选后对氰戊菊酯、氯氰菊酯和灭多威的抗性分别下降了8 13,7 44和 13 36倍 ,对甲基对硫磷和辛硫磷的抗性基本保持不变。这说明久效磷与其他 5种被试药剂之间没有明显的交互抗性。还对抗、感棉铃虫体内AChE进行了研究 ,对久效磷抑制粗酶液的实验表明 ,抗性品系棉铃虫体内AChE的I50 是敏感品系的 3 18倍。酶液纯化使抗、感品系AChE的I50 分别下降 6 6 9和 3 49...
关键词：
棉铃虫 久效磷 乙酰胆碱酯酶 抗药性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵盼 张学尧 刘晓健 赵小明 于荣荣 董玮 马恩波 张建珍 张敏
【目的】体外真核表达飞蝗(Locusta migratoria)几丁质脱乙酰基酶1和2(chitin deacetylase 1and 2,LmCDA1和LmCDA2)并测定其酶活性,为进一步明确飞蝗LmCDA1和LmCDA2在几丁质降解途径中的生理功能及研发新型绿色环保杀虫剂提供依据。【方法】使用BLASTP和SMART软件在线预测LmCDA1、LmCDA2a和LmCDA2b的结构域;PCR克隆获得目的基因LmCDA1、LmCDA2a和LmCDA2b的全长序列,并分别构建p Fast Bac-LmCDA
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李飞 韩召军 吴智锋
以棉花、木槿和南瓜 3种寄主作物隔离饲养不同抗性程度的棉蚜 (171B、RR1和RR2 ) ,取食不同寄主后棉蚜羧酸酯酶的米氏常数 (Km)值无显著差异 ,而各品系之间酶的最大反应速度 (Vmax)差异显著。与取食棉花的棉蚜各品系相比 ,取食木槿的各品系乙酰胆碱酯酶对甲胺磷的敏感性均有所下降 ;取食南瓜的各品系以其抗性不同有所差异 ,抗性最高的RR2 品系的敏感性上升 ,而RR1品系的敏感性有所下降 ,171B品系的敏感性无显著性变化。在不同处理之间 ,棉蚜AChE的酶学特性 (Km 值和Vmax)也发生了不同程度的改变 ,文中对可能导致这种变化的原因进行了讨论分析。
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