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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
于雷 饶开晴 董传豪 妥丽荣 徐亚欧 冯卫东 蒋忠荣 李平
[目的]糖皮质激素(GC)对禽类的胚胎发育至关重要,其生物活性主要受细胞内的糖皮质激素代谢酶的调节。本研究比较了藏鸡和肉鸡种蛋内的皮质酮沉积水平以及胚胎卵黄膜、尿囊膜的皮质酮代谢酶11β-羟基类固醇脱氢酶1(11β-HSD1)、11β-羟基类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)和20-羟基类固醇脱氢酶(20-HSD)的表达水平差异。[方法]采用酶联免疫方法检测藏鸡和肉鸡种蛋蛋黄、蛋清内的皮质酮含量,用荧光定量PCR检测14胚龄藏鸡和肉鸡鸡胚卵黄膜、尿囊膜11β-HSD1、11β-HSD2、20-HSD基因的表达情况。[结果]藏鸡蛋蛋黄内皮质酮含量极显著低于肉鸡蛋黄内含量(P<0.01),而两者间蛋...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘明妮 胡云 方茜 马文强 赵茹茜
[目的]研究慢性皮质酮处理后肉鸡生长性能及肝脏铁稳态的变化。[方法]选取30只49日龄如皋黄羽雄性肉鸡，随机分为对照组和皮质酮组。肉鸡饲喂玉米豆粕型日粮，对照组肉鸡注射15%（体积分数）乙醇0.4 mL·kg~(-1)，皮质酮组肉鸡注射4.0 mL·kg~(-1)皮质酮，连续注射7 d。记录试验起始及结束时肉鸡体质量，检测肉鸡血清及组织铁代谢指标、十二指肠和肝脏铁代谢相关基因及蛋白的表达。[结果]与对照组相比，皮质酮暴露极显著抑制肉鸡生长（P<0.01），且极显著增加肉鸡血清铁含量，提高了总铁结合力、不饱和铁结合力和转铁蛋白饱和度（P<0.01）及上调了肝脏转铁蛋白（TF）表达（P<0.01），但降低了肝脏铁含量（P
关键词：
皮质酮 肉鸡 肝脏 铁代谢
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
胡丹 郝燕青 陈渠 邬晓婷 倪迎冬
[目的] 本试验旨在探究饲料中添加胆汁酸（Bile acids， BAs）对皮质酮（Corticosterone， CORT）诱导的肉鸡脂肪肝综合征的缓解作用。[方法] 试验选取了120只 1日龄雄性AA肉鸡，随机分为两组，分别饲喂基础日粮和含BAs日粮。BAs添加分为前期，中期，后期三个阶段，剂量依次递增。28日龄时，从基础日粮组中选取肉鸡20只，随机分为对照组（Control， CON），皮质酮处理组(Corticosterone， CORT)；从胆汁添加组中随机选取10只设为皮质酮加胆汁酸组（CORT+BAs)。CON组颈部皮下注射酒精PBS溶液（15%酒精），CORT和CORT+BAs组注射4 mg/kg皮质酮，连续注射7天。于第40日龄屠宰采样，记录器官与组织重量，采集血清和肝脏组织以测定生化指标、脂代谢相关基因和蛋白表达水平。[结果] 饲料中添加BAs可显著缓解由CORT处理引起的腹脂率的升高及腿肌重的降低 (P < 0.05)。生化分析结果表明，CORT处理显著降低了40日龄肉鸡血清中高密度脂蛋白（HDLC）水平、增加血液游离脂肪酸（NEFA）水平，而BAs处理显著升高血清HDLC水平（P < 0.05）。与对照组相比，CORT处理组肉鸡肝脏内甘油三酯（TG）水平显著升高 （P < 0.01），肝细胞内脂滴显著富集且出现空泡化现象，而BAs处理可显著缓解肝脏内的TG沉积（P < 0.01）。CORT处理显著上调肝脏脂中硬脂酰辅酶A去饱和酶（Scd1）和乙酰辅酶A羧化酶（Acc）的表达水平（P < 0.05），并显著上调ACC和脂肪酸合成酶（FASN）的蛋白表达水平（P < 0.05），但下调过氧化物增殖激活受体（PPARα）的蛋白表达水平（P < 0.05）；BAs处理可显著逆转皮质酮引起的以上基因和蛋白表达变化，并显著增加肉毒碱棕榈酰基转移酶1A（Cpt1a）的基因表达水平并显著降低脂肪酸转位酶（CD36）的蛋白表达水平（P < 0.05）。[结论] 日粮中添加胆汁酸可通过减少肝脏内TG合成、促进其分解、抑制肝细胞对脂肪酸的摄取，从而缓解注射皮质酮诱导的肉鸡脂肪肝综合征。
关键词：
胆汁酸 皮质酮 脂肪肝综合征 肉鸡
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
俞明远 王利利 马彤辉 张文君 王齐桓 秦力猛 滕可导 马云飞
为研究运输应激对动物行为、内分泌以及脑内神经型一氧化氮合酶（ＮｅｕｒｏＮａｌ Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｓｙＮｔｈａｓｅ，ＮＮｏｓ）表达的影响，采用摇床加制动束缚模拟公路运输途中的摇晃、拥挤和限制活动等因素，建立大鼠运输应激模型（３５℃，１２０ｒ／ｍｉＮ，应激２ｈ）。将１８只大鼠随机分为对照组、应激组和应激恢复组，采用旷场试验评定大鼠行为反应，放免法测定大鼠血清皮质酮含量，免疫组化法检测大鼠下丘脑视上核（ｓｕｐｒａｏｐｔｉｃ Ｎｕｃｌｅｕｓ，ｓｏＮ）中ＮＮｏｓ的表达。结果显示，与对照组相比，应激组大鼠的自主活动明显减少（ｐ＜０．０１），血清皮质酮（ｃｏｒｔｉｃｏｓｔｅｒｏＮｅ，ｃｏｒｔ）含量显．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
迟良 李兰 潘庆杰 刘焕奇
【目的】克隆乌骨鸡黑色素皮质激素受体-1(melanocortin 1-receptor,MC1R)基因,并对其进行生物学分析和原核表达。【方法】采集乌骨鸡的肌肉组织,提取其总RNA,根据GenBank上公布的原鸡(Gallus gullus)MC1R基因序列设计引物,利用反转录RT-PCR克隆乌骨鸡MC1R基因,对其进行生物学分析,并构建原核表达载体pET32a-MC1R,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。【结果】乌骨鸡MC1R序列由945个碱基组成,编码314个氨基酸。成功构建了重组质粒pET32a-MC1R的原核表达系统,并且体外诱导获得了MC1R蛋白。【结论】成功克隆了乌骨鸡MC...
关键词：
乌骨鸡 黑色素 MC1R 原核表达
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
徐永平 张涌 郑月茂 卿素珠 赵慧英 蒲鹏
对山羊胚胎小脑皮质形成及其神经元发育的形态学变化进行了研究。结果表明:(1)山羊胚胎小脑形成于第6周末,小脑皮质的外颗粒层、分子层首先形成。(2)发育过程中,山羊胚胎小脑的外颗粒层呈现出非常复杂的变化趋势:第7～10周外颗粒层达到一定厚度,第11～12周开始变薄,此后外颗粒层又开始变厚,直到第15～16周又变薄,17～18周再次增厚,此后再次变薄,直到出生前1周外颗粒层已经较薄,仅有4～5层细胞。(3)山羊胚胎的蒲肯野氏细胞可能在第8周以前就已聚集定位,第14周以后,蒲肯野氏细胞内部结构逐渐发育成熟,这说明蒲肯野氏细胞虽然发生较早,但其开始发育的时间较晚。
关键词：
小脑皮质 山羊胚胎 中枢神经 形态学
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
高玉鹏 郭久荣 刘斌峰 杨景昆
选经常规免疫 ND、IBD的 30周龄健康罗曼蛋鸡 96只 ,按随机法等分为两组 ,分别置于 2个人工气候室内 ,对照组环境温度保持 2 2℃不变 ,试验组环境温度为 2 2℃ 7d,30℃ 7d,35℃ 7d,40℃ 4h(部分 1～ 43h) ,2 1.3℃ 2 2 h。在不同温度段定期采血并作 40℃ 15只鸡致死时间 (heatstress survival time,HSST)测定。结果表明 ,135℃ 16 6 h,40℃ 4h能显著降低蛋鸡血液 T淋巴细胞百分率 ,T、B细胞转化率和 ND、IBD抗体水平。解除热应激 2 1.3℃ 2 2 h免疫指标均未恢复正常 ,ND、IBD抗...
关键词：
热应激 蛋鸡 免疫力 血浆皮质酮 耐热力
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孔雪 宋志刚 焦洪超 林海
【目的】利用皮下注射人工合成糖皮质激素的方式模拟应激,通过核磁共振(NMR)技术研究应激及色氨酸对肉仔鸡下丘脑代谢状况的影响,为探明下丘脑食欲调控机制提供依据。【方法】10日龄AA肉仔鸡32只随机分为4组,早6:00禁食3h后,以2.0mg·kg-1BW剂量皮下注射地塞米松,同时灌注色氨酸(生理盐水溶解,500mg·kg-1BW),对照组分别皮下注射、灌服生理盐水,3h后取血浆及下丘脑。下丘脑用高氯酸萃取后进行核磁共振研究。【结果】通过1HNMR谱,发现应激改变了肉鸡下丘脑乳酸,葡萄糖,ATP,肌醇,3-羟基丁酸的相对含量;未检测到色氨酸信号的改变。【结论】NMR技术能够检测到应激状态下下丘脑...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李青芝 陈叶雨 吴晓雲 刘亚 赖见生 李华 杨焕超 宋明江 龚全 林珏
【目的】糖皮质激素受体(GR)参与了机体渗透调节、应激和免疫调节等多种生物学过程。因此，对GR表达特征的分析有利于揭示其在鱼类抗应激反应过程中的功能。【方法】以长江鲟转录组测序得到的Unigene序列作为基础，获得了GR的cDNA序列，同时研究了GR基因在各个组织及饥饿胁迫下的表达情况。【结果】GR基因开放阅读框为2316 bp，编码771个氨基酸，包含保守的锌指结构域和激素受体配体结合域，及鱼类特有的9-aa插入序列WRARQNMDG。GR在长江鲟各组织中广泛分布，其中，免疫器官脾脏、肝脏和鳃组织中表达量较高，在心脏和大脑组织中也有较高的表达水平。饥饿条件下，肝脏中GR相对表达量随饥饿时间的增加而逐渐上升，在饥饿7和14 d后，其表达量均显著高于对照组；肠道中GR在饥饿第7天表达量出现峰值，显著高于第0天(P<0.05)。复投喂后，肠道和肝脏中GR表达量恢复到了对照组水平。【结论】本研究表明GR参与了长江鲟对抗饥饿胁迫的应激反应过程。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨延平 孟辉 刘建新
【目的】探讨具有癫痫基础病变小鼠在遭受颅脑损伤时,海马和顶叶皮质中C-FOS表达与损伤的相关性及其在损伤中的意义,为癫痫后颅脑损伤复合病变研究提供理论依据。【方法】用腹腔注射匹罗卡品法构建小鼠(2周龄)癫痫模型,饲养4周后(6周龄)采用自由落体法构建闭合性颅脑损伤小鼠模型和癫痫+闭合性颅脑损伤小鼠模型,同时以正常小鼠为对照,于造模后0.5,3h及1,3,7d取小鼠大脑,制备切片,采用尼氏染色、免疫组织化学染色方法,从形态学以及蛋白质水平上研究各组小鼠大脑海马和顶叶皮质中C-FOS的表达情况。【结果】癫痫模型、闭合性颅脑损伤模型及癫痫+闭合性颅脑损伤小鼠模型均构建成功。免疫组织化学染色结果显示,...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
赵景鹏 姜克杰 董辉
利用同位素双标法,测定在NO供体硝普钠(SNP)、NO合酶(NOS)抑制剂NG-硝基、L-精氨酸甲酯(L-NAME)和糖皮质激素皮质酮(corticosterone)存在条件下,基础状态或胰岛素诱导的肉鸡离体腓骨长肌的2-脱氧葡萄糖(2-DG)转运速率。结果表明:①SNP引起肌肉基础状态和胰岛素诱导的2-DG转运速率增加,表明NO是调节骨骼肌糖代谢的一个重要细胞因子。②皮质酮引起静态肌肉2-DG转运速率增加,可能与其破坏肌纤维膜的完整性有关。③皮质酮引起肌肉胰岛素诱导的2-DG转运速率下降,加入SNP后,胰岛素机能明显改善,表明应激早期,机体NO浓度的下降,可能与糖皮质激素诱发的胰岛素抵抗有一...
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
曲宪成 杨艳红 刘颖 周正峰 崔严慧
运用Sybr Green I荧光定量RT-PCR方法和放射免疫方法(RIA)分析了外源性皮质醇(cortisol)对异育银鲫促甲状腺激素β亚基(TSH-β)mRNA表达和血清甲状腺激素水平的影响。实验设计为10周,实验组每两周注射一次0.2 mg/kg体重的cortisol(用57%酒精溶解),对照组注射同剂量的57%酒精。实验期间没有投喂饲料。在本实验条件下,研究结果显示:注射3次外源性cortisol后,异育银鲫TSH-βmRNA表达量与对照组相比略有下降;注射5次后,与对照组相比显著降低(P<0.05)。另一方面,RIA结果显示:注射3次外源性cortisol后,实验组与对照组相比,血清...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王曼 陈娟 孔一力 马海田 邹思湘
300羽1日龄雄性AA肉鸡随机分为4组,每组3个重复,每个重复25羽。分别于基础日粮中添加质量分数为1%、5%和10%丙酮酸肌酸(CrPyr),以不添加CrPyr为对照,饲喂至42日龄时各组每个重复分别随机宰杀4只,采集血样、肝脏、腹脂、左侧胸肌和腿肌,测定血清葡萄糖(BG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酸激酶(CK)、尿酸(UA)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、胰高血糖素、胰岛素和瘦素含量,以及肌肉核酸和蛋白质含量。结果表明:与对照组相比,CrPyr...
关键词：
丙酮酸肌酸 肉鸡 脂肪代谢 蛋白质代谢
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵敏蝶 刘杰 赵茹茜
[目的]本文旨在预测和筛选靶向调控鸡糖皮质激素受体（Glucocorticoid Receptor， GR）表达的microRNAs。[方法]用TargetScan、PicTar和miRDB三种软件分别预测靶向鸡GR 3'UTR microRNAs并取交集；构建包含鸡GR 3'UTR的重组质粒及突变质粒，通过双荧光素酶实验鉴定microRNA和鸡GR 3'UTR的靶向性；用TargetScan和miRDB两种软件分别预测候选microRNAs的靶基因，用DAVID软件对预测出的共同靶基因进行GO功能分析；Western blot检测分别过表达候选microRNAs对鸡DF1细胞 GR蛋白表达的影响。[结果]miR124-3p、miR142-3p、miR204/211、miR183、miR18-5p和miR181a/181b是三种软件预测靶向GR 3'UTR的交集microRNA；双荧光素酶实验的结果表明miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合GR 3'UTR；两种软件预测三个候选microRNA的靶基因中都有GR且富集分子功能不同；在DF1细胞中过表达三个候选microRNA后，miR142-3p和miR204/211显著降低GR蛋白水平的表达（P < 0.05）。[结论] miR142-3p、miR204/211和miR18-5p靶向结合鸡GR 3'UTR且miR142-3p和miR204/21可以降低鸡DF1细胞中GR蛋白的表达水平。
关键词：
鸡 糖皮质激素受体 microRNA
[期刊] 中国水产科学
[作者]
陈凯 习丙文 滕涛 王亚冰 高金伟 梁利国 谢骏
促肾上腺皮质激素释放激素受体（ｃｏｒｔｉｃｏｔｒｏｐｉｎ－ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｃｒｈｒ）是鱼类下丘脑–垂体–头肾调控轴上的重要应激调节因子。本研究通过ｃ Ｄｎａ末端快速扩增（ｒａｃｅ）技术成功克隆出团头鲂（ｍｅｇａｌｏｂｒａｍａ ａｍｂｌｙｃｅｐｈａｌａ）ｃｒｈｒ１ ｍ ｒｎａ全长序列，应用生物信息学方法对其序列特征进行解析；同时采用荧光定量ｐｃｒ技术分析了团头鲂ｃｒｈｒ１的组织分布图谱及外源性皮质醇注射模拟应激处理下团头鲂ｃｒｈｒ１ ｍ ｒｎａ的表达变化。研究结果表明，ｃｒｈｒ１ ｍ ｒｎａ序列开放阅读框（ｏｐｅｎ ｒｅａＤｉｎｇ ｆｒａｍｅ，ｏｒｆ）为１２．．．
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