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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
邢超 金璐 刘鹏 阮颖 刘春林
以蓖麻品种淄5号和秀蓖2号的成熟种子胚轴为外植体,在含0.25 mg/L苯基噻二唑基脲(TDZ)的改良MS(蔗糖20 g/L、琼脂9 g/L)固体培养基上诱导生芽。结果显示:淄5号和秀蓖2号平均每个外植体可产生4个不定芽,2品种间产生不定芽的数量没有明显差异;不定芽经伸长、诱导生根能发育成完整的植株,2品种在根分化能力上没有明显差异。综合分析,这2个蓖麻品种基因型对体外再生体系的建立没有明显影响。
关键词：
蓖麻 胚轴 再生体系 外植体
[期刊] 华北农学报
[作者]
王文跃 李国瑞 黄凤兰 尚雨丝 王超 罗蕊 邱靖 王丹 张智勇 陈永胜
以蓖麻茎秆为试材,研究了影响cDNA-AFLP标记蓖麻差异基因反应体系的几个关键因素,建立了适宜蓖麻的cDNA-AFLP分析体系。结果表明:当裂解液为1.4 mL时提取的RNA浓度最高,EcoRⅠ和MseⅠ的组合6 h可将ds-cDNA酶切完全,与相应接头连接过夜后产物用于预扩增,预扩增产物稀释15倍时作为选择性扩增模板可以获得条带丰富且重复性好的结果。蓖麻cDNA-AFLP反应体系的建立为进一步研究蓖麻株高、叶型等相关基因奠定了基础。
关键词：
cDNA-AFLP 蓖麻 体系建立
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
刘生财 杨文文 赖钟雄
以苋菜种子为材料,进行苋菜离体繁殖研究.结果表明:苋菜种子经过75%酒精消毒1 min,再用升汞消毒8 min,在MS培养基上的萌发率可达87%以上;从无菌苗切取带2片子叶的下胚轴,在MS+3.0 mg.L-1 6-BA+0.2 mg.L-1 NAA培养基上诱导不定芽的效果最好;不定芽在MS+3.0 mg.L-1 6-BA+1.0 mg.L-1 IAA培养基上的增殖效果最好,增殖系数可达13.02;试管苗在1/2MS+0.2 mg.L-1 IBA培养基上的生根效果较好,生根率可达90.35%;在适宜的温度下,试管苗移栽到菜园土上的成活率可达92.5%以上.
关键词：
苋菜 不定芽 增殖 生根
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵永 朱国立 何智彪 包春光 陈晓凤 姜桐桐 李佳会 黄凤兰 周婷婷 常旭丰 刘佳琪
为了建立Ｌｍ型雌性系蓖麻不同发育时期的标雌／单雌／两性系花序ｍＳＡＰ反应体系，提取不同类型不同发育时期的花序基因组ＤＮＡ，混合成基因池；用ＥｃｏＲⅠ和ＨＰＡⅡ／ｍＳＰⅠ的组合，１２ Ｈ可将ＤＮＡ酶切完全；１６℃条件下，将酶切产物与ＥｃｏＲⅠ、ＨＰＡⅡ／ｍＳＰⅠ接头过夜连接；连接产物用于预扩增。优化后的预扩增反应体系为１０×ＰｃＲ ＢｕｆｆＥＲ ２．５μＬ、Ｄ ＮＴＰＳ（１０ ｍｍｏＬ／Ｌ）２．５μＬ、ｍｇ２＋（２５ ｍｍｏＬ／Ｌ）２．０μＬ、模板２．０μＬ、Ｅ０扩增引物（１０ＰｍｏＬ／μＬ）１．５μＬ、Ｈ０扩增引物（１０ ＰｍｏＬ／μＬ）１．５μＬ、ＬＡ ＴＡｑ（５ ｕ／μＬ）０．２５μＬ、Ｄ．．．
关键词：
蓖麻 花序 MSAP
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
曹雅琴 刘峰 陈建荣 郭清泉
以湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川洪县园麻的叶片为材料,构建4个品种高效、稳定的不定芽再生体系.湘苎2号、湘苎3号、新宁青麻、四川洪县园麻最适诱导愈伤组织及分化不定芽的培养基分别为MS+0.7 mg/L TDZ+0.02 mg/L 2,4-D,MS+0.3 mg/L TDZ+0.01 mg/L 2,4-D,MS+0.3 mg/L TDZ+0.05 mg/L 2,4-D,MS+0.9 mg/L TDZ+0.05 mg/L 2,4-D;不定芽分化率分别为83.3%,81.7%,90.0%,86.7%;4个品种再分化时出现丛生芽,新宁青麻愈伤组织的平均再生不定芽数达2.62个,其他3个品种也都有数...
关键词：
苎麻 愈伤组织 不定芽 再生体系
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
唐君 张蜀宁 侯喜林 王淑敏 孙成振
以‘尖叶芥蓝’、‘中花粗心芥蓝’和‘迟花芥蓝’3个品种为材料,研究苯基噻二唑脲(TDZ)预处理、不同激素配比、基因型和外植体类型对不定芽再生的影响,建立芥蓝离体高频再生体系。结果表明:3个品种中,‘中花粗心芥蓝’再生能力最强;不同外植体类型中再生率由大到小依次为:下胚轴、带柄子叶、子叶块;不定芽再生的最佳激素组合为0.2 mg.L-1NAA+6 mg.L-1 6-BA;以此激素组合为基础,下胚轴经0.5 mg.L-1 TDZ浸泡30 min预处理接种在分化培养基(MS+0.2mg.L-1 NAA+6 mg.L-1 6-BA+8 g.L-1琼脂+30 g.L-1蔗糖)上不定芽再生率最高,达98....
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
付春华 雷呈 邓慧 杨英 刘顺 余龙江
以甘草下胚轴为外植体,对影响下胚轴离体再生不定芽的因素进行研究。结果表明:KT具有显著作用,与6-BAI、BA结合,可高效诱导下胚轴直接产生不定芽,优化的分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L,芽苗分化率平均为41.5%。同时,进一步研究了不同基因型、预培养处理对甘草下胚轴再生的影响,结果发现:胀果甘草下胚轴离体再生频率最高,达44.7%;预培养4 d对甘草下胚轴再生不定芽具有促进作用。建立甘草下胚轴离体再生不定芽体系,为甘草基因工程品种改良及优良品种快速繁殖打下基础。
关键词：
甘草 下胚轴 正交设计 预培养
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
付建新 张超 王翊 戴思兰
以甘菊下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导不定芽分化,建立了甘菊下胚轴高效再生体系,为甘菊遗传转化体系的建立奠定了基础。结果表明:将甘菊种子播种于MS培养基上,置于黑暗条件下培养7d可以迅速获得大量下胚轴;下胚轴在MS+1.0mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA的培养基上培养15d后,愈伤组织形成率最高为86.66%,愈伤组织呈淡黄色,大小一致;将愈伤组织转接到MS培养基中培养30d左右即可分化不定芽,不定芽分化率达25.50%,平均每个外植体产生不定芽数目为4.25个;不定芽在添加0.1mg/LNAA的1/2MS培养基中培养15d后,生根率达到100%。生根试管苗出瓶后,经过适宜培养,...
关键词：
甘菊 下胚轴 再生体系
[期刊] 林业科学研究
[作者]
顾地周 高捍东 顾美影 朱俊义 姜云天
以笃斯越桔新生嫩芽为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的基部直接再生芽苗和生根的培养基,结果表明,最适合的基部直接再生芽苗诱导培养基为:DR+2-ip 2.75 mg.L-1+IAA0.10 mg.L-1,诱导率为99%;生根培养基:MS(改良)+IAA1.00 mg.L-1+Kt0.30 mg.L-1,生根率达98%;以再生植株的茎节为材料进行快繁的结果表明,在25 d的一个培养周期内增殖倍数平均达40以上,快繁培养基:MS(改良)+IAA 0.50~1.00 mg.L-1+Kt0.30 mg.L-1+GA30.20 mg.L-1。建立了笃斯越桔的植株再生和快繁体系。
关键词：
笃斯越桔 离体培养 植株再生 均匀设计
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘独臣 房超 刘小俊 梁根云 李跃建
以茎尖为外植体,进行小西瓜离体快繁研究,建立了小西瓜茎尖再生体系。结果表明:小西瓜种子发芽的最适培养基为2FeMS;最适茎尖丛芽诱导培养基为MS1+BA 1~2 mg/L+IAA 0.01 mg/L,增殖系数高;最适继代培养基为MS4+BA 0.2 mg/L+NAA 0.05 mg/L;不定芽在培养基1/2MS+0.05 mg/L IAA上生根良好。
关键词：
小西瓜 组织培养 快繁
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
孙红英 辛全伟 马志慧 兰思仁
以中红杨组培苗的叶片为试验材料,研究了基本培养基、植物生长调节物质浓度、外源添加物和光照条件对离体叶片不定芽再生的影响,并获得了完整的再生植株。结果表明:1)最适基本培养基为MS,最佳植物生长调节剂和外源添加物的组合为0.5 mg·L~(-1) 6-BA+0.2 mg·L~(-1) NAA+30 g·L~(-1)蔗糖;2)暗培养有利于愈伤组织诱导,光照16 h·d~(-1)有利于不定芽的诱导,不定芽形成率可达83.3%;3)将叶片再生植株转接到MS+0.2 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA培养基中壮苗培养,在1/2 MS+0.2 mg·L~(-1) IBA+20 g·L~(-1)蔗糖+6.5 g·L~(-1)琼脂培养基诱导生根,生根率96.4%,生根苗大田移栽成活率86.8%。
关键词：
中红杨 离体叶片培养 植株再生 生根成活
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
高艺 薄文浩 李颖岳 曹明 庞晓明
【目的】‘京枣39’是一种优质的枣鲜食新品种，目前尚无有效的离体再生体系，影响了自根苗的培育和苗木纯度。为了解决枣遗传转化效率低等问题，本研究探究了枣叶片再生的不同影响因素，以期建立高效的叶片再生体系。【方法】以‘京枣39’组培苗叶片为试材，研究了不同接种方式、基本培养基种类、植物生长调节剂种类和浓度配比对离体叶片直接诱导不定芽再生的影响。【结果】正交试验结果表明：叶片正放的接种方式再生率远高于叶片反放，是‘京枣39’叶片再生不定芽的最佳放置方式；基本培养基对‘京枣39’叶片再生的影响要大于植物生长调节剂，且最优培养基为1/2 MS，最佳植物生长调节剂为细胞分裂素6-BA，本研究确立的‘京枣39’组培苗叶片再生的最优体系为1/2 MS+1 mg/L噻苯隆+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+30 g/L麦芽糖+6 g/L琼脂，再生率可达79.17%，平均每叶片再生不定芽能达到4.67个。进而初探并建立了‘京枣39’组培苗的最佳扩繁体系为：MS+20 g/L麦芽糖+6 g/L琼脂+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA，分枝率高达88%，平均分枝数达2.76枝；以及最适生根体系为：1/2MS+20 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+1.5 mg/L IBA+0.3 mg/L NAA，生根率达90.91%，平均根长达4.08 cm。【结论】‘京枣39’叶片再生效率受外界影响因素很大，尤其是基本培养基种类和接种方式，且每个因素都不是独立起作用的。本研究为之后以‘京枣39’叶片为转基因材料进行枣相关基因功能验证建立了完整的培育体系，同时为加快枣的相关研究进程奠定基础。
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈晓凤 黄凤兰 李国瑞 王文跃 张智勇 包春光 吴春桃 张现世
以蓖麻种子为研究对象,优化其cDNA-AFLP反应体系,为研究不同蓖麻材料或不同发育阶段的蓖麻种子内脂肪酸基因表达差异奠定理论基础。试验结果表明:提取蓖麻种子总RNA;将RNA逆转录为cDNA,用高频限制性内切酶EcoRⅠ和MseⅠ进行酶切,并与EcoRⅠ、MseⅠ接头连接,得到连接产物;连接产物稀释40倍作为预扩增模板,进行预扩增;优化选择性扩增反应体系,得到最佳反应体系为:10×PCR Buffer 2.0μL、dNTPs(10 mmol/L)1.4μL、Mg2+(25 mmol/L)1.4μL、模板稀释80倍1.0μL、Ex扩增引物(50 pmol/μL)1.2μL、My扩增引物(50 ...
关键词：
蓖麻 脂肪酸 cDNA-AFLP
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
张莹 王雁 李振坚
以茎段为外植体,建立了报春石斛Dendrobium primulinum的离体培养再生体系。结果表明:愈合组织诱导以培养基MS(Murashige and Skoog)+5.0mg·L-16-苄氨基嘌呤(6-BA)+1.5mg·L-12,4-D为最优,诱导率达33.33%;分化和增殖培养基均以MS+1.0mg·L-16-BA+0.1mg·L-1萘乙酸(NAA)+体积分数10%椰子水为佳,分化率最高可达83.20%,增殖倍数达3.82,外源物质椰子水可促进不定芽的形成及增殖。形成的无根苗转移到1/2MS+0.5mg·L-16-BA+1.0mg·L-1NAA+0.5g·L-1活性炭培养基上诱导生根...
关键词：
植物学 报春石斛 茎段 再生体系
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
周玥玥 陈智勇 黄丽芳 邓果特 蒋建雄 易自力
以五节芒(Miscanthus floridulus)幼穗为外植体,建立了五节芒的离体再生体系:幼穗的最佳愈伤诱导培养基为MS+4.0 mg/L 2,4–D+0.1 mg/L 6–BA,最佳分化培养基为MS+2.0 mg/L 6–BA,最佳生根培养基为MS+1.0mg/L IAA+0.1 mg/L IBA+1.0 mg/L CCC。比较不同浓度秋水仙碱溶液对五节芒愈伤组织诱变的效果,结果显示,以1 000 mg/L秋水仙碱处理愈伤组织72 h,诱导率可达12.48%,形态特征、DNA含量和染色体核型分析表明,诱导获得的再生植株为五节芒四倍体。
关键词：
五节芒 离体再生 秋水仙碱 多倍体
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