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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
黄丛林 张大鹏 贾文锁
用胶体金免疫电镜技术，对脱落酸（ABA）在葡萄种子细胞超微结构水平上的分市进行了研究。按葡萄种子细胞液泡中是否含有电子密度大的染色物质，可将其分为含酚和无酚2个主要类型。在含酚细胞中电子密度大的染色物质呈多种状态存在，先是均匀而稀疏地分布在液池中，然后逐渐凝聚成块状，最后浓缩成一薄层并均匀分布在液泡膜内侧。无酚细胞中金颗粒主要标记在细胞核和细胞质，特别是细胞核有大量金颗粒标记，细胞壁有少量金颗粒标记，液泡中没有发现金颗粒标记。和无酷细胞相似，在含酚细胞中金颗粒主要标记在细胞核和细胞质，特别是细胞核金颗粒密度很大，细胞壁有极少金颗粒标记。引人注目的是液泡中聚集态的染色物质上也发现金颗粒标记，但稀...
关键词：
葡萄 种子 脱落酸 胶体金免疫电镜 定位
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王惠 钮绪燕 张建 董金皋 商鸿生
用柱层析和制备HPLC法从灰葡萄孢BC4菌株的PD培养滤液中分离到一种白色固体。经HPLC-ESIMS,GC-MS,IR和1HNMR鉴定为脱落酸。生物活性测定结果表明,该脱落酸的活性是标准脱落酸的2.5倍以上;用0.7μmol/L该物质的丙酮溶液处理反枝苋催芽种子,2d内反枝苋种子幼芽和幼根均无生长,而对照的反枝苋种子幼芽和幼根总长度平均为2.3cm,抑制率达100%。
关键词：
灰葡萄孢 脱落酸 生物活性 结构鉴定
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张晖 惠竹梅 彭小琴 王添民
【目的】研究表油菜素内酯（Epibrassinolide）对葡萄成熟的调控作用及其在葡萄成熟过程中与脱落酸（ABA）的关系，为表油菜素内酯在葡萄上的研究与应用提供理论依据。【方法】 以欧亚种酿酒葡萄（Vitis vinifera L.）品种赤霞珠（Cabernet Sauvignon）为供试材料，试验共设4个处理：（1）0.4 mg/L EBR（24Epibrassinolide,24表油菜素内酯）；（2）0.4 mg/L EBR+20 mg/L Flu（氟啶酮）或0.4 mg/L EBR+15 mg/L NDGA（去甲二氢愈创木酸）；（3）20 mg/L Flu或15 mg/L NDGA；（...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
戴荣四 刘毅 胡仕凤 李芬 王贵平
为了建立一种快速、简便的检测鸡新城疫病毒(NDV)的胶体金免疫层析法(GICA),采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的ND抗体,并包被在玻璃纤维素膜上,另外将纯化的ND抗体和纯化的兔抗鸡抗体包被在硝酸纤维素膜上,组装成ND快速检测试纸条.用本试验研制的ND快速检测试纸条检测收集的24份样品,其结果与HA结果一致,符合率100%;当病毒HA效价在1∶40以上时,试纸条均能检测为阳性;ND快速检测试纸条与已知的马立克病(MD)病料和鸡传染性法氏囊病(IBD)病料的上清液无交叉反应出现,且保存6个月后重复性100%.试验证明,建立的GICA是一种快速、灵敏、特异的抗原检测方法,可用于鸡新城疫...
关键词：
免疫层析法 胶体金 鸡新城疫 试纸条
[期刊] 淡水渔业
[作者]
夏武强 胡叶军 孙琛 张美珍 王伟萍 桑丽雅
通过研究胶体金免疫层析技术，建立了一种快速检测水产品中甲基睾酮含量的方法。将待测样品中的甲基睾酮和试纸条检测线上包被的人工抗原（ＭＴ－ＢＳＡ）竞争性结合金标结合垫上包被的胶体金－甲基睾酮单抗聚合物，根据检测线呈现的红色线条深浅来判定样品的阴阳性。结果显示：试纸条上ＭＴ－ＢＳＡ抗原工作浓度为１．０Ｍｇ／Ｍ Ｌ，羊抗鼠二抗工作浓度为１．５ Ｍｇ／Ｍ Ｌ，试纸条的最低检测限达到１０μｇ／ｋｇ，与甲基睾酮类似物的交叉反应率低；使用甲醇提取，４倍ＰＢＳＴ稀释，整个检测所需时间仅１０～１５ Ｍｉｎ，适用于大规模样品筛选。
[期刊] 水产学报
[作者]
辛志明 樊海平 吴斌 张新艳
采用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗豚鼠气单胞菌单克隆抗体分泌细胞株,获取抗豚鼠气单胞菌单克隆抗体,柠檬酸三钠还原氯金酸制备胶体金颗粒,选择直径20 nm的胶体金颗粒,标记抗豚鼠气单胞菌单克隆抗体并制备胶体金垫。将胶体金垫与喷涂有抗豚鼠气单胞菌兔多克隆抗体和羊抗鼠抗体的硝酸纤维素膜及样品吸收垫等组装成免疫层析试纸条,建立豚鼠气单胞菌的快速检测方法。用灭活细菌与血清混合的模拟样本测定试纸条的特异性、灵敏度,结果显示,试纸条对嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、荧光假单胞菌、副溶血弧菌等13种常见病原菌没有交叉反应,与豚鼠气单胞菌显示特异性反应,检测灵敏度为1×106CFU/mL,结果显示时间小...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
贾先春 周嘉明 智军海 郝秋艳 杨晓芳 王玮
[目的] 本文旨在建立一种胶体金免疫层析技术高通量测定猪肉、鸡肉组织中8种磺胺类、3种四环素类、2种喹诺酮类和甲氧苄啶药物残留的方法。[方法] 动物肌肉组织中磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶经磷酸缓冲液提取，并经含Tween 20的磷酸缓冲液稀释后，与胶体金标记的单克隆抗体结合，抑制抗体和硝酸纤维素膜检测线（T线）上的抗原结合，从而导致T线颜色变化。通过比较T线和质控线（C线）颜色深浅，对试样中多兽药残留进行定性判定。[结果] 本试验了优化pH值、抗体添加量、抗原包被量、Tween 20添加量和冻干保护剂种类等关键因素，磺胺类、四环素类、喹诺酮类和甲氧苄啶等药物的检出限分别为50、100、50、35 μg·kg~(-1)，灵敏度≥97%，假阳性率≤2%，假阴性率≤3%，且与现有标准方法检测结果一致。[结论] 该方法操作简便，灵敏度和准确度高，检测时间短且稳定性好，可用于动物肌肉组织中多兽药残留的高通量快速检测。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
王蔚芳 李青梅 郭军庆 雷霁霖
建立快速、准确、简便易行的病害早期快速检测技术,是从事动物疫病防控研究工作者和产业界人士的迫切愿望。自从开辟免疫分析技术以来,越来越多更灵敏、更便捷的免疫分析方法被开发出来,以胶体金免疫层析法为基础建立起来的快速检测试纸,被认为是当前最快捷、高敏感的一种免疫学检测技术。该项技术真正实现了快速简易检测靶目标,并已在畜牧业中得到普及应用,成为当前畜禽病害早期防控的最有效方法之一。本文就该项技术在畜牧兽医领域的研究进展、应用现状、发展前景进行了介绍、分析和讨论,旨在为水产养殖动物病害的早期诊断提供借鉴,以期获得一种适用于水产动物病害的、专用的快速检测新技术和新产品。
关键词：
胶体金 免疫层析 病害检测 水产养殖
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张蜀秋
研究了蚕豆离休叶片失水10％后，叶片与其气孔保卫细胞脱落酸含量的变化及其与叶龄的关系。未受胁迫叶片脱落酸含量在成熟叶片中高于幼嫩叶片，保卫细胞中脱落酸含量均在很低的水平。在叶片自然失水10％的10min内，叶片的脱落酸含量几乎无变化，但保卫细胞的脱落酸含量增加5倍以上。4h后，叶片脱落酸含量也显著增加，从最幼嫩叶片到成熟叶片分别达到处理前的25，26，17，10和6倍。因是离休叶片，排除了脱落酸的其他来源，说明叶片在失去膨压时合成并积累脱落酸；所有保卫细胞脱落酸含量都增加30倍以上，以第2，3片完全展开叶片的保卫细胞最为敏感，其脱落酸含量增加40倍以上。失水处理后保持湿润恢复膨压的叶片和其保卫...
关键词：
水分胁迫 脱落酸 保卫细胞 蚕豆
[期刊] 林业科学
[作者]
王敬文 蒋晶
研究了脱落酸（ＡＢＡ）诱导黑荆树悬浮培养细胞抗冻性发育的有关问题，其中包括ＡＢＡ施用浓度、抗冻性发育的时间进程、ＡＢＡ诱导可溶性蛋白质含量增高、环己亚胺对抗冻性发育的抑制作用等。研究结果表明，黑荆树悬浮培养细胞能够在添加ＡＢＡ的ＭＳ培养基中，在２５℃进行抗寒诱导，以１０ｍｇ／ＬＡＢＡ处理８天的悬浮培养细胞在－６℃的存活率达８３．６％，而对照存活率为零。ＡＢＡ能够诱导悬浮培养细胞可溶性蛋白质含量增高５．５倍，环己亚胺能够抑制蛋白质含量增高，同时也抑制低温驯化和ＡＢＡ诱导的抗冻性发育。
关键词：
黑荆树,抗冻性,ABA
[期刊] 中国农业科学
[作者]
蒋韬 梁仲 陈涓 何继军 吕律 马维民 刘在新 刘湘涛
【目的】建立一种从田间样品中快速、灵敏、简便检测O、A、AsiaI型口蹄疫病毒抗原的胶体金免疫层析方法(GICA)。【方法】采用柠檬酸三钠还原制备胶体金颗粒,标记纯化的标准株O、A、AsiaI型口蹄疫抗体。将纯化的口蹄疫流行株O/China99,A/AF72and AsiaⅠ/China05抗体和羊抗豚鼠抗体分别包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带。经试验条件优化,组装形成胶体金定型诊断试剂盒。【结果】本试验研制的口蹄疫定型试剂盒具有良好的灵敏度,可检测到7.8×104LD50(1﹕128倍稀释乳鼠毒)的病毒量。同时对阳性及阴性样品进行3次重复检测结果完全相同,说明其有较好的重复性;特异性...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
樊海新 李寒松 李复辉 马良友 朱平 吴金节 王希春
[目的]建立用于快速检测伏马菌素B1(FB1)的胶体金免疫层析试纸条。[方法]首先制备了FB1单克隆抗体和FB1-OVA偶联抗原,然后将FB1单克隆抗体与胶体金制成金标抗体包被在金标垫上,将FB1-OVA抗原和羊抗鼠Ig G包被在硝酸纤维素膜(NC膜)表面分别作为检测线和质控线。采用间接竞争法检测待检样品中的FB1与NC膜上的FB1-OVA抗原竞争结合金标抗体中的FB1单克隆抗体情况,并以检测线和质控线显示检测结果。[结果]本试验优化了金标抗体、检测抗原及羊抗鼠Ig G的包被量,检测FB1的灵敏度可达到2 ng·m L-1,最佳判定质量浓度为40 ng·m L-1。[结论]本试验制备的检测试纸...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李向梅 王战辉 肖希龙 王照鹏 温凯 吴小平 夏曦 武晋孝 江海洋
【目的】喹诺酮类药物和庆大霉素均为高效、广谱抗菌药物,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有显著的抗菌效果,是中国畜牧业和水产业中常用的两类兽药。由于这两类药物在动物源性食品中的残留可能导致对人类健康的危害,因此,为了保护消费者的健康,研究和制定动物源性食品中同时检测这两类药物的残留检测方法对完善中国的食品安全监测体系具有重要意义。【方法】建立了同时检测牛奶中13种喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并对喹诺酮类和庆大霉素单克隆抗体按比例进行混合标记。同时,采用方阵法系统研究了胶体金标记这两类抗体时的pH值和抗体用量对灵敏度的影响,并对这两类药物抗...
关键词：
喹诺酮类 庆大霉素 残留 胶体金免疫层析
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
郑青松 刘金隆 石峰 尹晓明 赵耕毛 王长海
植物生长和农业生产易受到病菌侵染和非生物胁迫(如干旱、盐渍)的危害。脱落酸(ABA)是一种重要的逆境植物激素,在应对这些逆境的代谢调控中占有非常重要的地位。随着当前生态环境的恶化,了解ABA信号转导机制对于改善植物生产具有重要意义。PYR/PYL/RCAR-PP2C-SnRK2蛋白复合体等脱落酸受体研究,以及ABA信号转导途径介导渗透胁迫下许多生理反应,如组蛋白的修饰、活性氧的形成、Ca2+的释放等研究均取得重要成果,并成为国内外的研究热点。本文对近年来与此相关的研究进展进行了综述,以期为了解ABA在植物耐逆性中的作用提供参考。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
阮英 生吉萍 刘开朗 申琳
以番茄中杂101为材料,研究采后果实成熟过程种子和果皮中脱落酸(ABA)含量与乙烯生物合成的关系,以及外源ABA及其生物合成抑制剂(fluridone)处理对果实ABA含量和乙烯释放量的影响。结果表明:采后番茄果实成熟过程中,种子的乙烯释放量、1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)含量和ABA含量均高于同时期果皮;种子和果皮中ABA和ACC含量的峰值都出现在乙烯跃变之前;ACC氧化酶(ACO)活性变化趋势与ABA含量及乙烯释放量的变化趋势相一致;外源ABA处理使果皮和种子中ABA含量显著增加,促进了果实乙烯的生成;fluridone处理则相反。以上证据表明,番茄果实中的ABA通过刺激乙烯的生成促进...
关键词：
番茄果实 种子 成熟 脱落酸 乙烯
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