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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
贾晋 张鲁刚
【目的】探索快速高效的RNA提取方法,建立高效率的mRNA差异显示体系。【方法】以萝卜幼嫩薹叶及花蕾为材料,比较了酸性酚-异硫氰酸胍-氯仿提取法(异硫氰酸胍法)与BIOZOL试剂法提取RNA的效果,并对DDRT-PCR体系中Taq酶、Mg2+、dNTPs、引物及cDNA用量进行了优化。【结果】BIOZOL试剂提取的RNA量大质好,经纯化后,其OD260/OD280值为1.8~2.1,表明杂质少,质量浓度大于1μg/μL,符合mRNA差异显示的要求;确定的最佳DDRT-PCR反应体系(20μL)为:10×Buffer 2.5 mmol/L,Mg2+2.8 mmol/L,dNTPs 0.25 mm...
[期刊] 华北农学报
[作者]
李红双 邱杨 李锡香
以萝卜基因组DNA为模板,对其SRAP-PCR反应体系的各个主要影响因子进行了系统的优化,建立了重复性好、多态性丰富的萝卜SRAP-PCR反应体系:20μL反应体系中,DNA50 ng、Mg2+2.25 mmol/L、dNTP 0.2 mmol/L、Taq1 U、Primer 0.7μmol/L。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min、35℃复性1 min、72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min、50℃复性1 min、72℃延伸1 min,35个循环,72℃延伸10 min,4℃保温。该反应体系在不同萝卜种质资源遗传多样性分析、遗传图谱构建、分子标记辅助选择育种...
关键词：
萝卜 SRAP-PCR 反应体系
[期刊] 华北农学报
[作者]
杨艳梅 刘玲 巩振辉 刘凡
以胡萝卜下胚轴为外植体,研究其愈伤组织诱导及植株再生各个时期的影响因素。试验结果表明:0 1mg/L2,4 D或0 1mg/L2,4 D+0 2mg/LKT的激素组合有利于胡萝卜下胚轴的愈伤组织诱导;在0 1mg/L2,4 D的培养基上形成的愈伤组织主要以胚状体的形式再生,而在含0 1mg/L2,4 D+0 2mg/LKT激素组合的培养基上形成的愈伤组织主要以发生不定芽的方式再生;再生过程中,B5基本培养基上的苗子不易生根,需要附加0 1mg/L的IBA,而在MS培养基上苗子可直接形成根。
关键词：
胡萝卜 下胚轴 再生
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭蓉 李霞 张金文 李兴涛 杨慧 刘玲
选黑田五寸胡萝卜栽培种,通过农杆菌介导的转化方法,获得转基因植株。结果表明:抗性愈伤和芽分化用不同浓度Kan筛选,Kan抗性芽的分化频率可达52%,Carb 500 mg/L能够完全抑制农杆菌的生长并能促进芽的分化;适当浓度的Cef对根形成有一定促进作用。转基因植株炼苗,采用塑料布覆盖并逐渐打开通风口通风的方法,抗性植株长势好,抗性强,成活率可以提高35%。低温春化,大棚和陆地相比,死亡率降低了49.5%。对7个株系T1植株的PCR分析,得出其中两株系接近1∶1,另两株系为1∶3。
关键词：
胡萝卜 转化体系 低温春化 农杆菌介导
[期刊] 华北农学报
[作者]
范惠玲 白生文 李华清 孙万仓
芸芥与芸薹属植物具有亲缘关系，也是芸薹属植物的重要育种资源。自交亲和性是芸芥的一种重要变异性状。为了探明芸芥自交亲和基因的表达器官，并分离与自交亲和性有关的ｃＤＮＡ片段，以芸芥的一对近等基因系，自交亲和系（Ｓｃ）与自交不亲和系（ＳＩ）为试材，利用差异显示ＲＴ－ＰｃＲ技术分别对开花前和开花后的叶片、花药和柱头进行鉴定。结果表明，不论开花前还是开花后，芸芥自交亲和系与自交不亲和系的叶片或花药间的扩增带型是一样的，但在近等基因系的柱头间得到了差异表达条带。这证明芸芥自交亲和基因不是组成型表达，而是组织特异性表达，柱头是其唯一的表达器官。在开花前的自交亲和系中共得到了２条ｃＤＮＡ片段，一条小于１００ ．．．
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈银岳 孙叶 霍永久 占今舜 刘明美 詹康 赵国琦
以蛹虫草中类胡萝卜素的提取得率为考察指标,分别运用酸热提取法、超声提取法、酸热超声提取法、微波提取法、酸热微波提取法、丙酮提取法提取类胡萝卜素,比较6种方法的提取得率,得出酸热超声提取法是较好的提取方法。采用酸热超声提取法,设盐酸浓度、酸浸时间、沸水浴时间、超声功率、超声温度和超声时间等6个单因素试验,结合L27(313)正交试验设计,优化提取工艺参数。得出酸热超声提取法最优提取条件为盐酸浓度2.25 mol/L,酸浸时间30 min,沸水浴时间6 min,超声功率400 W,超声温度25℃,超声时间25 min,类胡萝卜素提取得率可达1 134.88μg/g;影响提取得率大小的因素依次为超声...
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
罗慧 傅建祥
基于现代农业相关理论及我国现代农业示范园区发展的状况,结合示范园区在建设、经营和效益3个方面应具备的能力角度设计现代农业示范园综合评价指标体系,最终确定了5个一级指标和19个二级指标,并采用模糊层次分析法(Fuzzy-AHP)对各级指标的权重进行测算。结果表明,科技支撑能力、示范带动能力和硬件投入状况3个指标权重都超过0.2,对园区的综合发展起着非常重要的作用;经济发展能力对园区发展影响较大,权重介于0.15-0.2之间;可持续发展能力的影响力较小。结合青岛市店埠镇胡萝卜种植园实际调研得到专家给出的模糊评
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李武强 万芳新 韦博 黄晓鹏
【目的】优化胡萝卜切片超声远红外干燥过程的超声工艺。【方法】以超声频率、功率和处理时间为试验因素进行单因素试验,在此基础上利用响应曲面分析法建立干制品评价指标的二元回归数学模型,对超声辅助干燥工艺进行优化。对不同干燥工艺条件下胡萝卜切片的营养品质、干燥时间进行比较,并对其微观结构进行扫描电镜观察。【结果】所建立的模型显著,超声参数对各项指标的影响大小为:超声处理时间>超声功率>超声频率;超声远红外干燥的最优工艺参数为:超声频率60 kHz、超声功率40 W、超声处理时间20 min,此时对应的评价指标为:复水比5.61,色差值6.25,能耗2.96 kJ/g。验证结果表明,试验值和预测值的误差不大,说明回归模型所得的预测值和实测值具有较好的一致性。超声远红外干燥更有利于保留胡萝卜的营养组分,增加胡萝卜切片表面细胞微毛细管的孔径和数量。【结论】超声预处理可以明显缩短胡萝卜远红外干燥的时间,保证干制品的品质。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
陈慧聪 王茜 薛毓才 王伟隆 黄旭雄
为探究β-胡萝卜素强化对卤虫体内类胡萝卜素组成和含量的影响，以渤海湾卤虫（Artemia）为研究对象，设置5个β-胡萝卜素强化剂梯度（1、3、5、7、9mg·L~(-1)），并设1个无添加对照组，分别比较卤虫无节幼体和成虫在强化后体内类胡萝卜素组成和含量的变化。结果表明，强化后的卤虫体内检测到β-胡萝卜素、角黄素和海胆酮3种类胡萝卜素。营养强化后，卤虫无节幼体和成虫体内β-胡萝卜素含量随着强化剂量增大显著上升（P<0.05）；无节幼体海胆酮和成虫体内角黄素含量变化大致上与β-胡萝卜素强化梯度表现出显著相关性（P<0.05）。饥饿12h后，β-胡萝卜素下降显著，但强化组β-胡萝卜素沉积量依然显著高于对照组（P<0.05），表现出良好的富集效果。因此，通过营养强化的卤虫，不仅可以作为外源类胡萝卜素的生物载体，还可以利用其体内代谢转化为养殖苗种提供多级类胡萝卜素营养。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
赖晓芳 孔杰 王清印 王伟继
为了分析中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)抗白斑综合征病毒(WSSV)相关的分子机理,本研究以中国对虾"黄海2号"作为实验材料,进行白斑综合征病毒感染实验,感染20d后获得了59尾存活的对虾。采用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)分析感染实验中早期濒死中国对虾和感染20d后仍存活对虾基因表达的差异,共回收到46个阳性差异片段。差异片段序列同源性功能分析的结果表明,差异片段所编码的蛋白主要参与氧化磷酸化、蛋白质合成、糖酵解、信号转导等生物过程。以上结果初步反映了中国对虾抗白斑综合征病毒相关基因的表达特征,为研究对虾抗白斑综合征病毒的作用机制及培育抗白斑综合征病毒对...
[期刊] 华北农学报
[作者]
文雁成 张书芬 王建平 朱家成 何俊平 蔡东芳 曹金华 赵磊 王东国
通过采取不同的常规育种策略和小孢子培养、分子标记辅助选择等现代生物技术，研究了提高甘蓝型油菜萝卜质不育恢复系改良效率的方法。结果表明，在甘蓝型油菜萝卜质不育恢复系杂交转育过程中，采用杂交后代与萝卜质不育系杂交，可使杂交后代分离群体中不具备恢复基因的单株在花期表现出来，无须测交即可进行选择；杂交后代通过小孢子培养，可将稳定纯合时间由传统自交８个世代缩短到３个世代；通过萝卜特异分子标记辅助选择可大大提高选择的精度，减少筛选所需的人力、土地和时间，选择效率提高９０％。试验筛选出１９个在萝卜质不育恢复系中能够扩增出单一、易于辨别的谱带的ＳＣＡＲ标记引物，其中１０个引物在现有的甘蓝型油菜萝卜质不育恢复系．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
梁艳荣 胡小红 陈源闽 王勇 张艳萍 张少英
为进一步揭示与研究胡萝卜雄性不育的生化遗传机制,分析了胡萝卜雄性不育系及其同型保持系在花蕾发育的不同时期蛋白质、可溶性糖、丙二醛、脯氨酸、超氧化物歧化酶、过氧化物酶含量的变化趋势。结果表明,从小花蕾到盛花期,不育系和保持系蛋白质含量均呈现由高向低变化的趋势,不育系各期蛋白质含量均低于保持系;可溶性糖含量逐步升高,到盛花期达到最大值,不育系可溶性糖均低于保持系;不育系脯氨酸含量呈下降的趋势,而保持系则呈上升的趋势;不育系脯氨酸含量低于保持系,其中盛花期脯氨酸含量差异最大;超氧化物歧化酶含量逐步升高,保持系超氧化物歧化酶活性高于不育系;过氧化物酶含量的变化趋势为高—低—高,不育系过氧化物酶含量高于...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
朱玉英 吴晓光 龚静 金海军 姚文岳 李式军 吴琴生
1992至 1999年期间 ,以萝卜细胞质甘蓝雄性不育系 92 0 8为不育源 ,对不同类型的青花菜材料进行转育 ,育成了萝卜胞质青花菜雄性不育系BC7 19。该不育系不育性稳定 ,不育株率及不育度均达 10 0 % ;基本克服了苗期低温黄化现象 ,花器结构正常 ,结实能力强。利用不育系BC7 19培育出了青花菜一代杂种沪青 1号 ,具有生长势强、早熟、抗黑腐病、综合园艺性状优良等特点 ,增产效益显著
[期刊] 华北农学报
[作者]
宋江萍 汪精磊 李杨 沈镝 李锡香
研究比较不同物质恢复老化种子活力的能力，可为老化种子活力的恢复和种质资源安全保藏提供依据。采用单因子试验设计，以２个经多年低温储藏的萝卜品种的种子为材料，使用不同浓度的赤霉素（ＧＡ３）、６－苄基腺嘌呤（６－ＢＡ）、萘乙酸（ＮＡＡ）、１５％多效唑可湿性粉剂、水杨酸（ＳＡ）、磷酸二氢钾（ＫＨ２ＰＯ４）、聚乙二醇（ＰＥＧ）溶液单独处理一定时间，在同样条件下发芽，测量种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数，研究不同植物生长调节剂或化学物质对老化萝卜种子活力恢复的影响。结果表明，ＧＡ３、６－ＢＡ、ＮＡＡ、ＳＡ、ＫＨ２ＰＯ４、ＰＥＧ均能在不同程度上恢复老化萝卜种子活力，且３００ ｍＧ／Ｌ的ＰＥＧ和１００．．．
关键词：
萝卜种子 老化 植物生长调节剂 活力恢复
[期刊] 华北农学报
[作者]
张丽 赵秋菊 付传翠 白小娟
通过单倍体育种途径可快速获得纯合材料,增加有益性状的选择几率,加快育种进程。花药培养是获得单倍体的有效途径之一,已在十字花科芸薹属作物上取得巨大成功。但关于萝卜花药培养的报道极少。以15个不同类型的萝卜品种为试材,研究了花药离体培养中胚状体的诱导及再生。结果表明:基因型是限制花药培养成胚的关键因素,15个品种中,有4个品种获得了胚状体及再生苗。同时植株生长条件也对胚状体的形成产生影响。采用流式细胞仪(FCM)鉴定了再生株的倍性,再生株群体的倍性组成比较复杂,以二倍体为主。
关键词：
萝卜 花药培养 单倍体育种
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