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[期刊] 华北农学报
[作者]
罗莎 黄璐瑶 殷勤 张钰莹 赵燕 张智胜
为了解析菠菜乙醇酸氧化酶(Sp GLO)的酶学特性及同工酶谱。首先提取菠菜的RNA并反转录成c DNA,通过NCBI数据库中提供的菠菜GLO基因mRNA序列信息,设计特异性引物,扩增目标序列并连接到p MD19-T载体上进行测序鉴定;随后再次设计引物并在上游引物加入His标签,克隆Sp GLO基因构建到p YES2载体上,将该载体转入酿酒酵母中进行表达并通过His-tag亲和柱纯化,然后在不同诱导时间点取样测定Sp GLO酶活。结果显示,转化后的酿酒酵母菌株在诱导发酵20 h后能得到最高的GLO活性。以乙醇酸为底物测定Sp GLO在不同p H、不同温度条件下的催化活性,其最适p H值为8. 0,最适温度为39℃。然后分别以乙醇酸、乙醛酸、甘油酸为反应底物,系统分析了Sp GLO的酶学特性,数据显示,Sp GLO对乙醇酸的亲和力最高,其Km为0. 41 mmol/L,Vm为45. 92μmol/(min·mg)。以乙醇酸、乙醛酸为底物,使用草酸抑制其催化活性,其Ki分别为4. 61,2. 09 mmol/L,表明以乙醛酸为底物时Sp GLO的催化活性更易被草酸抑制。同时将纯化后的Sp GLO通过Caps-氨水电泳体系进行同工酶电泳,经过染色后出现2条同工酶带,表明菠菜叶片中可能存在2种GLO同工酶。为将来深入研究植物GLO同工酶之间的生化特性差异并分析其不同生理功能奠定良好的基础。
关键词：
乙醇酸氧化酶 酶学特性 同工酶电泳 菠菜
[期刊] 林业科学研究
[作者]
李明 黄卓烈 谭绍满 莫晓勇 林海球 龙腾
尾叶桉的 ML A无性系 (简称 ML A)是难生根无性系 ,尾叶桉的 U6无性系 (简称 U6)、刚果12号桉 W5无性系 (简称 W5)为易生根无性系。MLA各器官的多酚氧化酶 (PPO)活性比 U6、W5的低 ,而 ML A各器官的吲哚乙酸氧化酶 (IAAO)活性比 U6、W5的高。各树种的 PPO活性、IAAO活性及 PPO同工酶均具有器官的特异性。讨论了 PPO和 IAAO与不定根的发生和发展的关系
[期刊] 水产学报
[作者]
李清漪 刘堰
大瓶螺四种同工酶的电泳分析李清漪，刘堰（西南师范大学生物系，重庆６３０７１５）关键词大瓶螺，同工酶，差异，电泳分析ＴＨＥＥＬＥＣＴＲＯＰＨＯＲＥＴＩＣＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦ４ＩＳＯＥＮＺＹＭＥＳＯＦＡＭＰＵＬＬＡＲＩＡＧＩＧＡＳ￥ＬｉＱｉｎｇｙｉａｎｄ...
关键词：
大瓶螺,同工酶,差异,电泳分析
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李广丽 杜晓东 叶富良
采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直板电泳技术和特异性染色方法 ,对合浦珠母贝外套膜、闭壳肌、肝脏和鳃组织中的 15种同工酶系统进行分析 ,结果表明 :a GPDH、ADH在 4种组织中均未见表达 ;AK、AMY、PGM、ALP、GDH和LDH只在肝脏中表达 ,而ME、SOD、EST、MDH、G6PD、6PGD和AAT则有较广泛的组织分布 ,其中 12个座位 (Aat 1、Aat 2、Sod 1、Sod 2、Sod 3、Sod 4、m Mdh c、G6pd 2、6Pgd 2、Ak 1、Gdh 1、Me 2 )具有多态性 ,多态位点比例为 4 6.1% ,平均杂合度 0 .112 2± 0 .0 576。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张涛 陈鹏 沙文军 王冉旋 何力 牛建功 甘金华
为了解新疆裸重唇鱼的生化遗传特性，丰富新疆裸重唇鱼种质资源研究的内容，借助聚丙烯胺凝胶对新疆裸重唇鱼5种组织(心脏、眼睛晶状体、肝脏、肾脏和脾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)以及酯酶(EST)进行了电泳分析。结果表明：新疆裸重唇鱼的LDH、MDH和EST同工酶系统具有个体差异性和组织特异性。组织特异性主要表现在同工酶位点表达及其表达活性程度不同两方面，可能受遗传和代谢双重调控，与各组织执行生理功能密切相关。LDH-C基因只在肝脏中表达，酶谱图上靠近阴极附近，为典型“肝带”。新疆裸重唇鱼同工酶个体差异性可能是其在漫长的进化过程中为了能适应特殊生境的需要。新疆裸重唇鱼心脏中上清液型苹果酸脱氢酶(s-MDH)最多表达出6条酶带，可能是新疆裸重唇鱼在进化过程中四倍体化使基因重复的结果。研究结果可从生化遗传角度为新疆裸重唇鱼种质资源保护利用提供一定理论依据。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘昌文 丁志祥 程昌文
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，研究了柑桔属４个种的６个品种，两个营养系芽变品系和１个杂交后代的成熟春梢的叶片酯酶同工酶酶谱和蛋白质电泳带型。根据酶谱及带型的异同，探讨其彼此的亲缘关系，鉴别芽变品系和杂种。结果表明，酯酶同工酶酶带清晰，种间酶带差异明显，种内不明显。蛋白质电泳带无拖尾现象，清晰而窄，种间和种内不同品种间谱带差异明显；芽变品系具有原品种所有带型，并出现新的谱带；种间杂种带型复杂，谱带条数多。不仅具有双亲所具有的谱带，又不完全表现为两亲本谱带的互补型，亲本所具有的个别谱带在子代中消失，而且出现了双亲所不具有的杂种谱带。柑桔叶片酯酶同工酶分析，可作为探测基因差异和遗传关系的一种手段，其酶谱...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
黄玉茜 陈捷 韩梅 梁春浩
用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对木霉菌的野生菌株T21及其4株REMI转化子T31、T34、T47、T55的可溶性蛋白和酯酶同工酶进行了比较研究。结果表明各转化子之间、转化子与野生菌株之间的谱带均有差异。野生菌株T21及转化子T31、T34、T47、T55的蛋白谱带为22,21,19,17,24条;酯酶谱带为6,8,4,5,3条。
关键词：
木霉 酯酶同工酶 可溶性蛋白
[期刊] 华北农学报
[作者]
张军科 洪小娟 马锋旺
为了研究GO基因在植物中的功能,获得转基因植株,用限制性内切酶将乙醇酸氧化酶(GO)基因从克隆载体pBSSP5上切下,连接到植物双元表达载体pBin117的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,成功构建了GO基因植物表达载体pBinGO。在此基础上以嘎拉苹果叶片为受体,通过根癌农杆菌介导法将GO基因导入苹果,获得了2个抗性芽,PCR检测初步表明GO基因已整合到嘎拉苹果基因组中。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
伍玲 刘熔山
以小麦、玉米、小米、高粱、狼尾草５个不同属的材料为外源ＤＮＡ供体，经减压渗透转导入受体紫稻，从获得的变异材料中各选一份，在苗期和分蘖期用聚丙烯酰胺凝胶等电点聚焦电泳分析了过氧化物酶同工酶，结果发现各变异材料在所测两时期均与受体紫稻存在差异，这些差异主要表现在弱带上，以带的增加为主，也有带的缺失，在强带分布上也有明显差异。同时发现等电点聚焦重复性好，灵敏度、清晰度高，为一种有效的检测手段。
关键词：
水稻,减压渗透法,外源DAN导入
[期刊] 林业科学研究
[作者]
李明 黄卓烈 谭绍满 林韶湘 龙腾 林海球
尾叶桉 ML A无性系 (简称 MLA)为难生根植物 ,尾叶桉 U6无性系 (简称 U6)和刚果 12号桉W5无性系 (简称 W5)为易生根植物。 MLA的插条内的 POD、IAAO活性较 U6、W5的高 ,而 PPO活性比 U6、W5的低。用 IAA处理桉树的插条后 ,在扦插生根的不同阶段 ,插条内的 POD、PPO、IAAO活性呈现规律性的变化。蛋白质含量呈上升趋势。POD、PPO同工酶谱带也随生根的进程出现增多现象。本文讨论了 3种氧化酶与桉树插条生根的关系。
[期刊] 华北农学报
[作者]
周峰 张边江 华春 邱念伟
用300 mg/L氯化胆碱(CC)喷施低盐处理下的非盐生植物菠菜叶片,研究了CC对不同浓度NaCl处理的菠菜光合生理和抗氧化酶活性的变化。结果表明:300 mg/L氯化胆碱喷施后,显著促进低盐处理后菠菜净光合速率和抗氧化酶系统中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,叶绿素和蛋白质含量增加,超氧阴离子(O2.-)和丙二醛(MDA)含量明显低于未经CC喷施的。这说明CC可提高菠菜的耐盐性。
关键词：
氯化胆碱 NaCl 菠菜 抗氧化酶
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
许雷 张书芹 陈盛虎 徐小云 姚燕妮 黄友谊
以龙井43号茶树鲜叶为材料,通过硫酸铵分级沉淀、离子交换层析、凝胶过滤层析等方法对茶树多酚氧化酶同工酶进行分离纯化,最终分离出1个单一同工酶(PPO V),该同工酶亚基大小约为80ku。
关键词：
龙井43 多酚氧化酶 同工酶 分离纯化
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王坤波 刘仲华 赵淑娟 傅冬和 黄建安
用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶的方法,研究了不同品种梨(丰水梨、贡梨、雪梨、水晶梨、香梨)果实多酚氧化酶同工酶的酶带特征.结果表明,不同品种梨多酚氧化酶同工酶具有相似的酶带,但酶带数目、Rf值及相对分子质量均存在种间差异.丰水梨有11条同工酶带,贡梨7条,雪梨5条,水晶梨和香梨分别为6条和4条.PPO同工酶带Rf值集中于0.40～0.70,其相对分子质量集中于4.5×104～9.4×104.同时研究了多酚氧化酶活性和同工酶组成对茶黄素合成的影响.丰水梨果实多酚氧化酶同工酶谱带最多,酶活性最大,合成茶黄素的能力最强.多酚氧化酶合成茶黄素能力大小顺序为:丰水梨,贡梨,雪梨,香梨,水晶梨.
关键词：
梨 多酚氧化酶 同工酶 茶黄素 合成
[期刊] 淡水渔业
[作者]
肖汉兵 刘鉴毅 林锡芝
大鲵在进比地位上是处于鱼类和无尾两栖类之间的过渡性物种,全面地研究与了解其生物学特性具有重要意义。目前我国关于大鲵的生理生化指标方面的研究材料较为零星,其同工酶系统的研究结果还未见报道。本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了大鲵的乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、酯酶、醇脱氢酶
[期刊] 华北农学报
[作者]
李成奇 石跃进 潘转霞 袁钧 刘巷禄 任雪峰
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)方法,对晋A棉花质核雄性不育系及其保持系作了酯酶过氧化物酶同工酶分析。结果表明,晋A及其保持系两种同工酶在所有器官上均具有一些共同的基本酶带,在营养器官上无较大差别,说明它们具有基本一致的遗传背景。受育性基因的影响,进入生殖阶段,在造孢细胞增殖时期的花蕾上,晋A较其保持系明显缺少特征谱带,表明在此阶段雄性不育基因调控了同工酶的合成,导致花粉粒发生败育。
关键词：
晋A 保持系 酯酶 过氧化物酶
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