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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 谢晶  周童晖  孙连月  李晶  林占熺  
使用CCK-8比色法研究菌草灵芝多糖肽(JCGLPP)对人结肠腺癌上皮细胞(Caco-2)存活率的影响;采用PCR检测JCGLPP作用不同时间后对Caco-2细胞中P-糖蛋白的编码基因MDR1和多药耐药相关蛋白-2的编码基因MRP2表达水平的影响.结果显示:0.1~500μg·mL~(-1) JCGLPP对Caco-2细胞无毒性;10μg·mL~(-1) JCGLPP作用1~48 h能抑制MDR1基因的表达,对MRP2基因的表达呈先抑后扬的趋势.表明JCGLPP可抑制MDR1基因的表达,对MRP2基因表达的影响与其作用时间有关.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 覃娟清   杜志坚   张富   秦莉雯   郭宇康   刘庆华  
【目的】研究日粮中添加菌草灵芝多糖肽(JCGLPP)对闽西南黑兔生长性能、血液生化指标及免疫功能的影响,为JCGLPP在肉兔中的应用提供依据。【方法】选取(33±2) d、初始体质量(655.65±25.90)g、健康状况良好的断奶闽西南黑兔公兔100只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加50,100和150 mg/kg JCGLPP的日粮,56 d后统计腹泻率和死亡率,测算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)以及料重比(F/G);屠宰后取背腰最长肌,测定pH值、滴水损失率和剪切力;采集血清,测定总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)质量浓度,尿素氮(UN)、丙二醛(MDA)浓度,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及IgG、IgA、IgM和IL-6质量浓度;计算心脏、肝脏、肾脏、圆小囊、脾脏、胸腺和蚓突器官指数;测定十二指肠、空肠、回肠黏膜炎性因子IL-1α、IL-2和分泌型免疫球蛋白(sIgA)质量浓度及肠道淀粉酶、纤维素酶和胰蛋白酶活性。【结果】(1)各组间兔的终末体质量、平均日增重、平均采食量和料重比均无显著差异(P>0.05);对照组兔的腹泻率和死亡率最高,Ⅱ组兔的腹泻率显著低于对照(P<0.05)。(2)试验组兔肌肉的pH、滴水损失和剪切力均与对照无显著差异(P>0.05)。(3)Ⅱ组兔血液中的TP、ALB质量浓度及SOD、GSH-Px活性显著高于对照(P<0.05),而UN和MDA浓度显著低于对照(P<0.05)。(4)Ⅱ组兔血液中的IgG、IgA、IgM质量浓度均显著高于对照(P<0.05),而IL-6质量浓度各组差异不显著(P>0.05)。(5)各组兔免疫器官指数差异均不显著(P>0.05);试验组兔十二指肠、空肠、回肠IL-1α、IL-2和sIgA质量浓度大多显著高于对照(P<0.05),肠道淀粉酶活性均显著低于对照(P<0.05),Ⅰ组兔的肠道纤维素酶和胰蛋白酶活性、Ⅱ组兔的肠道胰蛋白酶活性显著高于对照(P<0.05)。【结论】JCGLPP对闽西南黑兔的促生长作用不明显,但能提高机体的抗氧化和免疫能力,降低腹泻率和死亡率,添加量以100 mg/kg为宜。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 黄在兴  刘凌云  陈华  翁伯琦  林占熺  刘朋虎  
【目的】研究菌草灵芝多糖肽(GL-PP)对肝癌细胞Huh7活性、迁移和细胞凋亡的影响,为GL-PP应用于肝癌治疗提供理论依据。【方法】用低(50μg/mL)、中(100μg/mL)、高(200μg/mL)3种不同浓度的GL-PP处理肝癌细胞Huh7,分别采用CCK8、Transwell方法、流式细胞仪分析不同浓度GL-PP对肝癌细胞Huh7活性、迁移和细胞凋亡的影响。【结果】培养基添加GL-PP后肝癌细胞Huh7活力降低,且GL-PP添加浓度越高活力降低越多,但是差异均不显著(P>0.05);GL-PP的浓度为100μg/mL时对肝癌细胞Huh7的迁移无明显影响,当浓度为200μg/mL时对肝癌细胞Huh7的迁移具有明显的抑制作用;低浓度(50μg/mL)和中浓度(100μg/mL)的GL-PP对肝癌细胞Huh7的凋亡无明显影响(P>0.05),高浓度(200μg/mL)的GL-PP能够明显(P<0.05)诱导肝癌细胞Huh7的凋亡。【结论】GL-PP对肝癌细胞Huh7细胞活性影响不显著,高浓度的GL-PP可抑制肝癌细胞Huh7的迁移,也可诱导其凋亡。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 崔志文  黄琴  黄怡  吴红照  文静  李卫芬  
【目的】研究鼠李糖乳酸杆菌(Lactobacillus rhamnosus)对氧化应激状态下Caco-2细胞抗氧化功能的影响。【方法】将培养的Caco-2细胞分为4组:对照组和氧化应激组(在培养液中加入100μmol.L-1 H2O2),处理组Ⅰ和处理组Ⅱ在氧化应激条件下分别添加鼠李糖乳酸杆菌(约108 CFU.mL-1)和抗氧化剂特丁基对苯二酚(TBHQ)(2.75μg.mL-1)各1 mL。Caco-2细胞培养至12和48 h时分别测定其上清液和裂解液的抗氧化活性。【结果】添加鼠李糖乳酸杆菌减轻了Caco-2细胞氧化受损,使细胞培养上清中的总抗氧化力(T-AOC)显著高于氧化应激组:12 ...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 黄怡  黄琴  李雅丽  崔志文  李卫芬  余东游  
【目的】通过检测促炎细胞因子APRIL和抗炎细胞因子IL-10的分泌水平来观察屎肠球菌和乳酸乳球菌对肠上皮细胞先天性免疫应答的调节作用。【方法】Caco-2细胞分别和PBS(CT组,阴性对照组)、Escherichiacoli K88(EC组,阳性对照组),Enterococcus faecium(EF组)或Lactococcus lactis(LL组)共孵育2 h,以及先分别和Enterococcus faecium或Lactococcus lactis共孵育1 h,再和Escherichia coli K88共孵育2 h(EF-EC组和LL-EC组)。试验结束时,用ELISA方法检测细胞培...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 苏利娅  董玲玲  王丽平  
为探索球虫感染对蛋鸡肝脏和肠道组织中多药耐药蛋白基因(mdr1)、多药耐药相关蛋白基因(mrp2)和乳腺癌耐药蛋白基因(bcrp)mRNA表达的影响,采用荧光定量PCR方法,以β-actin为内参,对球虫感染蛋鸡以及健康蛋鸡的肝脏、十二指肠、空肠、回肠中的mdr1和mrp2及bcrp mRNA进行相对定量测定。结果表明:与健康对照鸡比较,球虫感染导致mdr1 mR-NA表达水平在十二指肠中有显著上调(P=0.043),而在其他组织中mRNA表达水平均无显著差异(P>0.05);mrp2 mR-NA表达水平在健康和球虫感染蛋鸡的肝脏及肠道中均无显著差异(P>0.05);bcrp mRNA表达在肝...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王赛贞  林占熺  林冬梅  林树钱  林志彬  李晶  
灵芝是我国传统大型药用真菌之一,属无隔担子菌亚纲,无褶菌目,灵芝科,灵芝属,常见的有赤芝[Ganoderma lucidum(Curtis:Fr.)P.karst]、紫芝[Ganoderma sinense(Zhao,Xu et Zhang)][1]。从赤芝[Ganoderma lucidum(Curtis:Fr.)P.karst]多糖肽中分离纯化具有活性成分GL-PPS,对其进行结构分析。经分离纯化得GL-PPS,通过高效液相凝胶渗透色谱法(high-performance gel-permeation chromatography,HPGPC)、气相色谱、甲基化分析和Smith降解等方法研...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 叶小兰  李鹏成  杨倩  
为探讨枯草芽孢杆菌及其培养上清液对产肠毒素大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的抗黏附作用,本试验将产肠毒素大肠杆菌K88或鼠伤寒沙门氏菌SL1344与枯草芽孢杆菌及其培养上清液先后加到Caco-2细胞上,用活菌计数的方法观察产肠毒素大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌及枯草芽孢杆菌黏附Caco-2细胞的情况。结果显示:在排斥、竞争和置换试验中,枯草芽孢杆菌菌体均能够明显抑制K88和SL1344的黏附及SL1344的内化,在竞争试验时K88的黏附减少了71.2%、SL1344的黏附及内化减少了92.9%,但枯草芽孢杆菌的培养上清液只有在竞争试验中才能明显抑制K88和SL1344的黏附及SL1344内化。提示:枯草芽孢...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 袁保京  张日俊  
为寻找适合灵芝胞外糖肽(EPSP)液体深层发酵工艺商业化生产的经济高效的培养基原料,在摇瓶水平上比较研究了不同类型的碳源和氮源(各6种)对灵芝胞外糖肽(EPSP)产量的影响。试验表明:玉米粉是最适合灵芝EPSP生产((2.664±0.801)g/L)和菌丝生长((4.559±0.150)g/L)的碳源;尿素是最适合灵芝EPSP生产((0.636±0.040)g/L)的氮源,豆粕粉则是最适合灵芝菌丝生长的氮源((2.222±0.256)g/L);玉米粉与豆粕粉组合是最适合灵芝EPSP生产((4.366±0.434)g/L)的碳氮源组合。本研究结果可为灵芝EPSP液体深层发酵工艺的工业化生产提供科...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 杨晓萍  吴谋成  
【目的】研究油菜花粉多糖(LBPP)对荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α的诱生及其mRNA表达的影响。【方法】通过动物抑制性肿瘤法制备肿瘤模型,采用双抗体夹心ELISA法检测IL-2、TNF-α含量,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-2、TNF-α mRNA的表达。【结果】LBPP有明显抗肿瘤作用,200mg·kg-1高剂量组抑瘤率可达51.26%,明显优于环磷酰胺46.22%;LBPP可显著促进荷瘤鼠脾细胞IL-2、TNF-α分泌(P<0.01),高剂量组提高率分别达56.37%、105.24%、1364%和12...
[期刊] 华北农学报  [作者] 吴旋  白东清  杨广  宁博  张雪涛  孙立卓  
选取540尾黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),连续投喂含不同水平灵芝多糖(300,600,900,1 200,1 500mg/kg)的配合饲料8周。而后采用Percoll密度梯度离心等技术,对黄颡鱼头肾巨噬细胞与外周血白细胞进行分离纯化,使用NBT还原法、Griesse试剂显色法与MTT法测定头肾巨噬细胞呼吸爆发活性与外周血白细胞的增殖能力,探讨灵芝多糖对黄颡鱼免疫细胞活性的影响。结果表明,灵芝多糖各水平组均能显著提高黄颡鱼头肾巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和外周血白细胞的增殖能力(P
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 陈岳文  康信聪  熊兴耀  刘东波  
为验证Lacc1基因的功能,揭示灵芝漆酶基因及其启动子结构与其转录表达的内在关系,预测了Lacc1的氨基酸序列结构及灵芝漆酶注释基因Lacc1的上游启动子区域,研究已测序的菌株——灵芝P9在Cu2+诱导条件下漆酶基因Lacc1的表达情况。Protein Blast分析结果表明,Lacc1含有3个铜氧化酶(Cu-oxidase)保守结构域,与Polyporus ciliatus漆酶lcc3-3的相似性最高,为71%,并具有高度保守的漆酶特征序列L1-L4;亚细胞位置和信号肽预测结果表明,Lacc1含有信号肽,且为胞外分泌酶;Lacc1基因上游启动子区域包含1个TATAbox、3个金属响应元件(M...
[期刊] 水产学报  [作者] 曹丽萍  丁炜东  张柳  Galina Jeney  徐跑  殷国俊  
为了探讨香菇和黄芪多糖对鲤免疫细胞的免疫活性作用,采用Percoll密度离心等技术,对鲤的头肾巨噬细胞和外周血白细胞进行分离纯化,并离体培养,从细胞和分子水平上研究了香菇和黄芪多糖的免疫调节作用。巨噬细胞和外周血白细胞分别体外暴露不同浓度的黄芪多糖和香菇多糖后,采用MTT法测定它们对鲤外周血白细胞增殖的影响;NBT还原法和Griess试剂显色法测定对头肾巨噬细胞的呼吸爆发的影响;实时定量PCR法测定头肾巨噬细胞细胞因子IL-1β诱导表达的影响。结果显示,黄芪和香菇多糖作用头肾巨噬细胞24h后,香菇多糖浓度为1,10,100μg·mL-1时能显著诱导巨噬细胞的氧爆发活性,黄芪多糖则没有显著的诱导...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 李恒  罗齐军  卢向阳  曾富华  
采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15 nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后胞内蓄积了大量脂质,高剂量(15 nmol/L)ODP–Ia能够显著减少胞内脂质、胆固醇蓄积,并增强ABCA1、ABCG1、SR–BI m RNA及蛋白表达(与单独ox–LDL处理组比较,P<0.05),但效果均次于阳性对照依折麦布组(P
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 倪德江  陈玉琼  余志  彼得R.埃利斯  克里斯托弗P.科尔佩  
利用水提法制备绿茶、乌龙茶、红茶、青砖茶和普洱茶提取物,研究5种提取物对体外小肠Caco-2细胞吸收葡萄糖的抑制效果。结果表明:在相同质量浓度(0.5mg/mL)条件下,5种茶叶提取物均能抑制Caco-2细胞吸收葡萄糖的活性,抑制能力大小依次为绿茶!乌龙茶!红茶!青砖茶!普洱茶;与对照相比,绿茶、乌龙茶、红茶和青砖茶提取物极显著抑制葡萄糖的吸收,但普洱茶提取物的抑制效果并未达到显著水平(P>0.05)。茶叶提取物抑制小肠Caco-2细胞吸收葡萄糖的能力可能与加工过程中儿茶素的转化有关。
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