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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
何新华 郑青松 刘玲 刘兆普 张静 魏微 汪辉
以干菊芋块茎粗粉为原料,对菊芋菊粉纯化中脱蛋白和脱色工艺条件进行优化。结果表明,菊粉纯化的最佳工艺条件为:灭多酚氧化酶(PPO)活性的最佳温度为90℃,时间10 m in;石灰乳脱蛋白最佳pH值为11~12,蛋白去除率约为83.61%;磷酸回调最佳pH值为6~6.5,蛋白去除率为12.53%。菊粉提取液最佳脱色条件:采用D311弱碱阴离子树脂,脱色温度45℃,色素浓度0.796 Abs,洗脱速度为4 B.h-1,树脂对色素的吸附量可达15.58ΔA.mL-1,菊粉平均损失率为3.08%。
关键词：
菊芋 菊粉 灭酶活 除蛋白 脱色
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吴洪新 呼天明 张存莉 贾红勋 鲁友均
以普那菊苣为原料,对菊苣菊粉提取、纯化工艺进行了优化研究。结果表明,菊粉提取的最佳工艺条件为:原料为粉状,温度85℃,固液比为1∶30,提取时间为60 m in,菊粉的提取率达58.58%。纯化时石灰乳脱蛋白的最佳处理温度为70~80℃。提取液最佳脱色工艺条件为:脱色温度70℃,脱色时间50 m in,活性碳用量为20 g/L,脱色率为69.13%,菊粉损失率为7.93%。
关键词：
菊苣 菊粉 提取工艺 纯化工艺
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
倪晓颖 李秉超 林荣峰 李丽梅
以黑曲霉固体发酵法产生的粗菊粉酶为试材,采用葡聚糖凝胶层析法和DEAE纤维素52柱层析法对经过硫酸铵沉淀后的粗酶进行了分离纯化,得到接近电泳纯的高纯度菊粉酶。结果表明:以菊粉为底物研究酶活时,DEAE-纤维素52离子交换层析得到较好的分离效果,主要活力峰比活力12.64U·mg-1提纯了6.37倍;以蔗糖为底物时,SephadexG100分离效果好,比活力35.57U·mg-1提纯了3.78倍。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
宗绪岩 刘长江 刘玲 李丽 许金光
为了优化啤酒糟蛋白水解液脱色工艺,并使其得到更好的应用,考察了不同的脱色剂对脱色效果的影响,并通过正交试验优化了活性炭脱色条件。结果表明:颗粒状活性炭脱色效果较优;在活性炭脱色试验中脱色率和肽氮类物质的损失率的变化与各影响因素都表现为正相关;各因素对于脱色率的影响顺序为:添加量>脱色温度>脱色时间;对于肽氮类物质损失率的影响顺序为:添加量>脱色时间>脱色温度。较优的脱色条件为添加4%的颗粒状活性炭50℃下脱色2.5h,脱色率达到36.72%,肽氮类物质损失率为20.96%。
关键词：
活性炭 脱色率 损失率 影响
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
卢磊 赵敏 赵丽艳 梁书诚 李泰仑 杜美惠
为了研究血红密孔菌漆酶重组表达后的酶学性质和染料脱色效果,利用超滤、阴离子交换层析和凝胶层析从毕赤酵母发酵液中纯化出重组漆酶。结果表明:重组漆酶分子质量为62.8kD,氧化底物2,2′-连氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)、丁香醛连氮和2,6-二甲氧基苯酚的最适pH分别为2.2、4.2和4.0,动力学常数Km分别为20.73、48.48和1252.39μmol/L;该漆酶在有机溶剂中的活性稳定性:甲醇>乙醇>丙酮>二甲基亚砜;在铜离子和铝离子中酶活比较稳定,汞离子对酶活有较强的抑制作用;纯化的重组漆酶在无介体时可有效脱色RB亮蓝,但对靛红和结晶紫的脱色较为缓慢;当添加介体ABTS...
关键词：
漆酶 酶学性质 介体 染料脱色
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
夏凯 周燮
以脱落酸（ＡＢＡ）为配基，分别通过其Ｃ１位和Ｃ４′位偶联的亲和层析柱对玉米根尖中的膜ＡＢＡ结合蛋白（ＡＢＢＰ）进行了纯化，其中，用Ｃ１偶联的亲和柱具有较高的纯化效率；对比了以尿素和硫氰化钾（ＫＳＣＮ）为解吸附剂的洗脱效果，发现使用后者（３ｍｏｌ／Ｌ）能得到纯净的ＡＢＢＰ；放射性配基结合分析（ＲＬ－ＢＡ）结果表明，经过亲和纯化后的ＡＢＢＰ具有受体的基本特性——专一结合ＡＢＡ的能力。以Ｃ１－ＡＢＢＰ和Ｃ４′－ＡＢＢＰ为免疫原，制备了２种多克隆抗体。
关键词：
脱落酸 结合蛋白 受体 亲和层析 抗体
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
包怡红 赵楠
以脱脂松仁粕为原料，采用ＯｓｂＯｒｎｅ法提取松仁粕中的球蛋白，设ｎａＣｌ质量分数（０．５％、１．０％、１．５％、２．０％、２．５％、３．０％）、料（质量，ｇ）液（体积，ｍ ｌ）比（１∶１０、１∶１５、１∶２０、１∶２５、１∶３０、１∶３５）、提取时间（３０、６０、９０、１２０、１５０、１８０ ｍｉｎ）和提取温度（４０、４５、５０、５５、６０、６５℃）４个单因素试验，再用响应面法优化松仁粕中球蛋白的提取工艺，并对其分子量进行分析。结果表明：当ｎａＣｌ质量分数为２．５％，料液比为１∶１５，提取时间为１５０ ｍｉｎ，提取温度为５６℃时，松仁粕中球蛋白的提取率较高，为１５．３２％；ｓＤｓ–Ｐａｇｅ分析．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
吴立根 王岸娜 连东军
针对我国农村甘薯淀粉加工中存在颜色不白的实际问题 ,进行了甘薯淀粉脱色技术研究 ,通过单因子试验选择出效果较好的YW试剂和BK试剂 ,并用其作为优化试验材料。通过正交试验得出最佳配方为YW试剂 2 5g/kg ,BK试剂 2 0 g/kg ,催化剂 0 0 5g/kg ,温度 30℃ ,pH值为 8。其脱色的淀粉白度可达 84 4,比对照提高 14 2 ,且不破坏淀粉的加工性能
关键词：
甘薯 淀粉 脱色 白度
[期刊] 中国水产科学
[作者]
祝雯 林志铿 吴祖建 林奇英 谢联辉
采用硫酸铵分级沉淀 ,BlueSepharose 6FastFlow、SPSepharoseFastFlow和HPLC柱层析 ,从河蚬 (Corbiculafluminea)中分离纯化蛋白CFp a。经SDS PAGE测定 ,其分子量为 2 4 .0kD ;经苯酚硫酸法测定 ,其含糖量为 2 .3%。 10～ 16 0 μg/mLCFp a分别处理肝癌细胞BEL74 0 4 72h后 ,采用四氮唑还原法 (MTT)检测癌细胞的生长活性 ,结果显示 ,CFp a对BEL74 0 4癌细胞生长的抑制率在 2 4 .6 %～ 79.2 %。采用质量浓度为 2 0 μg/mL和 4 0 μg/mL的C...
关键词：
河蚬 蛋白纯化 癌细胞 诱导凋亡
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
赵燕英 陈正望 陆婕
为研究大炎肽影响胰腺β细胞的机制,将大炎肽偶联到CNBr活化的Sepharose 4B亲和层析介质上,利用亲和纯化的方法垂钓其在胰腺组织中的相互作用蛋白,并对纯化蛋白进行胰蛋白酶水解,测定水解片段的分子质量和其中2个片段的氨基酸序列,在MASCOT数据库中检索,鉴定此蛋白为胱硫醚β-合成酶,结果提示大炎肽可能通过结合胱硫醚β-合成酶,调节其活性,造成同型半胱氨酸积累。
[期刊] 水产学报
[作者]
王海英 薛长湖 孙谧 王跃军 王清印
以大菱鲆肠道为材料,对大菱鲆消化生理中起重要作用的肠蛋白酶的分离纯化条件和理化性质进行了研究。经Tris-HCl缓冲液抽提,硫酸铵分级分离,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离纯化,获得大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ的电泳纯制品,并对该酶的性质进行了研究。结果显示:纯酶的分子量约为58kD。纯酶最适反应pH为9.0,最适反应温度50℃;pH稳定范围6.0~11.0,30℃以下酶活性稳定;Mn2+可激活大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ,Cu2+、Zn2+、Ag+、Fe3+则对酶活性有抑制作用;巯基蛋白酶抑制剂显著抑制大菱鲆肠蛋白酶Ⅰ的活性,金属蛋白酶抑制剂...
关键词：
大菱鲆 肠蛋白酶 纯化 性质
[期刊] 水产学报
[作者]
宋永相 孙谧 王海英 王跃军 李伟 袁翠
以富含胶原的海产品下脚料为原料,用海洋碱性蛋白酶894水解,得到具有清除羟自由基活性的酶解液。采用一次正交回归实验设计及结果分析,建立回归方程,研究了活性炭、β-环糊精、酵母三者用量及温度、pH和作用时间6因子及其可能存在交互作用的变化关系对该酶解液综合脱色脱腥效果的影响。结果表明,在给定取值范围内,pH对综合脱色脱腥效果影响高度显著,酵母添加量、pH与酵母添加量的交互作用影响显著,其它因子及其可能的交互作用影响不显著,得最佳工艺为:温度37℃、pH4.0、活性炭0.8%、β-环糊精和酵母分别为0.1%,作用30min。此时,综合脱色脱腥效果值为90.90,蛋白回收率为98.02%,羟自由基清...
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
李福后 黄岳磊 刘小芳 冷凯良 王灵昭 于源 苗钧魁
建立南极磷虾蛋白肽纳滤脱盐工艺。以脱盐率和蛋白损失率为评价指标，通过单因素实验和正交实验对影响南极磷虾蛋白肽纳滤脱盐效果的主要因素(蛋白肽浓度、压力、循环次数)进行优化。结果显示，采用纳滤技术对南极磷虾蛋白肽进行脱盐处理的最佳工艺条件：蛋白肽浓度3.0%、纳滤压力1.2 MPa、循环次数3次，在该条件下南极磷虾蛋白肽的脱盐率达到(86.35±2.11)%、蛋白损失率为(9.10±0.35)%。采用优化工艺获得的南极磷虾蛋白肽的盐分含量为(1.14±0.12)%，蛋白质含量为(92.73±2.29)%，相对分子质量主要分布于3000 Da以下，氨基酸组成合理且符合联合国粮农组织/世界卫生组织规定的标准。研究将为高品质南极磷虾蛋白肽产品开发提供技术支撑。
关键词：
南极磷虾 蛋白肽 正交实验 纳滤 脱盐
[期刊] 林业科学
[作者]
祝美云 林顺顺 梁丽松 王贵禧
以不同糯性等级的6个板栗品种为试材,比较不同糯性品种板栗粉的糊化特性差异以及脱脂、脱蛋白处理对不同糯性品种板栗粉糊化特性的影响,进而分析蛋白质、脂肪与板栗糯性的关系。结果表明:1)高糯性品种板栗粉糊化黏度显著低于低糯性品种(P<0.05)。2)脱脂后,板栗粉RVA谱特征值改变不明显;脱蛋白后,板栗粉糊化黏度显著升高,糊化温度降低。3)蛋白质含量与峰值黏度、谷值黏度、崩解值、最终黏度和回复值显著负相关(P<0.05),脂肪含量与板栗粉糊化特征参数的相关性不明显。
关键词：
脱脂板栗粉 脱蛋白板栗粉 RVA特征值
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张磊 唐永凯 李红霞 徐逾鑫 李迎宾 俞菊华
为获得可溶的鲤鱼IL–17N重组蛋白,构建原核重组表达质粒GST–17N、SUMO–GST–17N和MBP–17N,确定IL–17N的最适促溶标签,并优化其诱导表达条件(诱导剂异丙基–β–D–硫代半乳糖苷(IPTG)的浓度、诱导时间和诱导温度)。结果:成功构建了鲤鱼IL–17N原核重组表达载体GST–17N、SUMO–GST–17N和MBP–17N;融合标签MBP、SUMO–GST和GST的促溶效果依次降低,SUMO–GST–17N、MBP–17N上清蛋白占总蛋白比例分别为47.4%、87.0%;MBP–17N的最佳表达条件为0.5 mmol/L IPTG,25℃诱导8～12 h;经过镍柱纯化,获得可溶MBP–17N蛋白,每克总菌约获得0.09 mg MBP–17N蛋白。
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