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[期刊] 西南农业学报
[作者]
侯思名 刘凌云 殷旭东 岑晓江 王波 程在全
水稻的生产一直受到生物和非生物逆境等因素的影响,容易造成遗传基础单一,迫切需要拓宽现有栽培稻品种的遗传基础,引进不同来源的抗性和耐性基因。而野生稻是一个重要的有利基因库,充分利用野生稻的有利基因可拓宽现有栽培稻品种的遗传基础,有利于选育优良品种应用于生产或创造出特殊中间材料。但对于野生稻的利用目前仍存在许多困难,通过常规杂交途径一般难以实现。为了拓宽栽培稻的遗传基础,利用云南药用野生稻有利基因,通过构建BIBAC文库的策略挖掘云南药用野生稻有利基因用于栽培稻的改良。而高质量的载体制备在文库的构建中起非常重要的作用,是文库构建的一个关键因素。本研究对高质量BIBAC载体制备中的关键技术如提取、纯...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
侯思名 张薇 翟书华 岑晓江 黄兴奇 程在全
云南药用野生稻具有许多优良性状和有利基因,其CC基因组的优良基因很难通过有性杂交转移到栽培稻(AA基因组)上,但可以通过双元细菌人工染色体(BIBAC)以大片段的形式转化到栽培稻中。利用BIBAC2载体构建了云南药用野生稻基因组DNA文库,该文库包含53 760个克隆,平均插入片段76 kb,保存在140块384孔板中,其库容相当于药用野生稻基因组的5.86倍。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
蓝伟侦 何光存 吴士筠 覃瑞
目的研究中高度重复序列在稻属不同物种基因组进化中的作用。方法用栽培稻C0t-1DNA和基因组DNA(gDNA)作为探针,分别对栽培稻、药用野生稻和疣粒野生稻进行荧光原位杂交(FISH)和比较基因组杂交(CGH)。结果C0t-1DNA覆盖栽培稻、药用野生稻和疣粒野生稻基因组比例(%)和大小(Mb)分别为47.10±0.16,38.61±0.13,44.38±0.13和212.33±1.21,269.42±0.89以及532.56±1.68。栽培稻gDNA在药用野生稻和疣粒野生稻基因组中的覆盖率约为91.0%和93.6%,含量分别约为634Mb和1123Mb,各有365Mb和591Mb不属于源自栽...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘蕊 张欢欢 陈志雄 SHAHID Muhammad Qasim 傅雪琳 刘耀光 刘向东 卢永根
【目的】利用分子生物学技术建立一种可有效转移药用野生稻有利基因的方法,为进一步大量开展利用药用野生稻有利基因提供技术基础。【方法】以植物抗性相关转录因子AP2/EREBP和bZIP家族基因保守序列为探针,采用同位素α-32P对探针进行标记,通过Southern杂交对药用野生稻TAC文库进行第一轮筛选;所获得阳性克隆用地高辛标记的探针进行第二轮筛选;最后利用PCR方法对第二轮筛选所获得的阳性克隆进行验证。通过农杆菌介导法将阳性克隆转入栽培稻品种日本晴,利用TAC载体插入片段两端的抗性标记Hpt和SacB,通过PCR扩增检测和和Southern杂交对转化植株进行鉴定。采用PEG胁迫法和生理指标变化...
[期刊] 华北农学报
[作者]
李培纲 李红梅 张帅 李劲松 陈志雄 刘向东
为了研究ADF基因对药用野生稻非生物胁迫的影响,利用药用野生稻干旱胁迫转录组数据分析的基础,通过PCR技术克隆OoADF1基因,序列分析结果表明,OoADF1的开放阅读框长度为453 bp,无内含子,编码150个氨基酸残基,具有典型的ADF结构域。qRT-PCR技术分析表明,OoADF1在四叶期的叶片、叶鞘和根,以及抽穗期的叶片、叶鞘、茎和幼穗等7个组织中均表达,四叶期根部表达量最高,抽穗期叶鞘表达量最高。干旱和高盐胁迫后,OoADF1表达量分别上调了17.9,40.0倍。将OoADF1完整的编码序列融合
关键词：
药用野生稻 水稻 抗逆性 ADF
[期刊] 西南农业学报
[作者]
钟代彬 罗利军 郭龙彪 应存山
以高产优质的栽培稻（Ｏ．Ｓａｔｉｖａ）中８６—４４为母本，高抗褐飞虱的广西药用野生稻（Ｏ．ｏｆｉｃｉｎａｌｉｓ）为父本，远缘杂交结合胚拯救，获得高抗褐飞虱的杂种植株Ｆ１。通过和栽培稻中８６—４４回交，获得高抗褐飞虱的回交一代（ＢＣ１Ｆ１）及回交二代（ＢＣ２Ｆ１）；经自交获得ＢＣ２Ｆ２，部分株系农艺性状优良，结实正常，高抗褐飞虱。研究表明，远缘杂交结合胚拯救，通过两次回交并结合胚拯救转移药用野生稻的抗褐飞虱基因是一条可行的途径
关键词：
栽培稻,药用野生稻,抗褐飞虱,基因转移
[期刊] 华北农学报
[作者]
何平 疏冕 蔡晓丹 傅雪琳
为了探索栽培稻与药用野生稻种间杂种体内异源基因组重组引起的DNA甲基化变异规律,及其生物学效应,利用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术对辽粳944、药用野生稻及其杂种F_1不同发育时期的叶片和小穗基因组DNA甲基化水平和模式的遗传变异特点进行了分析。结果表明,辽粳944、药用野生稻及其杂种F_1的叶片和小穗DNA的甲基化水平表现出相同的变化趋势,即随着生长发育的进行,DNA甲基化水平呈下降趋势,各组织的全甲基化率均显著高于半甲基化率(P=0.000);杂种在分蘖期、减数分裂期及开花期叶片DNA平均总甲基
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
宋小玲 强胜 刘琳莉 徐言宏 刘友良
采用生殖生物学方法研究了药用野生稻和转bar基因水稻花粉杂交的基因漂移。结果表明 ,供试水稻花粉在药用野生稻柱头上的萌发生长与药用野生稻自花授粉花粉的萌发生长有一定差异 ,表现在穿过柱头的花粉粒百分率及内容物释放和正在凝缩、释放的花粉粒百分率较少。虽然转基因水稻花粉能在药用野生稻柱头上正常萌发生长 ,并能释放内容物 ,但杂交后结实率为 0 ,表明转基因水稻和药用野生稻杂交不亲和。他们的不亲和性不是在花粉的萌发和穿过柱头这一阶段 ,具体原因有待进一步研究。在本实验条件下转基因水稻和药用野生稻没有发生成功的基因交流。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈绳亮 罗保君 常国辉 李天宪 张忠 赵林
应用限制性内切酶图谱分析法，估算茶毛虫核型多角体病毒（ＥｐＮＰＶ） 基因组大小为１３１．０９ ｋｂ；通过随机克隆，将ＥｐＮＰＶ 基因组８ 条ＢａｍＨ Ⅰ酶切片段中的６ 条、１３ 条Ｐｓｔ Ⅰ酶切片段中的７ 条、２６ 条ＥｃｏＲ Ⅰ酶切片段中的７ 条、２１ 条Ｈｉｎｄ Ⅲ酶切片段中的７ 条、１４ 条Ｘｂａ Ⅰ酶切片段中的９ 条分别克隆至载体ＰＴＺ１９Ｒ，构建了ＥｐＮＰＶ基因组的部分质粒文库。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
罗晓青 吴明开 查兰松 敖茂宏 卢加举 王晓敏
为更好地保护与开发利用贵州珍贵药用植物野生金线莲资源,通过实地踏勘与查阅资料相结合,对贵州药用金线莲野生资源进行了调查、生境观察分析、标本采集、活体保存、生物学与生态学特性观察记录以及分类鉴定等研究工作。结果表明:贵州药用金线莲主要有2种,金线兰(Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl.)与台湾银线兰(Anoectochilus formosanus Hayata),主要种类是金线兰,台湾银线兰(Anoectochilus formosanus Hayata)为贵州兰科植物地理分布新纪录种。金线兰与台湾银线兰的野生资源量均稀少,处于濒危状态。
关键词：
金线莲 资源调查 濒危植物
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
费日雯 樊富伟 孙天祎 辛如洁 宋文慧 关士鑫 孙晓梅
【目的】芍药具有极佳的观赏价值，但其种子的双重休眠难以解除，严重阻碍芍药的育种进程。本研究利用gateway技术构建芍药种子休眠解除关键时期的酵母杂交cDNA文库，可用于筛选调控芍药种子休眠解除相关基因的转录因子及互作蛋白。本文库的构建可为丰富芍药种子休眠调控研究提供科学支撑，能为芍药栽培育种和野生资源保护及利用奠定分子理论基础。【方法】本研究以休眠解除过程中5个关键时期的芍药种子为试验材料，进行总RNA的提取和m RNA的分离，使用gateway方法构建cDNA初级文库，再通过LR重组，将初级文库重组到pGADT7-DEST次级文库载体上，构建出次级文库，最后经过酵母转化试验，将次级文库质粒转化到酵母Y187感受态细胞中，构建出芍药种子休眠解除过程的酵母文库。【结果】经鉴定，cDNA初级文库库容量为1.28×107 CFU，平均插入片段长度在1 000 bp以上，重组率为100%;cDNA次级文库库容量为1.12×107 CFU，平均插入片段长度在1 000 bp以上，重组率为100%；酵母文库滴度为7.0×107 CFU/mL，平均插入片段长度在1 000 bp以上，重组率为96%。23个阳性克隆测序结果经NCBI比对后，按照功能将20个已知蛋白序列划分为8类，其中7个序列已被报道参与种子的休眠与萌发。【结论】芍药种子休眠解除过程的酵母杂交cDNA文库构建的质量较高，具有较完整的基因信息，符合酵母文库筛选试验所需的标准，为构建芍药种子休眠解除过程的分子调控网络提供基础。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
方哲 周如军 傅俊范 王帅
采用生长速率法和孢子萌发法,测试了64种药用植物提取液对人参锈腐病菌(Cylindrocarpoh dereruetans)、人参黑斑病菌(Alternaria panax)和五味子茎基腐主要致病菌(Fusarium oxysporum)的离体抑菌活性。结果表明:在药用植物材料提取液浓度为5mg.mL-1时,对供试菌种菌丝生长的抑制作用均达到60%以上的药用植物样品有SP-1、SP-25及SP-48,其中SP-1、SP-48对菌丝生长有明显抑制作用,抑菌率为100%,对孢子萌发抑制率也为100%。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘耘 熊家军 杨利国
Gateway克隆技术现已广泛用于cDNA文库构建。然而,用常规DNA测序程序对Gateway cDNA进行测序时,反向重复的att序列易形成发夹结构,导致测序质量较差,且测得的序列较短,成为Gateway克隆技术应用的限制因素。本研究报道了1种Gateway cDNA克隆高温变性测序方法,即在Gateway cDNA测序PCR反应之前,先将DNA在98℃预变性5 min,可有效防止测序峰值的快速下降,极显著地增加Gateway cDNA克隆测序长度(质量Q≥20的序列平均长度从528 bp提高到816 bp)。该方法在常规DNA测序程序的基础上仅新增了5 min的高温预变性,不增加任何实验成...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李全义 王金生 方中达
为使外源基因能稳定地存在于水稻细胞中,吴瑞教授(美国,康乃尔大学)曾提出,利用水稻的组蛋白基因构建载体质粒,导入水稻细胞后,借助组蛋白基因的同源重组将外源基因整合到核基因组中(私人通汛),为此,作者利用水稻组蛋白H_3基因构建了同源重组型载体质粒pNAU100。首先选用nos/nptⅡ基因作为报告基因,以指示外源基因是否重组到水稻核基因组中
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