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[期刊] 中国农业科学
[作者]
马德源 战伟龑 杨洪兵 衣艳君
【目的】确定荞麦(Fagopyrum esculentum Moench)的主要拒Na+部位、质子泵和Na+/H+逆向转运活性与其拒Na+特性的关系。【方法】以耐盐荞麦品种川荞1号和盐敏感荞麦品种TQ-0808为试验材料,采用"压力室"法压取木质部汁液,测定各部位拒Na+能力;采用蔗糖密度梯度离心法分离细胞质膜和液泡膜,测定质子泵和Na+/H+逆向转运活性。【结果】盐敏感品种的主要拒Na+部位在根部,耐盐品种的主要拒Na+部位在根部和茎基部,耐盐品种整体拒Na+能力明显大于盐敏感品种;相同盐浓度处理下,耐盐品种质子泵和Na+/H+逆向转运活性明显大于盐敏感品种,说明耐盐品种主要拒Na+部位细胞...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王旭达 丰明 张高华 王鹤 李怀梅 李树英
为提高转基因植物的耐盐性,本研究利用农杆菌介导的方法将獐茅液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白基因AlNHX组成型表达在日本晴粳稻中。PCR鉴定结果表明,AlNHX基因已经整合到日本晴粳稻中,并在转录水平上表达。转AlNHX基因水稻的耐盐性明显提高。用NaCl经5d培养处理后,转基因水稻可以在含有0～200mmol/L NaCl的MS培养基中生长,而野生型水稻无法在含盐量超过150mmol/L NaCl的MS培养基中生长。
[期刊] 林业科学
[作者]
边晨凯 龙定沛 刘雪琴 魏从进 龚加红 赵爱春
【目的】研究川桑液泡膜型Ｎａ＋／Ｈ＋逆向转运蛋白（ＮＨＸ）基因的功能，探究桑树耐盐机制，为植物抗逆基因工程筛选提供优良的候选基因。【方法】以川桑基因组数据库为基础，基于同源基因序列的保守性，以川桑叶片ｃＤＮａ为模板克隆川桑液泡膜型ＮＨＸ基因；利用生物学软件和在线公共平台，分析所得基因编码的蛋白质序列及功能结构域，并构建系统进化树，分析与其他物种的亲缘关系。采用荧光定量ＰｃＲ方法研究在Ｎａｃｌ胁迫条件下不同时间段‘湖桑３２号’根、茎、叶等不同组织中桑树ＮＨＸ１表达量的变化情况；通过构建超量表达载体，将其转化到拟南芥中，分析转基因拟南芥在Ｎａ ｃｌ胁迫环境中的种子发芽数，根长、侧根生长情况和幼苗成．．．
[期刊] 林业科学
[作者]
边晨凯 龙定沛 刘雪琴 魏从进 龚加红 赵爱春
【目的】研究川桑液泡膜型Na+/H+逆向转运蛋白(NHX)基因的功能,探究桑树耐盐机制,为植物抗逆基因工程筛选提供优良的候选基因。【方法】以川桑基因组数据库为基础,基于同源基因序列的保守性,以川桑叶片cDNA为模板克隆川桑液泡膜型NHX基因;利用生物学软件和在线公共平台,分析所得基因编码的蛋白质序列及功能结构域,并构建系统进化树,分析与其他物种的亲缘关系。采用荧光定量PCR方法研究在NaCl胁迫条件下不同时间段‘湖桑32号’根、茎、叶等不同组织中桑树NHX1表达量的变化情况;通过构建超量表达载体,将其转化到拟南芥中,分析转基因拟南芥在Na Cl胁迫环境中的种子发芽数,根长、侧根生长情况和幼苗成...
[期刊] 华北农学报
[作者]
党振华 郑琳琳 冯智 王迎春
长叶红砂为内蒙古东阿拉善-西鄂尔多斯地区特有珍稀泌盐,强旱生小灌木,对盐渍荒漠环境具有极强适应性。利用RT-PCR和RACE技术从该植物中分离出质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(RtSOS1),该cDNA全长为3 829bp,开放阅读框为3 438 bp,编码一个含1 145个氨基酸的蛋白质,推测分子量为126.76 kDa。氨基酸序列的生物信息学分析推测,该蛋白N端含有11个跨膜结构域,C端为一个长约700个氨基酸的亲水性尾,具有磷酸化和自我抑制结构域。同源性比对和系统发育分析证实,RtSOS1与其他植物的质膜Na+/H+逆向转运蛋白亲缘关系较近。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
钱骅 刘友良
通过检测喹吖咽荧光猝灭和恢复，测定了盐胁迫下不同耐盐性的大麦品种根系液泡膜微囊质子泵活性（ΔＰＨ）和Ｎａ＋／Ｈ＋逆向运输活性。液泡膜Ｈ＋－ＡＴＰａｓｅ在泵运质子中起主导作用；１００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ诱导大麦根系液泡膜Ｎａ＋／Ｈ＋逆向运输活性，且耐盐性强的品种高于耐盐性弱的品种；耐盐性不同的大麦品种Ｋ＋、Ｎａ＋在植物体内区域化分配很大程度上取决于根系液泡膜Ｎａ＋／Ｈ＋逆向运输活性。
[期刊] 林业科学
[作者]
唐欣 王瑞辉 杨秀艳 朱建峰 刘正祥 倪建伟 张华新
植物液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白具有将胞质中过多的Na+区隔化在液泡内,从而减轻过量Na+对细胞质的伤害,同时维持细胞的渗透势,利于植物抵御盐胁迫。以2年生唐古特白刺嫩叶为试材,采用RT-PCR和RACE方法从叶片中获得1个NHX基因cDNA全长,命名为NtNHX1,GenBank登录号为KF751928。序列分析结果表明:NtNHX1全长2 134 bp,包含281 bp的5’非编码区、218 bp的3’非编码区和29 bp的poly(A)尾巴。该cDNA编码1个544个氨基酸的多肽,等电点为8.14,推测分子质量为59.9 kDa。通过与其他物种的NHX1氨基酸序列比对,NtNHX1基因...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈文利 徐朗莱 沈文飚 刘友良
以鉴４（Ｊ４，耐盐性较强）和科品７号（Ｋｐ７，耐盐性较弱）大麦叶片为材料，研究了在不同浓度盐处理下Ｈ２Ｏ２累积和Ｈ２Ｏ２清除酶的活性变化。结果表明，在３００ｍｍｏｌ／ＬＮａＣｌ处理７天期间，科品的Ｈ２Ｏ２累积量大于鉴４；两品种超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）维持较高活性，鉴４的过氧化氢酶（ＣＡＴ）活性呈上升趋势，科品的却下降；鉴４清除Ｈ２Ｏ２能力大于科品，其中ＣＡＴ起关键作用。用５ｍｍｏｌ／ＬＨ２Ｏ２或０．５ｍｍｏｌ／Ｌ甘露醇处理盐胁迫中的大麦，能缓解盐对科品７号的胁迫作用。
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