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[期刊] 中国水产科学
[作者]
潘厚军 吴淑勤 李宁求 石存斌 李凯彬 巩华 陶家发 常藕琴
从广东省某市池塘采集商品规格(体重2 0～2 5kg)的草鱼(Ctenoharyngodonidellus),利用加有头孢哌酮的麦康凯琼脂培养基,对其肠道中细菌进行选择性分离与鉴定。结果显示,12尾草鱼的肠道中,5尾可分离到具有以下特征的细菌:两端生鞭毛,菌体弯曲似海鸥状,革兰氏染色阴性,过氧化氢酶、氧化酶、尿酶和精氨酸双水解酶阳性,还原硝酸盐,不发酵、氧化或同化葡萄糖、甘露醇等15种常见的糖醇类,细菌形态、生化特性与报道的香港海鸥型菌相似,阳性率为41 7%。但在肌肉中未分离到此菌。进行分离细菌的16SrRNA基因序列分析,与GenBank中登录的4株香港海鸥型菌序列的同源性为99 7%～9...
关键词：
香港海鸥型菌 草鱼 选择分离 鉴定
[期刊] 淡水渔业
[作者]
贺国龙 刘立鹤 张恒
从100 g左右的健康草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道中分离出3株疑似芽孢杆菌(Bacillus)菌株(G1、G2、G3),并通过对其进行生理生化特征、16S rDNA全序列和产酶能力的分析,筛选出1株高产酶能力的益生菌株。结果显示:G1、G2和G3菌株与枯草芽孢杆菌在16S rDNA序列相似性≥99%的水平上聚为同一分支,结合形态观察和生理生化特征,最终鉴定G1、G2和G3菌株均为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);以水解圈直径/菌落直径比值评定了G1、G2和G3菌株的产纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶的能力,其中G1菌株产纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶能力(比...
[期刊] 水产学报
[作者]
资英娟 秦真东 詹凡玢 谢昊堃 张瀚云 黎烽 李滨 赵皓翰 谢远崧 赵丽娟 林蠡
为研制可降解污染物的高效微生物制剂，本研究从污水中分离到多株可高效降解化学耗氧量（COD）的菌株。通过16S rDNA测序及生理生化分析，鉴定出其中一株为枯草芽孢杆菌，命名为Bacillus subtilis H2。对其进行进化树构建，发现该菌株与B. subtilis strain SCUT09的同源性高达98.8%。细菌最适生长条件探究发现，该菌株的最适生长条件：温度为42℃、pH值为6.5、盐度为1。耐受性实验发现，该菌具有较强的盐度代谢能力和温度及酸碱度胁迫耐受性，可以适应不同的温度和盐度环境。为了探究该菌在水产养殖中的作用，将该菌株进行灌胃草鱼处理后，再利用嗜水气单胞菌攻毒，H.E染色观察草鱼的肠道组织变化。结果显示，灌胃枯草芽孢杆菌处理后，草鱼肠道的完整性得到显著的保护作用。为了进一步探究该菌株的作用机理，本研究测定了B. subtilis H2的全基因组，结果显示，基因组全长为4 111 243 bp，GC含量为43.46%，编码4 213个基因，其中包含31个核糖体rRNA和87个tRNA基因，编码序列占整个基因组序列的87.67%。比较基因组学分析显示该菌株和B. subtilis 168全基因组共有基因有3 551个。研究表明，本研究分离出的芽孢杆菌在污水处理和水产养殖上具有重要的应用意义。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
冯雪 吴志新 祝东梅 王艳 庞素风 于艳梅 梅小华 陈孝煊
检测了分别从草鱼(Ctenopharyngodon idellus)和银鲫(Carassius auratus gibelio)肠道中分离的180株细菌的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶的产酶能力。结果显示,两种鱼肠道内可分泌胞外消化酶的细菌包括Aero-monas(气单胞菌属,Aer.)、Vibrio(弧菌属,Vib.)、Bacillus(芽孢杆菌属,Bac.)、Pseudomonas(假单胞菌属,Pse.)四个种属的细菌,Aer.在其中占主要优势,45.71%的Aer.可分泌胞外消化酶。草鱼可分泌上述四种胞外消化酶的菌株共有33株,占肠道菌总数的36.67%;银鲫43株,占47.78%。产...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
王魁云 蒋霞云 江小妹 邹曙明
采用以羧甲基纤维素(CMC)为唯一碳源的选择性培养基,通过直接筛选和富集分离纯化再筛选的初筛方法,透明圈法和摇瓶发酵的复筛方法,从团头鲂和草鱼肠道中,筛选到2株具有较高纤维素酶活性的纤维素酶产生菌MA35和MC。16S r DNA/ITS分子鉴定和形态学观察分析表明:来源于团头鲂的真菌MA35鉴定为雪白曲霉(Aspergillus niveus),来源于团头鲂的细菌MA1和来源于草鱼的细菌CI10为同一种细菌MC,鉴定为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)。发酵趋势的研究表明:在发酵过程中,与MC相比,MA35具有更高的胞外和胞内纤维素酶活力。本研究不仅从草鱼肠道内筛选到了纤维素酶产生菌,而且从我国特有的水生生物团头鲂肠道内分离到了一株新的纤维素酶产生菌,为草食性鱼的合理性养殖和鱼类饲料的膳食性配比提供了科学的研究基础。
关键词：
草食性鱼 纤维素酶产生菌 筛选 鉴定
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
姚仕彬 叶元土 蔡春芳 姚林杰 许凡 刘猛 萧培珍 王丽宏
以强化培育后草鱼的肠道粘膜为试验材料,采用不同消化法和离心转速梯度分离肠道粘膜细胞团,分别试验不同培养液与不同CO2浓度组合、胎牛血清浓度及细胞接种浓度时细胞生长效果,并且观察草鱼原代肠道粘膜细胞生长过程,同时采用3种细胞形态观察法、MTT检测法及相关酶活力系统评价细胞培养效果。结果表明:采用机械刮取消化法,分离转速为400 r/min,在使用M199培养液、6%CO2、15%胎牛血清、接种浓度为2×103(个/孔)条件下可批量复制草鱼原代肠道粘膜上皮细胞;细胞增殖过程符合动物原代肠道粘膜上皮细胞生长分化规律,采用荧光倒置显微镜与Giemsa染色法相结合、MTT检测法、AKP酶活力及LDH/M...
关键词：
草鱼 肠道粘膜细胞 分离方法 原代培养
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李玉萍 田晶晶 张凯 夏耘 王广军 郁二蒙 李志斐 龚望宝 谢骏
为探讨皇竹草（Pennisetum sinese Roxb）对草鱼（Ctenopharyngodon idella）脂肪蓄积和肠道菌群组成的影响，配制3组分别含0%（对照组）、10%和20%皇竹草粉的等氮等能纯化饲料（蛋白质水平为33%，脂肪水平为8%），饲喂草鱼稚鱼[（28.51±0.04）g] 8周，每组饲料饲喂3个重复。结果显示，饲料中添加10%和20%皇竹草粉显著降低腹腔脂肪指数（P<0.05），组织切片显微结构显示，相比对照组，皇竹草粉组的草鱼肝脏脂滴数量均明显减少，脂肪细胞大小明显变小。血清中的甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和游离脂肪酸（NEFA）的含量随着皇竹草粉水平的升高呈现下降趋势，其中20%添加水平相比对照组草鱼显著降低（P<0.05）。皇竹草粉组肝脏中的TG、TC和NEFA的含量均显著下降（P<0.05）。肝脏和腹腔脂肪组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ（pparγ）等脂肪生成相关5个基因在摄食皇竹草粉后显著下调（P<0.05），过氧化物酶体增殖物激活受体α（pparα）等4个脂肪分解相关基因在摄食皇竹草粉后显著上调（P<0.05），肝脏组织中法尼酯X受体（fxr）基因在摄食皇竹草粉后显著上调（P<0.05）。肠道菌群宏基因组学结果显示，10%和20%皇竹草粉组草鱼肠道内容物中肠道微生物的Ace、chao1、Shannon和Simpson指数均与照组存在显著差异（P<0.05），表明皇竹草粉提高了草鱼肠道内菌群种类的丰度和多样性。从门分类来看，与脂肪蓄积相关菌群，厚壁菌门（Firmicutes）的比例在皇竹草组中显著降低（P0.05）。综上，以上结果表明，饲料中添加一定量的皇竹草粉能够降低草鱼体脂蓄积，其中肠道菌群的改善可能是这一过程中的重要环节。
关键词：
草鱼 皇竹草 脂肪蓄积 肠道菌群
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李玉萍 田晶晶 张凯 夏耘 王广军 郁二蒙 李志斐 龚望宝 谢骏
为探讨皇竹草(Pennisetum sinese Roxb)对草鱼(Ctenopharyngodon idella)脂肪蓄积和肠道菌群组成的影响，配制3组分别含0(对照组)、10%和20%皇竹草粉的等氮等能纯化饲料(蛋白质水平33%,脂肪水平8%),饲喂草鱼稚鱼[(28.51±0.04)g] 8周，每组饲料饲喂3个重复。结果显示，饲料中添加10%和20%皇竹草粉能显著降低腹腔脂肪指数。相比对照组，皇竹草粉组的草鱼肝脏脂滴数量均明显减少，脂肪细胞大小明显变小。血清中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和游离脂肪酸(NEFA)的含量随着皇竹草粉水平的升高呈下降趋势，其中20%添加水平相比对照组草鱼显著降低。皇竹草粉组肝脏中的TG、TC和NEFA的含量均显著下降。肝脏和腹腔脂肪组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(pparγ)等脂肪生成相关5个基因在摄食皇竹草粉后显著下调，pparα等4个脂肪分解相关基因在摄食皇竹草粉后显著上调，肝脏组织中法尼酯X受体(fxr)基因在摄食皇竹草粉后显著上调。微生物宏基因组学结果显示，10%和20%皇竹草粉组草鱼肠道内容物中肠道微生物的Ace、chao1、Shannon和Simpson指数均与对照组差异显著，表明皇竹草粉提高了草鱼肠道内菌群种类的丰度和多样性。从门分类来看，与脂肪蓄积相关菌群厚壁菌门(Firmicutes)的比例在皇竹草组中显著降低，拟杆菌门(Bacteroidetes)比例呈上升趋势。饲料中添加一定量的皇竹草粉可降低草鱼体脂蓄积，推测肠道菌群的改善是这一过程中的重要环节。
关键词：
草鱼 皇竹草 脂肪蓄积 肠道菌群
[期刊] 水产学报
[作者]
黄垚 秦真东 陈嘉俊 杨敏璇 徐子正 杨友成 黎烽 詹凡玢 李亚男 李清清 林蠡 施斐
为探究抗菌素对草鱼免疫和肠道菌群的影响，本实验以草鱼为研究对象，设置基础饲料（对照组）、基础饲料添加恩诺沙星或氟苯尼考3组饲料，投喂草鱼2周后，通过肠道酶活检测、qRT-PCR和高通量测序技术分析饲料中添加抗菌素对草鱼肠道免疫及肠道菌群多样性影响。分析结果显示，（1）饲料中添加恩诺沙星和氟苯尼考降低了草鱼肠道谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）的含量，提高丙二醛（MDA）的含量，导致草鱼肠道氧化应激。（2）氟苯尼考组中的TNF-α、IL-1β、IL-12、NF-κB-P65、MHC Ⅱ、sIgM等免疫因子和ZO-1、ZO-2、occludin、CLDN-1、JAM3等黏膜相关蛋白的mRNA表达量显著下降，恩诺沙星组的免疫因子TNF-α、IL-1β、IL-12、TLR4、MHC Ⅱ和黏膜相关基因ZO-2、occludin、CLDN-1、JAM3的mRNA表达量显著下降。（3）通过16S rRNA高通量测序来揭示拌食投喂抗菌素对草鱼肠道微生物群落结构的影响，分析结果显示饲料中添加恩诺沙星或氟苯尼考对草鱼肠道α多样性无显著差异，但对β多样性出现显著变化（P < 0.05），表明2种抗菌素对肠道菌群丰富度没有显著影响，但会改变群落多样性。综上所述，本研究结果揭示饲料中添加恩诺沙星和氟苯尼考会导致草鱼肠道氧化应激、调控黏膜免疫应答，并影响肠道菌群的结构与多样性。本研究为草鱼病害防控相关研究及草鱼的绿色健康养殖提供了参考。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
黄平 陈韬 彭宽 黄小西 章怀云 张东裔
通过扫描电子显微镜观察草鱼肠道抗菌肽处理后的大肠杆菌、金色葡萄球菌、嗜水气单胞菌的形态结构的变化.结果显示,经过抗菌肽处理后的细菌形态发生变化,菌体严重变形,表面变得粗糙,出现皱褶,胞膜破裂.对草鱼肠道抗菌肽的理化性质的研究结果显示,草鱼肠道抗菌肽具有很好的热稳定性,耐胰蛋白酶特性.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
苏建明 雷红宇 黄平 肖调义
将新鲜草鱼肠道组织经超声破碎、乙酸浸提后,再经Sephadex G50和Sephadex G25凝胶柱过滤层析,收集各组分,采用药敏纸片法检测各组分的抗菌活性.收集具有抗菌活性的组分,经Tricine SDS-PAGE,考马斯亮蓝染色后分析获得1条较明显的蛋白带,相对分子质量约为6 200.该抗菌肽对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和嗜水气单胞菌均表现出较强的抗菌活性,说明抗菌肽对维持鱼类肠道微生物区系稳定具有重要作用.
关键词：
草鱼 肠道 抗菌肽 抑菌活性
[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴康 胡俊 黄晓声 夏虎 陈亮 李男 张学振
为探讨饲喂蚕豆(Vicia faba)对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道菌群的影响,采用PCR-DGGE技术比较了饲喂蚕豆的草鱼(脆肉鲩组)及饲喂配合饲料的草鱼(普通草鱼组)肠道微生物菌群的异同。结果显示,DGGE图谱上出现了20条明显条带,表明脆肉鲩组及普通草鱼组肠道中均存在大量细菌群落。对这20条条带测序后,获得了其中17条条带的序列,这17条条带中有9条是尚未被培养的细菌。经分析发现,这17条条带分属于变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)及未...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
周文豪 陈孝煊 张冬晓 陈昌福
对草鱼摄食人工配合饲料和紫背浮萍后其肠道内好氧和兼性厌氧细菌的数量和组成进行了研究。将摄食后的草鱼分别于３、６、１２、２４、４８和７２ｈ取样，对其前、中、后肠内的细菌数量和组成进行了分析。结果发现：摄食前，草鱼肠道中的细菌数量为１０５ｃｆｕ／ｇ～１０６ｃｆｕ／ｇ，摄食人工配合饲料和紫背浮萍后，细菌数量呈现先增加（达到１０６ｃｆｕ／ｇ～１０８ｃｆｕ／ｇ）后减少的趋势。人工配合饲料和紫背浮萍中的细菌数量分别为１０４ｃｆｕ／ｇ和１０６ｃｆｕ／ｇ。摄食后，肠道菌群的组成发生变化，其组成与人工配合饲料或紫背浮萍相似。饵料中的菌群在摄食后４８ｈ内可以影响草鱼的肠道中的菌群的数量及组成。
关键词：
草鱼 摄食 肠道菌群
[期刊] 淡水渔业
[作者]
郝耀彤 吴山功 王桂堂 邹红 李文祥
对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)先饲喂人工饲料再饲喂苏丹草,运用PCR-DGGE的方法,比较了食物改变引起的草鱼肠道微生物菌群结构的变化过程。结果显示,饲喂同种饲料的草鱼后肠与前、中肠样品间菌群结构存在显著差异(TH0-F0=-2.268,P<0.05),饲喂不同种食物的相同肠段样品间菌群结构也存在着显著差异(P
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