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[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘品 李超 黄吉芹 吉红
获得高质量的RNA是逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Northern blot以及转录组测序(RNA-Seq)等分子生物学研究的基础,由于草鱼脂肪细胞中油脂含量较高,从中提取高质量RNA存在困难。本研究以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)成熟脂肪细胞为材料,通过增加离心和抽提次数等方式对传统总RNA提取方法进行优化,采用琼脂糖凝胶电泳、核酸定量分析及基因扩增等方法验证所得RNA的完整性、纯度及质量。结果表明,经此方法提取的草鱼成熟脂肪细胞总RNA的A260 nm/A280 nm比值在1.95到2.00之间,28S和18S条带完整,草鱼LPL和β-actin基因扩增条...
[期刊] 水产学报
[作者]
胡亚芹 薛长湖 谢江碧 姜凤英 林洪
在草鱼红、白色肉分离出的微粒体中，同时存在脂肪的酶氧化和非酶氧化两种体系。酶氧化体系需要ＡＴＰ或ＡＤＰ和Ｆｅ３＋、Ｆｅ２＋等因子的参与。高浓度的ＡＤＰ对脂质氧化有抑制作用。Ｆｅ２＋比Ｆｅ３＋的催化作用强。红、白色肉细胞微粒体脂肪氧化最适ｐＨ值在６．０～７．０之间。高铁血红蛋白和肌红蛋白被过氧化氢激活后，能催化非酶氧化。在过氧化氢与血红素摩尔比为１∶１时，催化效果最佳。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
黄陈翠 孙健 吉红 黄小城 边晨晨
为了探究硫辛酸对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)脂肪细胞脂质代谢的影响,分离草鱼腹腔脂肪组织,消化得到脂肪细胞进行体外培养,分别用0、50和200μmol/L硫辛酸孵育细胞6 h,收取细胞和培养基样品后检测细胞甘油三酯(TG)含量、甘油和非酯化脂肪酸(NEFA)释放量及脂代谢相关基因表达。结果显示:50和200μmol/L硫辛酸处理显著降低草鱼脂肪细胞TG含量,200μmol/L硫辛酸显著增加细胞甘油和NEFA的释放量。200μmol/L硫辛酸组脂肪细胞脂肪分解相关基因(HSL、PPARα、CPT1、CD36)mRNA表达显著高于对照组,且ACC和PPARγ的mRNA表达水平显著上升,ATGL、MGL、SREBP-1c、FAS、DGAT等脂代谢基因表达状况无显著变化。综上所述,硫辛酸可能通过诱导草鱼脂肪细胞HSL和CPT1的基因表达促进脂质水解和β-氧化,从而降低脂肪细胞脂质含量。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
袁继红 龙欢 雷霆 陈小冬 杨在清
用不同种类、不同浓度游离脂肪酸(FFA)处理体外培养的成熟3T3-L1脂肪细胞,实时荧光定量PCR和Western-blotting分析FFA处理前后脂联素基因mRNA和蛋白质水平的表达差异。结果表明:各类脂肪酸对脂联素mRNA的表达均具有下调作用,且抑制效应呈时间、剂量依赖性;并且各种脂肪酸显著地影响脂联素蛋白的分泌作用。
关键词：
脂肪酸 脂联素 基因表达 脂肪细胞
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
付园园 陈坤琳 王振云 周光宏 李惠侠
[目的]本试验旨在分析脂肪自分泌因子Chemerin在牛肌内成熟脂肪细胞脂解中的作用及调控机制。[方法]体外培养牛肌内成熟脂肪细胞,采用油红O染色与抽提法检测成熟脂肪细胞脂解过程中脂肪含量变化,通过比色法测定细胞中甘油及游离脂肪酸的释放量;采用RT-q PCR及Western blot技术分析脂解关键基因PPARα、LPL与HSL mRNA及蛋白的表达情况。[结果]在牛肌内成熟脂肪细胞脂解过程中,细胞中Chemerin及其受体CMKLR1 mRNA表达量显著降低(P<0.01)。[结论]Chemerin通
[期刊] 水产学报
[作者]
黄吉芹 张建禄 李杨 刘品 李南充 雷彩霞 吉红
为获知草鱼B细胞淋巴瘤-2(B cell CLL/lymphoma-2,Bcl-2)基因序列及其在草鱼各组织和脂肪细胞中的表达情况,采用cDNA快速末端扩增技术获得了草鱼Bcl-2的全长cDNA序列,通过实时定量PCR研究了Bcl-2在草鱼不同组织中的表达水平及经二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA)处理后,草鱼脂肪细胞Bcl-2的表达变化。结果显示,所获得草鱼Bcl-2基因全长cDNA序列长度为1 292 bp,包含133 bp的5'非翻译区和784 bp的3'非翻译区;开放阅读框为375 bp,编码124个氨基酸。草鱼Bcl-2与鲤、斑马鱼Bcl-2氨基酸同源性...
关键词：
草鱼 B细胞淋巴瘤-2 DHA 基因表达
[期刊] 水产学报
[作者]
刘玮 徐萍 任本根 龚纲明
不同脂肪源饲料对草鱼稚鱼生长的影响刘玮，徐萍，任本根，龚纲明（江西省科学院生物资源研究所，南昌３３００２９）关键词草鱼，鱼饲料，必采脂肪酸ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＤＩＥＴＳＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＤＩＦＦＥＲＥＮＴＬＩＰＩＤＳＯＮＧＲＯＷＴＨＯＦＪＵＶＥＮＩＬ...
关键词：
草鱼,鱼饲料,必采脂肪酸
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李玉萍 田晶晶 张凯 夏耘 王广军 郁二蒙 李志斐 龚望宝 谢骏
为探讨皇竹草（Pennisetum sinese Roxb）对草鱼（Ctenopharyngodon idella）脂肪蓄积和肠道菌群组成的影响，配制3组分别含0%（对照组）、10%和20%皇竹草粉的等氮等能纯化饲料（蛋白质水平为33%，脂肪水平为8%），饲喂草鱼稚鱼[（28.51±0.04）g] 8周，每组饲料饲喂3个重复。结果显示，饲料中添加10%和20%皇竹草粉显著降低腹腔脂肪指数（P<0.05），组织切片显微结构显示，相比对照组，皇竹草粉组的草鱼肝脏脂滴数量均明显减少，脂肪细胞大小明显变小。血清中的甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和游离脂肪酸（NEFA）的含量随着皇竹草粉水平的升高呈现下降趋势，其中20%添加水平相比对照组草鱼显著降低（P<0.05）。皇竹草粉组肝脏中的TG、TC和NEFA的含量均显著下降（P<0.05）。肝脏和腹腔脂肪组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ（pparγ）等脂肪生成相关5个基因在摄食皇竹草粉后显著下调（P<0.05），过氧化物酶体增殖物激活受体α（pparα）等4个脂肪分解相关基因在摄食皇竹草粉后显著上调（P<0.05），肝脏组织中法尼酯X受体（fxr）基因在摄食皇竹草粉后显著上调（P<0.05）。肠道菌群宏基因组学结果显示，10%和20%皇竹草粉组草鱼肠道内容物中肠道微生物的Ace、chao1、Shannon和Simpson指数均与照组存在显著差异（P<0.05），表明皇竹草粉提高了草鱼肠道内菌群种类的丰度和多样性。从门分类来看，与脂肪蓄积相关菌群，厚壁菌门（Firmicutes）的比例在皇竹草组中显著降低（P0.05）。综上，以上结果表明，饲料中添加一定量的皇竹草粉能够降低草鱼体脂蓄积，其中肠道菌群的改善可能是这一过程中的重要环节。
关键词：
草鱼 皇竹草 脂肪蓄积 肠道菌群
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
李玉萍 田晶晶 张凯 夏耘 王广军 郁二蒙 李志斐 龚望宝 谢骏
为探讨皇竹草(Pennisetum sinese Roxb)对草鱼(Ctenopharyngodon idella)脂肪蓄积和肠道菌群组成的影响，配制3组分别含0(对照组)、10%和20%皇竹草粉的等氮等能纯化饲料(蛋白质水平33%,脂肪水平8%),饲喂草鱼稚鱼[(28.51±0.04)g] 8周，每组饲料饲喂3个重复。结果显示，饲料中添加10%和20%皇竹草粉能显著降低腹腔脂肪指数。相比对照组，皇竹草粉组的草鱼肝脏脂滴数量均明显减少，脂肪细胞大小明显变小。血清中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和游离脂肪酸(NEFA)的含量随着皇竹草粉水平的升高呈下降趋势，其中20%添加水平相比对照组草鱼显著降低。皇竹草粉组肝脏中的TG、TC和NEFA的含量均显著下降。肝脏和腹腔脂肪组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(pparγ)等脂肪生成相关5个基因在摄食皇竹草粉后显著下调，pparα等4个脂肪分解相关基因在摄食皇竹草粉后显著上调，肝脏组织中法尼酯X受体(fxr)基因在摄食皇竹草粉后显著上调。微生物宏基因组学结果显示，10%和20%皇竹草粉组草鱼肠道内容物中肠道微生物的Ace、chao1、Shannon和Simpson指数均与对照组差异显著，表明皇竹草粉提高了草鱼肠道内菌群种类的丰度和多样性。从门分类来看，与脂肪蓄积相关菌群厚壁菌门(Firmicutes)的比例在皇竹草组中显著降低，拟杆菌门(Bacteroidetes)比例呈上升趋势。饲料中添加一定量的皇竹草粉可降低草鱼体脂蓄积，推测肠道菌群的改善是这一过程中的重要环节。
关键词：
草鱼 皇竹草 脂肪蓄积 肠道菌群
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孟晓庆 侯智霞 张兰 朴蕾
【目的】探讨榛子总RNA提取的有效方法,为今后开展榛子的分子生物学等研究奠定基础。【方法】以榛子的成龄叶片、幼嫩叶片和雄花芽为试材,采用植物RNA提取试剂盒、Trizol法、改良的CTAB法Ⅰ、改良的CTAB法Ⅱ、CTAB法和改良的SDS法提取其总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和PCR检测所提取总RNA样品的品质。【结果】除了Trizol法,其他5种方法都能提取到总RNA,但是改良的CTAB法Ⅰ更适合榛子幼嫩叶片、成龄叶片和雄花芽总RNA的提取,此方法提得的总RNA较完整,条带清晰,品质较优,28SrRNA亮度约是18SrRNA的2倍,且无降解现象。经RT-PCR验证,以改良的CT...
关键词：
榛子 总RNA CTAB SDS
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
高倩 赵丽丽 宋子仪 王少璞 张雅卿 杨公社
【目的】探讨体外培养条件下,LiCl诱导大鼠脂肪基质细胞向成骨细胞分化的潜能。【方法】采用Ⅰ型胶原酶消化组织块法分离获得大鼠脂肪基质细胞,将其分为处理组和对照组,分别用25 mmol/L LiCl和25mmol/L NaCl处理3周,采用形态学、SQ RT-PCR、免疫荧光染色、碱性磷酸酶染色及茜素红染色等方法,检测大鼠脂肪基质细胞向成骨细胞分化的能力。【结果】大鼠脂肪基质细胞在LiCl诱导24 h后,细胞形态由成纤维样变成方块状;诱导3周后,SQ RT-PCR检测发现,细胞表达碱性磷酸酶(AP)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)和骨γ羧基谷氨酸(Bglap)等成骨细胞特异性基因,与处理0 d相比,差异达...
关键词：
脂肪基质细胞 氯化锂 成骨分化 大鼠
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
张圆琴 张越 卫育良 徐后国 郑珂珂 梁萌青
通过摄食生长实验来研究高植物蛋白饲料中添加牛磺酸及水解鱼蛋白对大菱鲆脂肪累积的影响。实验对照组（Ｃ）含有３０％的鱼粉，高植物蛋白饲料＋牛磺酸处理组（ＨＴ）使用植物蛋白替代对照组的一半鱼粉后添加０．８％牛磺酸，高植物蛋白饲料＋牛磺酸＋水解鱼蛋白处理组（ＨＴＰＨ）在ＨＴ饲料的基础上继续使用水解鱼蛋白替代７％的饲料鱼粉。室内流水系统养殖，每组４个重复。与对照组或ＨＴ组相比，ＨＴＰＨ组显著降低了鱼体的中性脂和肝体比。与对照组相比，ＨＴ及ＨＴＰＨ组均显著升高了鱼体水分含量，降低了肝脏总脂和中性脂含量。与对照组相比，肌肉总脂及极性脂仅在ＨＴＰＨ组显著降低。ＨＴＰＨ组的血清甘油三酯和胆固醇含量显著低于对照组．．．
[期刊] 中国水产科学
[作者]
朱瑞俊 李小勤 谢骏 冷向军 田娟 史少奕
选用初始体质量为(314.7±9.9)g的草鱼(Ctenophary ngodon idella)240尾,随机分成4组,每组3个重复,每重复20尾鱼,分别饲喂氯化胆碱添加量为0%(对照组)、0.2%、0.4%和0.6%(占饲料的质量分数)的4组饲料(粗蛋白、粗脂肪含量分别为28.01%和4.54%),胆碱实测含量分别为1010mg/kg、2516mg/kg、4184mg/kg、5852mg/kg,养殖77d后,考察氯化胆碱对草鱼成鱼生长性能、脂肪沉积及脂肪代谢酶活性的影响。结果表明,与对照组相比较,添加0.4%和0.6%氯化胆碱可显著提高鱼体增重率(P<0.05)、特定生长率(P<0.05)...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
陈玉珂 蔺丽丽 宋丹 裴怀全 朱成成 张东鸣
【目的】研究L-肉碱强化卤虫对草鱼、鳙鱼和鲤鱼开口苗中长链脂肪酸组成的影响。【方法】用0(对照,CK),1,100,1 000mg/L的L-肉碱分别强化卤虫无节幼体(Artemiasp.)12h,投喂3种鱼开口苗21d,测定鱼开口苗体内的脂肪酸含量,分析中长链脂肪酸(C14-C24)的组成。【结果】草鱼和鳙鱼开口苗的1和100mg/L处理组的C18∶2n-6、C18∶3n-3、C20∶4n-6、DHA和EPA含量较对照组显著增加(P<0.05);草鱼和鳙鱼开口苗的1...
关键词：
L-肉碱 强化卤虫 开口苗 脂肪酸组成
[期刊] 中国水产科学
[作者]
林仕梅 罗莉 叶元土
试验以Cr2 O3 为指示物 ,测定草鱼对进口鱼粉、国产鱼粉、蟹粉、肉粉、肠衣粉、酵母、菜饼、黄菜饼、黑菜饼、双低菜仔粕、豆粕、膨化大豆、芝麻饼、棉粕、玉米胚芽饼、玉米蛋白粉和酒糟粉 17种试验原料中粗蛋白和粗脂肪的表观消化率。试验饲料由基础饲料和试验原料以 70∶30的比例 (质量比 )混合挤压成硬颗粒饲料。结果表明 ,草鱼对鱼粉、菜籽饼粕、豆粕和膨化大豆等质量好的蛋白饲料的表观消化率较高 ,其干物质、脂肪和蛋白质的表观消化率均在 80 %以上 ;草鱼对酵母、菜籽饼粕、豆粕和膨化大豆等饲料的干物质、脂肪和蛋白质的表观消化率均与鱼粉一致。
关键词：
草鱼 饲料原料 蛋白质 脂肪 表观消化率
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