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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福 史维舟 纪国良 赵桂珍
将酚灭活的点状气单胞菌和柱状屈桡杆菌菌苗按不同比例制备成二联菌苗，注射接种草鱼后，通过检测受免草鱼血清中的凝集抗体效价和攻毒试验，初步证明了由这两种菌制备的酚灭活菌苗，可刺激草鱼产生良好的免疫反应，免疫保护力达到５６．０％～７３．０％。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
史维舟 陈昌福 纪国良 邹华君
将点状气单胞菌用福尔马林、苯酚以及加热来灭活后，给草鱼注射接种，通过测定免疫鱼血清凝集抗体效价、血液中吞噬细胞的吞噬活性和强毒攻击的免疫保护力，证实了３种方法灭活的菌苗对草鱼均具有较强的免疫原性，并以苯酚灭活菌苗的免疫保护力最强。
关键词：
草鱼,点状气单胞菌,免疫反应
[期刊] 水产学报
[作者]
刘毅 谢海侠 昌鸣先 隗黎丽 姚卫建 聂品
将柱状黄杆菌胞外多糖(EPS)溶液经腹腔注射免疫草鱼,以注射灭菌生理盐水作对照。免疫一周后,分别提取受免鱼与对照鱼肝脏、脾脏、体肾和头肾4种组织中的总RNA,并通过RT-PCR半定量的方法检测不同组织中C-反应蛋白(CRP)、白介素1(IL-1)、主要组织相容性复合体I(MHC I)、免疫球蛋白M(IgM)、干扰素(IFN)等5种免疫基因的表达情况。结果显示,CRP在受免鱼肝脏中的表达显著上升;MHC I在受免鱼脾脏、体肾中的表达显著下降;IgM在受免鱼4种组织中的表达皆显著上升;IL-1在受免鱼4种组织中的表达与对照组没有显著差异;无论受免组还是对照组都只能检测到微弱的IFN表达,且两组之间...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
彭小云 刘红 陈孝煊 张棋 袁娟 刘佳佳 吴志新
将嗜水气单胞菌粗脂多糖(C-LPS)和大肠杆菌脂多糖(E-LPS)分别经腹腔注射草鱼(剂量为4mg/kg),以注射PBS为对照。48h后,分别提取各组草鱼的头肾、脾脏、肾脏、肝脏和肠组织中的总RNA,利用Real-time PCR的方法检测不同组织中TNF-α、IL-1β、IL-10和TLR4基因的表达情况。结果显示,与对照组相比,头肾中,TNF-α和IL-1β的表达量在E-LPS组显著升高,而IL-10的表达显著下降;C-LPS组TNF-α和IL-10的表达量显著性升高;TLR4在两试验组均有显著性降低。脾脏中,TNF-α、IL-1β和IL-10在E-LPS组与对照组无显著差异,而IL-1β...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
曹宏梅 李健 战文斌
将鳗弧菌(Vibrio anguillarum)和溶藻弧菌(V.alginolyticus)分别用0.3%福尔马林灭活,制备成鳗弧菌和溶藻弧菌2种单苗,并将2种菌等量配制成二联疫苗,单次腹腔注射免疫大菱鲆(Scophtalmus maximus)。通过检测免疫后替代途径补体活力、溶菌酶活力、抗体凝集效价的变化并分别进行攻毒实验比较疫苗的免疫效果。结果显示,3种疫苗对所测定的各免疫指标都有一定的促进作用,但二联疫苗后期效果低于2种单苗。二联疫苗对鳗弧菌和溶藻弧菌的免疫保护率分别为83.52%和83.24%,而鳗弧菌单苗对鳗弧菌攻毒、溶藻弧菌单苗对溶藻弧菌攻毒的免疫保护率分别为80.37%和74....
关键词：
大菱鲆 二联疫苗 鳗弧菌 溶藻弧菌
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福 史维舟 李静 樊明兴
从患细菌性烂鳃病的翘嘴鳜分离的柱状嗜纤维菌制作的酚灭活菌苗，接种翘嘴鳜３周后，受免鱼体血清中凝集抗体效价上升到１：２５６～２０４８；血液中白细胞的吞噬活性显著地高于对照鱼（Ｐ＜０．０５）；毒力攻击结果表明免疫保护力达到１００％。
关键词：
翘嘴鳜 细菌性烂鳃病 免疫反应
[期刊] 淡水渔业
[作者]
贺路 曾令兵 杨先乐
以绵羊红细胞为载体，建立了检测银鲫血清抗体的间接血球凝集试验。用该方法研究了银鲫对嗜水气单胞菌灭活菌苗的免疫应答一般规律。研究结果表明，疫苗免疫组在免疫７天后可以测到血凝抗体，２１天达到高峰值４０９６，然后开始下降，３５天时抗体滴度降为１６。加弗氏不完全佐剂疫苗免疫组亦在７天时可以测到血凝抗体，２１天达到１０２４，３５天时为２０４８，抗体维持在较高的水平。对鱼体免疫后的保护力进行测定，结果表明，两个免疫组分别在７天左右和１４天左右开始产生保护力。免疫保护力在鱼体免疫初期随着抗体滴度的增加而加强，随后在一段时间内保持在较强的水平，并不随抗体滴度的下降而减弱。浸泡免疫试验的结果亦表明，银鲫可以通过...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福
采用不同血清型的柱状嗜纤维菌（Ｃｙｔｏｐｈａｇａｃｏｌｕｍｎａｒｉｓ）Ｇ４，ＣＴＳ５，和Ｍ１５７等３个菌株，分别制备成福尔马林灭活菌苗（ＦＫＣ）和热灭活菌苗（ＨＫＣ），注射接种草鱼４周后，通过测定血清中凝集、交叉凝集抗体效价以及活菌攻毒试验，证明了３个菌株制备的菌苗的抗原性不存在差别。
关键词：
柱状嗜纤维菌 血清型 抗原性
[期刊] 淡水渔业
[作者]
艾桃山 余刚 胡劲文 安锐 张永学
荧光极毛杆菌能利用~3H—葡萄糖达到同位素标记效果,在灭活标记菌苗的浸泡免疫试验中,包括大于0.45μm规格的各类标记抗原均能在浸泡后30分钟从草鱼肝组织中探测到比仪器本底值高约6～12倍的cpm值。莨菪佐剂能明显促进草鱼对灭活标记菌苗的吸收,浸泡后30分钟及90分钟标记菌苗在鱼体各组织器官分布的顺序为:肝>脾>前肠>肾>血液>肌肉;肌肉>肾>肝>前肠>血液。
关键词：
标记菌苗 浸泡免疫 吸收效果
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘国勇 聂品
柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)是一种世界范围的水产动物致病菌,是中国重要养殖鱼类草鱼(Ctenopharyngodon idellus)、鳜(Siniperca chuatsi)等烂鳃病的病原。本研究以1972年从患"烂鳃病"草鱼上分离的两株冻干柱状黄杆菌G4和G18菌株为研究对象,并将G4株再次分离纯化得纯化菌株,命名为G4R3。对草鱼鱼苗浸泡攻毒结果显示,G4R3的LD50至少比G18的高3个数量级,因此G4R3为"强毒株",G18为"弱毒株"。利用蛋白质组学方法分析柱状黄杆菌强毒株G4R3和弱毒株G18的胞外蛋白,经过双向电泳并结合图像分析,共发现了34个...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
钟蕾 肖克宇 戴良英
为探索鱼类病原菌融合疫苗制备的可行性,以肠型点状气单细胞菌58-20-9菌株和鱼害粘球菌G4菌株作为初发菌株进行原生质体融合,构建融合子.在酶解温度37℃下,筛选出最适酶解时间为40min,最适溶菌酶质量浓度为4mg/mL.以PEG为促融剂的条件下,58-20-9菌株与G4菌株的原生质体进行了融合,58-20-9菌株的原生质体形成率为54.7%,原生质体再生率为18.2%,G4菌株的原生质体形成率为50.8%,原生质体再生率为12.2%,初筛的原生质体融合率为4‰.点种500个初筛融合子菌落在双抗培养基上连续传代12次,得到1个稳定的融合子菌落,其稳定率为0.2%.
[期刊] 淡水渔业
[作者]
夏君 吴志新 张鹏 熊娟 庞丽娇 陈孝煊
应用间接酶联免疫吸附试验(Indirect-ELISA)技术,建立了快速检测柱状黄杆菌的方法。结果显示:根据棋盘试验,确定最佳抗原包被浓度和免疫血清最佳工作浓度分别为1×106cfu/mL和1∶5000,酶标抗体最佳工作浓度为1∶10000。在该条件下,所建立的间接ELISA能检测出5×104cfu/mL的柱状黄杆菌,且与爱德华氏菌、哈维氏菌弧菌、嗜水气单胞菌、副溶血弧菌等常见鱼类致病菌无交叉反应。结果表明,所建立的间接ELISA可不经细菌培养而直接检测人工感染后草鱼鳃组织中的柱状黄杆菌,该方法对柱状黄杆菌的检测具有快速、敏感、特异、实用的优点。
关键词：
柱状黄杆菌 间接ELISA 检测
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张秋胜 陈昌福
采用福尔马林灭活的嗜水气单胞菌 (Aeromonashydrophila)菌苗免疫接种异育银鲫 ,通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价 ,溶菌酶活性 ,血液中吞噬细胞的吞噬活性 ,杀菌活性并通过鱼体攻毒试验 ,探讨了异育银鲫对福尔马林灭活的嗜水气单胞菌菌苗的免疫应答状况。结果表明 ,接种 2 8d后 ,受免鱼血清中凝集抗体效价和溶菌酶活性均值分别为 1∶18.89和 15 6 .36U/ml,相应的对照组则为 1∶0 .83和 138.6 8U/ml;受免鱼血液中白细胞吞噬百分比和吞噬指数分别为 6 3.38%和 6 .0 2 ,而对照组的分别为 47.95 %和 5 .0 8;免疫组和对照组白细...
关键词：
异育银鲫 嗜水气单胞菌 免疫应答
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李卫芬 张小平 宋文辉 邓斌 梁权 傅罗琴 郑佳佳 余东游
选取体质量约45 g的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)210尾,随机分为2组,每组设3个重复;对照组在水中不添加任何菌,处理组每隔7天分别向水中按照1×108cfu/m3添加芽孢杆菌(Bacillus)菌粉,二组均饲喂基础日粮。结果表明,与对照组相比,处理组血清球蛋白、白球比、免疫球蛋白M(IgM)和补体C3分别提高了44.62%(P<0.05)、54.59%(P0.05)和45.12%(P0.05);与对照组相比,处...
关键词：
芽孢杆菌 草鱼 免疫 抗氧化
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孔维光 吴志新 李思思 赵慧 李锡阁 陈孝煊
为探讨益生性枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞黏附及对嗜水气单胞菌的抑制作用,以草鱼肠上皮细胞为研究对象,检测了枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞的黏附率、对嗜水气单胞菌的黏附抑制率和对各种生理生化指标的影响。结果显示:枯草芽孢杆菌对草鱼肠上皮细胞形态、细胞中四甲基偶氮唑盐(MTT)OD值、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)和谷草转氨酶(GOT)活性等各种生理指标无显著影响,但在孵育3h和6h后分别显著降低了Na+,K+-ATP酶和谷丙转氨酶(GPT)的活性;与嗜水气单胞菌孵育3h后,肠上皮细胞由椭圆变成不规则形态,
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