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[期刊] 水产学报
[作者]
邵健忠 项黎新 阎春兰
采用细胞病变抑制等方法 ,在植物凝集素 (Phytoagglutinin ,PHA)诱导的草鱼血清中检测到一种干扰素。理化和生物学性质鉴定表明 ,它不同于病毒诱导的α/ β 干扰素 ,表现在对 5 6℃、pH2和 0 .1%SDS敏感 ,其活性不能被α/ β 干扰素抗体所中和 ,其诱生剂为非病毒性质的有丝分裂原 ,诱生作用受佛波酯 (PMA)和白细胞介素 2(IL 2 )的调节 ,这些特性与人类和高等脊椎动物中报道的γ干扰素相符 ,表明是一种γ样性质的干扰素。草鱼γ样干扰素的体内诱导受环境温度、诱导时间、PHA剂量等因素的影响 ,2 5℃或 30℃水温诱导的干扰素活性明显高于 15℃或 8℃...
关键词：
草鱼 植物凝集素 γ样干扰素 体内诱导
[期刊] 水产学报
[作者]
邵健忠 项黎新 李亚南
草鱼干扰素 (IFN)诱生条件与规律的研究结果显示 ,病毒侵染草鱼后能迅速诱导IFN的合成 ,2 4h即可在血清中检测到IFN活性 ,3d后活性达到高峰。草鱼IFN的合成受温度、病毒种类、病毒剂量、鱼体营养状况等因素的影响。 2 5℃水温下诱生的IFN活性明显高于 15℃和 8℃。RNA病毒的诱生能力高于DNA病毒 ,其中以双链RNA病毒GCHV的诱生能力最强。在急性致死剂量以下提高病毒感染剂量以及维持鱼体的正常营养状况 ,有利于提高IFN的产量。用适量IFN或灭活GCHV预注射草鱼 ,作起动或预诱导处理 ,能显著促进IFN的诱生。病毒活性、鱼龄大小对IFN的诱生无显著影响。
关键词：
草鱼 干扰素 诱生条件
[期刊] 水产学报
[作者]
朱晓真 王俊亚 贾钊 王梓璇 王邦杰 邹钧
Ⅱ型干扰素，也称干扰素-γ（IFN-γ），是参与辅助性T淋巴细胞1（Th1）免疫应答的关键细胞因子之一。研究表明，鱼类与哺乳类Ⅱ型干扰素同源，不同的是真骨鱼类（Teleost）有两种Ⅱ型干扰素，即IFN-γ和干扰素-γ相关因子（IFN-γrel）。迄今，对鱼类IFN-γ基因的表达规律和功能已有大量报道，而对IFN-γrel的研究尚不深入，产生IFN-γ和IFN-γrel的细胞来源不清楚，它们是否有功能差异也存在争议。为此，本研究构建原核表达质粒，在大肠杆菌DE3中表达草鱼（Ci）IFN-γ和CiIFN-γrel重组蛋白。实验结果显示，重组CiIFN-γ蛋白为可溶性蛋白，而CiIFN-γrel蛋白则不可溶。通过亲和层析和分子筛层析获得了高纯度CiIFN-γ和CiIFN-γrel重组蛋白，免疫小鼠制备了单克隆抗体。通过Western Blotting筛选获得4株特异性高、亲和力强的抗体，结果表明CiIFN-γ单克隆抗体与CiIFN-γrel没有交叉反应，反之亦然，其中FITC标记的两株抗体可用于免疫荧光和流式细胞术分析。此外，Western Blotting分析显示草鱼IFN-γ和IFN-γrel单克隆抗体不识别斑马鱼的同源Ⅱ型干扰素蛋白。本研究制备了首个IFN-γrel的单克隆抗体，为深入研究草鱼Ⅱ型干扰素的产生和生物学功能奠定基础。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
张学文 章怀云
干扰素 (IFN)在诱导细胞的抗病毒和抗生长反应及调节免疫反应中起关键作用 .尤其是抗病毒反应是干扰素的基本功能 ,其分子机制正逐步被揭示 .IFN诱导的过程实际上是一个信号传递和级联放大的过程 .其主信号途径通过位于细胞膜上的酪氨酸激酶使酪氨酸磷酸化 ,激活信号传导物和转录激活因子 .然后信号传导物和转录激活因子转移到细胞核内 .它们导致了许多基因产物的表达并由此产生一系列的生理学过程
关键词：
干扰素 信号传递 分子机制
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈立祥 张学文 肖调义 汪冬庚 符少辉 苏建明 陈开健 章怀云
为提高草鱼对出血病的抗性 ,采用显微注射法 ,将克隆在鲤 β-肌动蛋白基因启动子下游的人 α-干扰素基因转移到草鱼受精卵中 ,获得了大量转基因个体 .抽取转基因鱼血浆 ,以酶联免疫吸附法检测了转基因草鱼中人α-干扰素基因的表达情况 .从 6 72尾转基因草鱼中检测出 15 8尾有 α-干扰素的表达 ,阳性率为 2 3.5 1% ,其中表达水平最高个体血浆中α-干扰素质量浓度为 145 0 pg/ m L .基因表达量随季节和个体发育时期有所变化
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
毛明光 王印庚 尹立杰 张家松 刘宗柱
为提高聚肌胞(Polyinosinic-polycytidylic acid,polyI:C)的配对效果,本文研究了温度和金属离子对聚肌胞配对的影响。实验结果显示,在45℃条件下合成的聚肌胞减色效应最强,说明在该温度下聚肌苷酸(Polyinosinic acid,PI)和聚胞苷酸(Polycytidylic acid,PC)配对最紧密;Na+、Ca2+、Mg2+、Mn2+和Zn2+能够增强聚肌胞双链结构的紧密性,当Na+浓度增加到0.085mol/L后,聚肌胞的配对接近饱和;Ca2+、Mg2+、Mn2+和Zn2+对聚肌胞结构的保护效果基本一致,而Cu2+对聚肌胞结构具有明显破坏作用。建议采用4...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张军忍 江善祥 刘祖亮
［目的］高效合成盐酸替洛隆，对盐酸替洛隆进行质量研究并简略探究其诱导干扰素的作用强度与特点。［方法］通过２，７－二羟基－９－芴酮与２－二乙氨基氯乙烷盐酸盐发生取代反应合成替洛隆，进一步酸化得到盐酸替洛隆。目标化合物的结构经红外光谱（ＩＲ）、核磁（１ＨＭＮＲ）和质谱（ＭＳ）确证，并依据药典规定的方法，依次检验盐酸替洛隆的各项理化性质及含量。盐酸替洛隆以２５０ Ｍｇ·ｋｇ～（－１）的剂量灌胃ＳＰＦ小鼠，分别在给药后不同时间采血，采用ＥＬＩＳＡ法检测血清中α１干扰素水平，评估盐酸替洛隆干扰素诱导作用。［结果］盐酸替洛隆合成收率达到９３％；其理化性质稳定，制备方法可靠；给小鼠灌胃１２ Ｈ后，诱导其机体．．．
关键词：
盐酸替洛隆 合成 质量鉴定 干扰素
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈开健 章怀云 张学文 肖调义 陈立祥 苏建民 汪冬庚
为研究转人 -α-干扰素基因草鱼的食用安全性 ,以转人 -α干扰素基因草鱼肉糜饲喂大鼠 ,在 30 d内对试验鼠进行了临床观察 .试验结束时 ,对试验鼠进行了血液学检测、解剖学观察和组织学检查 .结果表明 ,饲喂转人 -α干扰素基因草鱼肉糜的大鼠临床表现正常 ,血液学指标、解剖学形态和重要器官组织学图像与对照组动物没有显著差别
关键词：
转人-α-干扰素基因草鱼 大鼠 饲喂试验
[期刊] 水产学报
[作者]
赵杰 卜云璇 柳昭君 侍苗苗 徐逍 宋学宏
通过建立草鱼肠道炎症模型,为经济鱼类炎症性肠病发病机理研究及药物筛选提供实验平台。于水温28℃条件下,从草鱼肛门插管注入0.25 mL浓度为2.5%的三硝基苯磺酸(TNBS)50%乙醇溶液,诱发草鱼肠炎,注入等体积0.7%生理盐水作为对照,观察草鱼机体损伤程度、肠道组织病理,分析不同肠段组织内髓过氧化物酶(MPO)活性及IL-1β、IL-8和TNF-α等炎性相关基因表达量。病理观察结果显示,实验期间实验鱼未出现死亡现象,经TNBS诱导后出现较严重的肠道炎症,肠灌TNBS后1 d,草鱼肠粘膜严重充血溃烂,肠道组织中出现大量炎性细胞浸润;3 d后出现腹水,损伤部位招募大量炎性细胞,溃疡开始愈合;7...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
秦改晓 徐文彦 艾晓辉 唐国盘 崔锦 李向辉 袁科平
【目的】研究阿维菌素在草鱼体内的药物代谢动力学,为实际生产中阿维菌素的使用提供理论指导。【方法】用初始质量浓度为0.3μg/L的阿维菌素水溶液药浴草鱼,于给药后0.5,1,2,3,4,6,8,10,12,24,48,72,96,144,216,336,528和576h采取血浆、肌肉+皮、肝脏、肾脏、鳃等样品,采用高效液相色谱-荧光法测定阿维菌素在草鱼血浆中的质量浓度及在组织中的含量,数据经3P97药动学软件分析。【结果】在(26.0±1.0)℃的水温条件下,阿维菌素单剂量浸泡给药0.3μg/L,血药经时过程符合二室开放式模型。主要药动学参数如下:分布半衰期(T1/2α)34.2h,吸收半衰期(...
[期刊] 水产学报
[作者]
林茂 杨先乐 纪荣兴
为了建立以CYP1A cDNA为探针的水环境毒理学细胞模型,以β-萘黄酮(BNF)作为诱导剂,通过半定量PCR技术研究CYP1A在草鱼不同细胞系及其对应组织中的诱导表达情况。在半定量PCR反应参数研究中,对关键的退火温度和循环次数进行了优化,结果显示退火温度为57℃,循环次数为30次较为合适,该条件下Gauss迹量的CYP1A/ACT比值能更准确的反映CYP1A的表达水平。对照组和诱导组草鱼细胞中ACT和CYP1A cDNA扩增结果表明,细胞中CYP1A的基础表达量较低,而BNF诱导使GCL、CIK和CO细胞中CYP1A的表达水平得到显著的提高。GCL、CIK和CO细胞三者之间诱导后CYP1A...
关键词：
草鱼 细胞 CYP1A cDNA 诱导
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴艳兵 谢荔岩 谢联辉 林奇英
以烟草感病品种普通烟K326为材料,以毛头鬼伞多糖(CCP)为诱导因子,采用高效液相色谱法(HPLC)测定了CCP对烟草体内水杨酸(SA)含量的影响.结果表明,CCP可以诱导烟草感病品种体内SA含量增高,SA含量在接种烟草花叶病毒(TMV)后84 h达到最大值,为458.927 ng.g-1.
[期刊] 淡水渔业
[作者]
游浩 李英伦 陈学宏
以新三黄液中黄柏的主要成分小檗碱,大黄的主要成分大黄酸、大黄素、大黄酚为指标,通过建立高效液相色谱法对新三黄液在健康草鱼(Ctenopharyngodon idellus)体内的药代动力学过程进行了研究。结果显示,健康草鱼单剂量灌服新三黄液后,小檗碱、大黄酸、大黄素、大黄酚在草鱼体内的药动学过程均符合一级吸收一室模型(权重=1/CC)。4种成分在草鱼体内的吸收良好,分布较广泛。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王红权 章怀云 张学文 肖调义 苏建明 唐湘北
为探明人α-干扰素在转Hu-IFN-α基因草鱼F1代中的表达水平,以转Hu-IFN-α基因草鱼F1群体为材料,随机抽取332尾鱼分离其血清后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人α-干扰素基因在转基因草鱼F1代中的表达情况.结果表明:转人α-干扰素基因草鱼F1代表达率为52.1%,表达水平偏低,其表达水平受外界因素影响.
[期刊] 淡水渔业
[作者]
余少梅 高银爱 魏朝辉 周裕和 罗杨志 董军 张立强 邓平 胡亦清 郑程鹏 喻运珍
为了研究姜黄提取散中姜黄素在草鱼体内的药代动力学及组织分布规律，对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)按每千克鱼体重单剂量口灌100 mg姜黄提取散后，采用液相色谱-质谱联用法测定不同时间点草鱼各组织中姜黄素含量，用药代动力学分析软件(WinNonlin5.2.1)处理药-时数据。结果显示：该检测方法在0.05～50.00μg/L范围内线性关系良好，相关系数为0.999 1,血浆中检测限为0.02μg/L,其它组织中为0.02μg/kg,方法平均回收率为77.16%～106.10%,日间、日内误差均小于10%。姜黄素在血浆中达峰时间(T_(max))为8 h,峰浓度(C_(max))为0.406μg/L,药时曲线下面积AUC为5.947 h·μg/L,消除半衰期(t_(1/2))为21.596 h,姜黄素在组织中分布呈现出组织特异性。结果表明，姜黄素在草鱼血液中达峰时间长，峰浓度低，消除快，在体内主要分布于肝脏和肾脏。
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