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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
史永忠 万蜀渊 薛光荣
草莓花药愈伤组织经５次继代培养，生长旺盛，质地松软，可用于原生质体的分离。在含０．１％ＰｅｃｔｏｌｙａｓｅＹ－２３，０．５％纤维素酶（ＯｎｏｚｕｋａＲ－１０），０．５％离析酶（ＭａｃｅｒｏｚｙｍｅＲ－ｌ０）的混合酶液中酶解１３ｈ，原生质体的产量为１．４７×１０￣６／ｇＦＷ，活性６７．３５％。原生质体采用液体浅层和琼脂糖包埋培养，获得了肉眼可见的多细胞团。
关键词：
草莓,原生质体培养,再生细胞团
[期刊] 华北农学报
[作者]
程增书 高志强 方仁
从小麦ＣＫ８９、１０２、１１３的花药和花冬的约穗诱导愈伤组织的继代培养中，选择致密颗粒型愈伤组织，转入附加２，４－Ｄ２～４ｍｇ／Ｌ改良ＭＳ固体培养基上进行继代培养，６～１０周后形成生长迅速的胚性愈伤组织，这种愈伤组织分离原生质体得率为１～３．７×１０７个／ｇ。原生质体于ＰＣＭ２培养基上琼脂糖包埋培养，３～５天出现第一次细胞分裂，７～１４天进行第二、第三次细胞分裂，两周后形成大量细胞团，细胞分裂频率达２０．３％～７３．３％，４～６周后形成肉眼可见愈伤组织。供试４个基因型中，ＣＫ８９、１０２和花冬均形成再生愈伤组织，仅１１３形成多细胞团。愈伤组织增殖分化实验尚在进行中。
关键词：
小麦,胚性愈伤组织,原生质体培养
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
李昌珠 王丽华 陈建华 蒋丽娟 李培旺 张良波
为获得高质量的原生质体,给光皮树转化系统的建立奠定基础,以光皮树花药愈伤组织为材料,研究了愈伤组织结构、酶液组合、酶解时间及渗透压对原生质体分离效果及活力的影响,从而确定适合光皮树花药愈伤组织原生质体最佳分离条件。结果表明:淡黄绿色、疏松的愈伤组织在CPW+2%纤维素酶R-10+0.3%蜗牛酶+0.25%果胶酶Y-23+13%甘露醇+0.6/L MES的酶解液中,黑暗条件下振荡酶解10 h,原生质体产量达到3.19×106个/g,具活力的原生质体为73.48%。
关键词：
光皮树 花药愈伤组织 原生质体 分离条件
[期刊] 中国农业科学
[作者]
文峰 肖诗鑫 聂扬眉 马秋香 张鹏 郭文武
【目的】建立有效的木薯原生质体再生体系,为原生质体融合以及原生质体转化等研究奠定技术基础。【方法】酶解木薯品种TMS60444的脆性胚性愈伤组织(FEC)的悬浮系,分离原生质体的产量最高达3.5×106个/g,FDA检测其活性约90%。用TM2G培养基以液体浅层法分别在5×105个/mL和2×105个/mL密度下培养,培养过程中前30 d用0.3 mol.L-1TM2G新鲜培养基每10 d更换1次,此后每10 d用0.25 mol.L-1TM2G新鲜培养基更换。原生质体培养45 d后即可挑出1—2 mm大小的愈伤组织分别在MSN培养基上分化胚、CMM上促胚成熟、CEM上茎伸长、MS上生根。【结...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
查忠萍 柳俊 刘定富
以草莓品种丰香为材料,取花粉发育处于单核期的花药进行培养。培养初期花粉细胞和花药其它组织的细胞学变化连续观察结果表明,尽管培养初期少数花粉启动分裂,但分裂几次后均趋向解体。本研究的花药再生植株均起源于花丝断裂处的体细胞。采用染色体计数和DNA组分测定2种方法对43个再生株系进行了倍性鉴定,结果显示,其中39个株系为八倍体(2n=8x=56),4个株系为十六倍体(2n=16x=112),未获得与花粉染色体倍性相同的植株。
关键词：
草莓 花药培养 再生植株
[期刊] 林业科学研究
[作者]
阙国宁 诸葛强
以牡竹属黄竹（ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｍｅｍｂｒａｎｃｅｕｓＭｕｎｒｏ）的竹节及无菌苗根颈为外植体，培养于含有５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．２ｍｇ／ＬＫＴ和２００ｍｇ／ＬＬＨ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，然后移至相同成份或不同浓度２，４－Ｄ的液体培养基中，进行悬浮培养，以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体，其产量分别约为每克鲜重２．５×１０５个和５×１０５个，活力均可达８０％。
关键词：
黄竹,细胞悬浮培养,原生质体分离
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
刘晓荣 陶承光 吕书文 杨国栋 王平
以5个番茄F1杂交种为试材,研究了基因型、植物生长调节剂、变温处理和椰乳对愈伤组织发生及植株再生的影响,旨在优化番茄花药培养的技术方法。结果表明:不同基因型愈伤组织发生率不同;培养基中添加0.5mg·L-1的2,4-D较NAA,5个材料的愈伤组织平均诱导率提高了10.04%;4℃48h+33℃72h的处理对愈伤组织的诱导有明显的促进作用;培养基中加入50mg·L-1的椰乳可提高愈伤组织诱导率。植株再生的较优培养基为MS+0.2mg·L-1 IAA+2.0mg·L-16-BA+0.5mg·L-1ZT。基因型和培养基是愈伤组织的发生和植株再生的主要影响因素;适当的低温处理配合高温热激,及在培养基中...
关键词：
番茄 花药培养 愈伤组织 植株再生
[期刊] 华北农学报
[作者]
吕复兵 张献龙 刘金兰
以陆地棉品种“珂字２０１”为材料，比较了ＩＡＡ＋ＫＴ和２，４－Ｄ＋ＫＴ在愈伤诱导和悬浮培养中的效应，结果表明，愈伤组织诱导中，ＩＡＡ和２，４－Ｄ表现为正效应，且２，４－Ｄ的效应强于ＩＡＡ；ＫＴ表现为负效应；胚性愈伤悬浮培养中，３种激素都表现出负效应。以胚性细胞悬浮系为材料进行了原生质体的分离和培养试验，分离原生质体的最佳酶组合为纤维素酶（ＯｎｏｚｕｋａＲ１０）３％＋果胶酶（Ｐｅｃｔｉｎａｓｅ）１．５％，原生质体培养的最佳激素组合为ＩＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ，适当提高原生质体密度有利于原生质体培养。光照，温度等物理因素对原生质体培养也有明显影响。原生质体再生的愈伤组织直接在无激素的...
关键词：
陆地棉,原生质体培养,植株再生
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
朱根发 葛台明 余毓君
用缩短继代间隔的方法，从小麦３５８１６幼穗愈伤组织中筛选到由小颗粒组成的松脆型胚性愈伤组织，并建立了胚性细胞悬浮系。从中分离的原生质体培养在经高压灭菌的改良ＭＳ或改良Ｎ６培养基中，得到了大量的再生愈伤组织和胚状体。经直接分化或增殖后分化均得到再生植株。生长迅速的再生愈伤组织具有较高的植株再生能力；将再生细胞团增殖后分化能明显提高植株再生率和再生植株数。随着悬浮培养时间的增加，原生质体培养中直接胚胎发生途径将减少。
关键词：
小麦 胚性细胞悬浮系 原生质体 植株再生
[期刊] 华北农学报
[作者]
王怀名 A.舍弗尔-门沃尔 G.米克斯-瓦格纳
研究了8个杂种一代嫩茎花椰菜品种,在5个品种中得到了细胞分裂、多细胞团和愈伤组织;1个品种的愈伤组织再生了新枝。离体繁殖的无菌苗叶片剪成细条,酶液由2％纤维素酶和1％解析酶组成,21℃、50转/分摇床上分离3小时。0.5M蔗糖液漂浮纯化。接种于1％琼脂糖滴上,滴加液体培养基,25℃、光照16小时、光强4000lux下培养。3～5天细胞分裂;1周左右形成4个或更多细孢团;3～5周形成小愈伤组织。愈伤组织达2～3mm时,移到愈伤组织固体培养基上;直径达1cm时,移到固体分化培养基上,分化出根和新枝。
关键词：
原生质体培养 新枝再生 嫩茎花椰菜
[期刊] 湖南农业大学学报
[作者]
胡家金 甘霖 熊兴耀 肖浪涛 张秋明
由美味猕猴桃东山峰 79- 0 9品种诱导产生的 4种类型愈伤组织 ,其分离原生质体的效果不同 :A型愈伤组织分离的原生质体数量多 ,但活力较低 ;B型愈伤组织分离的原生质体不仅数量较多 ,而且活力也高 ;C型愈伤组织分离的原生质体数量少 ,但活力高 ;D型愈伤组织分离的原生质体数量较多 ,但活力低
关键词：
美味猕猴桃 原生质体分离 愈伤组织 筛选
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张航宁 吴琴生 刘大钧
原生质体培养和植株再生技术是药用植物生物工程的基础，药用植物原生质体的来源，酶解的条件，培养基的组成，培养的方法等对原生质体培养有着很大的影响。目前，原生质体培养在药用植物高产细胞系的筛选、体细胞杂交和基因工程方面已取得了长足的进展。
关键词：
药用植物 原生质体 应用
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈文品 吴琴生 刘大钧 M G K Jones
本试验研究了影响黑麦草悬浮细胞生长以及原生质体分离和培养的部分因素.结果表明:黑麦草悬浮细胞继代培养时的接种量对悬浮细胞的生长速度影响较大,其与培养基的比例为1∶20时,生长速度较快;当悬浮细胞与酶液的比例为2～3∶10时,每 ml 酶液原生质体产量最高;原生质体培养基中用葡萄糖代替蔗糖和甘露醇作碳源或渗透压稳定剂进时,原生质体的植板率较高。
关键词：
黑麦草 原生质体 碳源 渗透压稳定剂
[期刊] 水产学报
[作者]
谢恩义 马家海
为了开发礁膜人工育苗的新技术,以4％果胶酶和2％纤维素酶的甘露醇溶液,分离酶解经无菌处理的礁膜叶状体,在40mmol·L~(-1)CaCl_2,0.7mol·L~(-1)甘露醇,pH5.5,温度28℃,摇床速度50r·min~(-1)旋转振荡3h的条件下,1.0g湿重礁膜可获原生质体约2×10~6个。原生质体分离后依次用比重为1.030、1.026、1.022的消毒海水(添加N、P、Fe~(2+)、IAA、KB、Vit C)培养,2d后已形成明显的再生细胞壁,3～4d后细胞开始分裂,8d后形成由4～8个细胞组成的细胞团,以后原生质有不同的发育形态,较常见的是形成由一共同胶质膜包被的类似亲本的叶...
关键词：
礁膜 原生质体 酶解 分离 培养
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孙玉强
根据增加棉花基因库多样性的迫切需要,棉花改良计划正在转向于多种分子育种技术的应用和资源的利用。丰富的棉花野生种(Gossypiumspp.)是栽培棉遗传改良重要的种质资源和更新资源,并成为宝贵的遗传资源库,野生棉研究利用对栽培棉的遗传改良有着重大的现实和理论意义及潜在的应用
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