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[期刊] 华北农学报
[作者]
谢昆 王丽仙 王靖 朱灵明 尹建华 叶青霞 孙艳
为研究草地贪夜蛾对饥饿诱导自噬的响应。从草地贪夜蛾EST数据库中筛选到一段核苷酸序列,设计特异性引物,RT-PCR技术从草地贪夜蛾Sf9细胞中扩增该核苷酸序列,经过生物信息学分析该序列与昆虫自噬相关基因ATG8同源性最高,命名为SfATG8基因,并构建了pIEX-4-mCherry-EGFP-SfATG8载体转染Sf9细胞。Sf9细胞经饥饿(PBS)诱导4 h后,Lyso-Tracker染色、Western Blotting、共聚焦显微镜检测细胞对自噬的响应程度。结果表明,经饥饿(PBS)诱导4 h的Sf
关键词：
草地贪夜蛾 Sf9 饥饿 自噬
[期刊] 中国农业科学
[作者]
林健荣 邓平建 李喜梅 房师松 霍永康
目的试验以草地贪夜蛾细胞sf9作为受体,检测氯化汞对其生长发育的影响。方法采用台盼兰染料排斥法测定细胞活力,苏木素-伊红染色法检测细胞中的微核,对经氯化汞处理诱变的病毒AcMNPV的DNA进行PCR扩增,产物经测序后进行分子突变分析。结果sf9细胞在4μg·ml-1的氯化汞浓度作用下,其细胞表面变得粗糙,分裂生长减慢,当剂量增大到7μg·ml-1时,便可观察到一些细胞的细胞膜破裂,在9μg·ml-1时,某些细胞的完整性受到破坏。用苏木素-伊红染色法检测细胞中的微核现象时,9μg·ml-1氯化汞处理区的微核率高达6.8%,有些细胞出现三核甚至多核的核裂现象,反映部分细胞的完整性受到一定程度的损伤...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
胡媛媛 王照英 张懿熙 刘泽文
[目的]本文分析了对多种昆虫具有高毒力的球孢白僵菌菌株NJBb2101发酵液产物对细胞增殖抑制和凋亡诱导的作用,旨在为筛选球孢白僵菌杀虫成分提供理论基础。[方法]以昆虫细胞Sf9为材料,利用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测发酵液产物对细胞增殖的抑制作用;利用AO/EB(吖啶橙-溴化乙锭)染色和Annexin V-FITC/PI(Annexin V-fluorescein isothiocyante/propidium iodide)染色-流式细胞仪2种检测方法测定了高、低质量浓度(1.92和0.48 mg·mL~(-1))发酵液产物对细胞凋亡的诱导作用。[结果]NJBb2101发酵液产物对Sf9细胞增殖具有很强的抑制作用,测定的抑制中浓度(IC_(50))为0.907 mg·mL~(-1)(95%置信限为0.500～3.075 mg·mL~(-1))。AO/EB和Annexin V-FITC/PI染色-流式细胞仪检测发现高浓度(1.92 mg·mL~(-1))发酵液产物可以显著增强细胞凋亡率,平均凋亡率均在70%以上。[结论]球孢白僵菌发酵液中存在有效的杀虫成分,对昆虫细胞表现出增殖抑制和诱导凋亡的作用。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李金梅 木魁 姜双林 李登坤 李文雍 马同富 李永民
【目的】研究骆驼蓬总碱对草地贪夜蛾幼虫的杀虫作用机理,为此类生物碱作为新型植物杀虫剂的开发应用提供理论依据。【方法】从骆驼蓬成熟种子中提取骆驼蓬总碱,采用MTT法测定0,1,5,10和20μg/mL骆驼蓬总碱对草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)卵巢细胞系(Sf9)的毒性;测定5μg/mL骆驼蓬总碱在处理10,30,50,70和90min时对Sf9细胞Na+和K+吸收的影响,并测定5μg/mL骆驼蓬总碱在处理1,2,3,4,5d后对葡萄糖吸收的影响;最后采用叶碟法(叶碟在20μg/mL
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
邓环环 杨俊杰 郭安红 王纯枝 谢家旭 钟敏 郭广芬
为了准确预报害虫的迁飞轨迹，将天气预报技术应用于迁飞性害虫的预测预报，本研究基于天气预报平台，利用欧洲中心中短期气象数值预报产品以及大气环流形势及低层风动力对草地贪夜蛾的迁飞路径、迁入时间（包括首见日及高峰日）、落区等进行预报，并基于2021年草地贪夜蛾迁飞的2次典型预报案，分析2021年草地贪夜蛾春季北迁至湖北（首见日）以及秋季南迁回湖北（高峰日）的典型天气过程以及迁飞层气象要素场，运用HYSPLIT轨迹模型模拟迁飞后向轨迹，再利用草地贪夜蛾田间监测数据、测报灯监测数据以及迁飞轨迹对预报结论进行验证。结果显示，2次典型预报案例的预报结论与草地贪夜蛾田间监测数据及测报灯监测数据以及轨迹模拟的情景吻合度较好，草地贪夜蛾迁入时间、落区及路径预报基本正确。研究表明，将天气预报技术应用于迁飞性害虫预报的具有实际可行性。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
吴秋琳 姜玉英 刘媛 刘杰 马景 胡高 杨明进 吴孔明
【背景】草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）是联合国粮食及农业组织（FAO）全球预警的重大迁飞性农业害虫，2018年底入侵中国后对玉米等农作物生产构成了严重威胁。远距离迁飞习性是草地贪夜蛾区域性转移危害的生物学基础，其在东亚季风和印度季风流行的气候环境下，可形成纵贯中国东部地区和西部地区的迁飞路线。据连续两年全国普查，草地贪夜蛾沿西线迁飞路线逐代北侵的终点位于我国西北地区的宁夏全境和内蒙古阿拉善左旗。但目前，入侵中国西北地区的草地贪夜蛾的虫源地尚未明确，该害虫在整个中国西部地区的迁飞路径研究也鲜有报道。【目的】阐释驱动草地贪夜蛾迁入中国西北地区的关键气象动力因子，明确该地区首次入侵种群的虫源地所在，精准解析亚洲季风气候背景下草地贪夜蛾的迁飞路径，为建设监测预警体系和指导区域性治理提供依据。【方法】利用2019—2020年草地贪夜蛾在西北地区宁夏的成虫种群动态监测数据和气象资料，采用中尺度气象数值模拟、昆虫迁飞轨迹模型、地理信息系统等技术手段，分析草地贪夜蛾远距离迁飞的大气动力背景场，模拟计算草地贪夜蛾在中国西北地区连续1—3个夜晚的迁飞路径和回推轨迹落点。【结果】7—9月份出现的偏南夏季风是影响宁夏等西北地区草地贪夜蛾不断迁入的关键气象因子，其虫源主要来自于甘肃东南部、四川东部，其次为陕西西部，此外，重庆西南部、云南东北部和山西西部局部也可为西北地区提供一定的虫源。【结论】在偏南夏季风的主导作用下，草地贪夜蛾经由多个夜晚的连续迁飞可构成其在中国西部地区的主要迁飞路径。该路径源自缅甸，自南向北依次经由中国“云南-四川和重庆-陕西和甘肃-宁夏”，最北可达内蒙古。在7—9月份偏南风盛行期提前和风速偏强的气候条件下要加强西北部玉米种植区草地贪夜蛾的监测预警与防治工作。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
杨露 汤勇 张政兵 林宇丰 贺华良 丁文兵 邱林 李有志
为评估草地贪夜蛾从玉米转移为害水稻的风险，将室内以玉米叶继代饲养10代以上的草地贪夜蛾初孵幼虫分别饲喂玉米叶和水稻叶，其后代为CnC1和CnR1;Cn R1组用水稻叶继代饲养8代后再分为2组，一组继续饲喂水稻叶并繁殖1代(CnR8R1)，另一组取食玉米并繁殖1代(CnR8C1)，分别观察、记录这4个种群幼虫的历期，计算其存活率、繁殖力，测定其营养效应和中肠消化酶活性。结果表明：CnC1组的幼虫历期最短(17.46d)，而CnR1幼虫历期最长(23.24d)，这两者间差异显著；Cn R1组存活率显著低于其他处理组；CnC1组单雌产卵量最高(693粒)，CnR1组的单雌产卵量最低(384粒)；CnR1组和CnR8R1组幼虫的相对取食量均显著低于CnC1组和CnR8C1组的；4个处理组间幼虫食物利用率和转化率的差异不显著；寄主转换过程中幼虫中肠的胃蛋酶活性的差异显著，但脂肪酶和淀粉酶活性的差异不显著。由此可见，从幼虫的存活率、繁殖力、营养效应、中肠消化酶活性综合来看，取食水稻叶的种群重新转移为害玉米后不会影响其在玉米上的种群增长速率；水稻虽不是草地贪夜蛾的最适寄主，但草地贪夜蛾从玉米转移至水稻后仍具有逐渐适应取食并为害水稻的潜力。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
杨露 汤勇 张政兵 林宇丰 贺华良 丁文兵 邱林 李有志
为评估草地贪夜蛾从玉米转移为害水稻的风险，将室内以玉米叶继代饲养10代以上的草地贪夜蛾初孵幼虫分别饲喂玉米叶和水稻叶，其后代为CnC1和CnR1;Cn R1组用水稻叶继代饲养8代后再分为2组，一组继续饲喂水稻叶并繁殖1代(CnR8R1)，另一组取食玉米并繁殖1代(CnR8C1)，分别观察、记录这4个种群幼虫的历期，计算其存活率、繁殖力，测定其营养效应和中肠消化酶活性。结果表明：CnC1组的幼虫历期最短(17.46d)，而CnR1幼虫历期最长(23.24d)，这两者间差异显著；Cn R1组存活率显著低于其他处理组；CnC1组单雌产卵量最高(693粒)，CnR1组的单雌产卵量最低(384粒)；CnR1组和CnR8R1组幼虫的相对取食量均显著低于CnC1组和CnR8C1组的；4个处理组间幼虫食物利用率和转化率的差异不显著；寄主转换过程中幼虫中肠的胃蛋酶活性的差异显著，但脂肪酶和淀粉酶活性的差异不显著。由此可见，从幼虫的存活率、繁殖力、营养效应、中肠消化酶活性综合来看，取食水稻叶的种群重新转移为害玉米后不会影响其在玉米上的种群增长速率；水稻虽不是草地贪夜蛾的最适寄主，但草地贪夜蛾从玉米转移至水稻后仍具有逐渐适应取食并为害水稻的潜力。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
储小燕 张娅菲 朱雷 李玉 冯士彬 吴金节 王希春
[目的]本试验旨在研究自噬对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)诱导仔猪海马神经细胞损伤的影响。[方法]以不同质量浓度DON(0,125,250,500,1 000和2 000 ng·mL~(-1))处理对数生长期仔猪海马神经细胞24 h后,采用倒置显微镜、透射电镜观察DON对仔猪海马神经细胞形态和超微结构的影响;采用p EGFP-LC3质粒瞬时转染细胞,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白的分布情况;采用Western blot检测DON对仔猪海马神经细胞自噬标志性蛋白LC3的表达;通过添加自噬激活剂雷帕霉素(RAP)和自噬抑制剂氯喹(CQ)来升高和降低细胞的自噬水平,CCK-8法检测细胞的存活率。[结果]不同质量浓度的DON均可诱导细胞自噬,自噬水平随着DON浓度的增加先上升后下降,在1 000 ng·mL~(-1)时达到峰值。与对照组相比,DON可显著抑制细胞存活率并诱导细胞发生明显的形态学变化,并呈剂量依赖性;随着DON浓度的升高,细胞LC3-Ⅱ含量先上升后下降,1 000 ng·mL~(-1)时,LC3-Ⅱ含量最高,差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。与DON处理组相比,自噬水平的上升显著提高细胞活性(P<0.05),而自噬水平的下降显著降低细胞活性(P<0.05)。[结论]DON可以引起仔猪海马神经细胞自噬水平的上升,激活的自噬对DON导致的细胞损伤具有一定的保护作用。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘田田 蒋向 许晓东
【目的】研究苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(AcMNPV)晚期表达因子lef-10在宿主细胞Sf9中的时空表达及定位,为进一步研究lef-10的功能提供理论基础。【方法】利用不同的特异引物,通过PCR方法扩增lef-10及innateP-lef-10目的片段,将目的片段分别克隆到载体pTriEx-SP-GFP上,得到重组质粒pTriEx-lef10-GFP和pTriEx-innateP-lef10-GFP,经过双酶切检测构建载体。将重组质粒分别与Bacmid共转染Sf9细胞,用得到的重组病毒分别于4,8,16,24,36h再次感染宿主细胞;用激光共聚焦显微镜观察lef-10的表达及亚细胞定位情况。...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
吕亮 陈娇 郭志敏 吕为 陶佩文 吕惠红 潘哲群 常向前 万鹏 张舒
为明确苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒(Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus, AcMNPV)对草地贪夜蛾幼虫的防治效果,采用室内生物活性测定、田间药效试验等方法,研究和分析AcMNPV对草地贪夜蛾幼虫的杀虫活性和生防效果,结果显示,AcMNPV对草地贪夜蛾2龄幼虫的LC_(50)=2.9×10~(7 ) PIB/mL;在田间,AcMNPV+Bt复配制剂1千万苜核·苏云菌悬浮剂(1 500 mL/hm~2)药后第10天的平均虫口防效为68.99%,而药后第15天的平均防效亦有66.87%,均对草地贪夜蛾幼虫表现出较好的防治效果。应用DNAMAN 6.0软件对试验后死虫样进行DNA同源比对鉴定,结果显示polh、lef-8和lef-9基因序列同源性均达到100%。以上结果表明AcMNPV对草地贪夜蛾幼虫有较好的控制作用。建议在草地贪夜蛾低龄幼虫发生高峰期施用1千万苜核·苏云菌悬浮剂,最好选择在晴天16:00-17:00使用,避开高温和光照等不利环境条件的影响,以使病毒制剂能更好地发挥作用,提高其防治效果。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
张丹 董前进 霍梁霄 宁素芳 赵倩 张万民 屈丽莉 孟威 周金成 董辉
草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)是一种原产于美洲的重大入侵性害虫,主要为害玉米等粮食作物。辽宁省是我国东北玉米主产区之一,开展对草地贪夜蛾的监测预警事关东北地区秋粮生产安全。通过形态和分子鉴定发现2020年有扩散至辽宁省的草地贪夜蛾成虫。Tpi基因序列比对结果显示此次在辽宁省发现的草地贪夜蛾为玉米型种群。8月10日～10月24日间,辽宁省共6个地级市的11个县级行政区41个乡镇先后确认发现雄蛾共计551头。其中,丹东市东港市15个乡镇累积发现草地贪夜蛾369头,宽甸满族自治县发现雄蛾5头;大连市庄河市9个乡镇发现雄蛾87头,瓦房店市4个乡镇发现雄蛾40头,普兰店区3个街道发现雄蛾36头;除丹东市和大连市外,朝阳市发现雄蛾5头,葫芦岛市发现雄蛾3头,盘锦市和沈阳市各发现雄蛾2头。此次草地贪夜蛾入侵辽宁,恰逢2020年第4号台风黑格比、第8号台风巴威、第9号台风美莎克和第10号台风海神先后影响东北地区,推测台风是草地贪夜蛾扩散至辽宁的诱因。丹东市东港地区南部的退海平原地带北部为辽东丘陵和长白山南麓,当地地理环境形成的垂直气流和降雨可能是草地贪夜蛾降落于当地的重要原因。本研究首次报道了草地贪夜蛾成虫在秋季可迁入辽宁省以及迁入蛾量的动态趋势,为明确草地贪夜蛾迁移扩散到东北地区的规律提供了第一手资料。
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
彭蓉 孙晓燕 王一凡 方艺瑄 姜子琪 刘思捷 蔡林汝 刘凯于
草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)是鳞翅目夜蛾科灰翅夜蛾属的一种蛾，是联合国粮农组织预警的世界性重大农业害虫.其幼虫可危害水稻、甘蔗和玉米等多种农作物，导致严重的经济损失.自2018年年末大举入侵中国以来，对我国农业造成了巨大的危害.该文分别从理化诱控、化学防治、生物防控、农业防治和综合治理五个方面，对目前国内外现行的草地贪夜蛾防治方法进行了综述和比较，并分析了各种防治方法的利弊.该文还指出今后应加快生物防治新方法的设计与筛选，做到研究与防治并行，进一步构建和完善综合防治体系，并结合农业种植模式的调整优化，争取早日实现草地贪夜蛾的绿色高效可持续治理目标，促进农业与生态可持续发展.
[期刊] 华北农学报
[作者]
温立斌 王凤芝 何孔旺 解建平 贾化生
旨在探讨类猪圆环病毒P1感染对PK15细胞自噬的影响。将同一批PK15细胞分成对照组和感染组,感染组在类猪圆环病毒P1感染PK15细胞后14,24,48 h分别收集细胞,对照组也在同样时间收获,用透射电镜观察自噬现象的发生。结果表明,与对照组相比,感染组PK15细胞内出现典型自噬形态学变化。揭示类猪圆环病毒P1能诱导PK15细胞发生自噬,但细胞发生自噬的相关信号传导通路还有待进一步研究。
关键词：
类猪圆环病毒P1 PK15细胞 自噬
[期刊] 林业科学研究
[作者]
亓倩 于淑惠 孙涛 王雪庆 刘博文 杨璞 陈晓鸣
［目的］本研究欲利用Ｂａｃ－ｔｏ－Ｂａｃ表达系统，在Ｓｆ９细胞中表达ＷＳ。［方法］将ＷＳ编码序列克隆到质粒ｐ ｆａＳｔＢａｃ～（ｔＭ）Ｈｔ Ｂ后，转化大肠杆菌ＤＨ１０Ｂａｃ～（ｔＭ），经抗性和蓝白斑筛选，获得重组杆粒ｒ ＢａｃＭｉＤ／ＥｐＥｌ ＷＳ。将ｒ ＢａｃＭｉＤ／ＥｐＥｌＷＳ转染Ｓｆ９细胞。［结果］免疫荧光标记检测表明：ＷＳ在受感染细胞的细胞质中表达。［结论］本研究成功表达了白蜡虫ＷＳ，为白蜡虫ＷＳ的生化特性研究奠定了基础。
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