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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
夏慧敏 黄珺 郑敏琳 陈湜 陈家骅
尝试利用全式金生物技术有限公司的TransDirect Animal Tissue PCR Kit~?试剂盒对整头茧蜂标本DNA进行提取,通过缩短浸泡时间和热激时间、优化取虫工具且试验后试虫经纯水漂洗2次以上,无损提取了实验室液浸标本及超过20年的针插干标本的DNA.使用微量分光光度计测定了所得的DNA样品在260和280 nm波长下的光密度值,验证了DNA浓度和质量.用28S、COⅠ、16S和EF-1α的4对引物对提取的DNA样品进行PCR扩增,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测可得到单一、明显的条带,且通过测序进一步证明了序列的准确性.试验结果证明无损提取DNA的方法可行.
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭景伦 赵久然 辛景树 赵建宗 贾希海 田雷 律宝春
为了攻克利用DNA指纹技术进行玉米种子纯度鉴定中存在的技术难关,对玉米单株幼芽DNA快速提取 方法进行了研究,结果表明:利用新方法提取DNA,不用液氮、不用研磨、不用离心、不用沉淀,不用SDS、不用CTAB、 不用氯仿,并且提取的DNA不降解、完全可以满足利用SSR分子标记进行DNA指纹分析的需要。一个人提取100 株幼芽(1个检测样品)DNA只需30 min左右,1 d可以提取2000株幼芽(20个检测样品)的DNA,为DNA指纹技术 在玉米种子纯度及真伪快速鉴定中的广泛应用解决了关键性技术难题。
关键词：
玉米 单株幼芽 DNA提取
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
余仲东 曹支敏
对提取DNA“二球法”的一些步骤和提取成分进行了更新,使得PCR反应灵敏性显著增加。改进的 内容包括:(1)在有二钢珠和1．6 g／L Chelex的离心管中加入夏孢子,夏孢子可以来自带有风干寄主叶肉组织的夏 孢子堆;(2)在离心管中加入KOH而不是NaOH,然后剧烈斡旋30 min;(3)将离心管管底穿一小孔,套上一新离心 管,短暂离心甩出内容物。用该方法得到的DNA可用作ITS-nrDNA-PCR,RAPD和SSR的底物。同时,分析了 PCR扩增中提取上液的稀释倍数,发现RAPD和SSR扩增稀释倍数达到16倍以上有较好的反应结果。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
马蕾蕾 徐世昌 曹远银
本研究提出了一种提取植物种子DNA的快速、简便、有效的新方法。基本过程包括选取饱满植物种子3～5粒并研成细粉,用提取缓冲液提取、离心分离、异丙醇沉淀、TE缓冲液保存得到的DNA。结果表明:所获得的DNA浓度和质量均较高,经扩增与琼脂糖凝胶电泳后得到了非常清晰的DNA谱带,特别适合序列特征扩增区段(Sequence-CharacterizeAmplifiedRegion,SCAR)检测。
关键词：
快速DNA提取 植物种子 SCAR检测
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
冯典兴 刘广纯
以蛆症异蚤蝇为试材,提出一种盐酸胍结合NaCl的DNA快速提取新方法,并用随机引物对提取的DNA进行扩增。结果表明:该方法可以快速提取蚤绳幼虫、蛹、成虫及乙醇浸泡成虫的DNA。RAPD结果显示,该法提取的DNA能够满足蚤蝇分子生物学研究的需要。
关键词：
蚤绳 盐酸胍 基因组DNA
[期刊] 华北农学报
[作者]
雷开荣 石春焱 李明顺 李晓辉 李新海
在玉米分子标记辅助育种工作中,需要对大量群体的个体样本进行分子标记分析,其中DNA的高效快速提取是关键的技术环节。以异硫氰酸胍为主要提取试剂,结合使用组织研磨器(Qiagen Tissuelyser),建立了一种玉米叶片基因组DNA的快速提取新方法。利用此方法提取玉米叶片基因组DNA,具有使用药品少、操作步骤简单、快速、成本低、DNA质量稳定等优点,通常情况下每人每个工作日可以提取300个DNA样品。此DNA提取方法可有效地用于玉米分子标记分析。
关键词：
玉米 DNA提取 异硫氰酸胍 分子标记
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
田晔林 张党权 宋志丹 王文和 谷振军
干苔藓植物标本、多年保存苔藓植物标本等的基因组DNA提取是制约苔藓分子生物学研究的难题。本论文采用常规CTAB、高盐CTAB、改良CTAB、试剂盒、SDS法和快速提取法这6种方法来提取保存多年的苔藓标本干样的基因组DNA。结果表明,改良CTAB法是适于提取苔藓干样基因组DNA的最佳方法,提取的基因组DNA总量较多且杂质较少。进一步的ISSR分子标记实验结果表明,基于改良CTAB法所提取的苔藓标本基因组DNA能有效用于ISSR分子遗传学研究。
关键词：
苔藓 标本 DNA提取 基因组DNA
[期刊] 中国水产科学
[作者]
孔啸兰 陈作志 林琳 李纯厚 梁沛文
气候变化和人类活动胁迫致使许多海洋鱼类种群结构发生了显著变化。为了摸清鱼类种群结构对气候变化和人类胁迫活动的响应机理,利用福尔马林固定标本研究较早年代海洋鱼类DNA是一种有效的途径。为了解决福尔马林固定鱼类样本DNA提取质量差的难题,以福尔马林固定近50年的金线鱼(Nemipterus virgatus)标本为例,研究DNA提取过程中多个因素对DNA提取产量的影响。以取样部位、除甲醛处理、消化时间、抽提方法为考察因素,以DNA提取浓度为评价指标,通过SPSS软件设计L8(4×24)正交实验。结果,得到的最优处理组为:肌肉组织样品经GTE缓冲液浸泡与酒精梯度处理后,90℃水浴30 min,真空干...
关键词：
福尔马林 金线鱼 DNA提取 正交设计
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
许杰 戚大伟
为提高林木生长状态测量的准确性，克服传统测量方法的不足，从视差处理的角度出发，根据不同时间点采集到的树木图像信息，通过采取特征点提取方法，判断出一段时间内树木生长状态的变化情况。试验过程中，将待采集图像的树木上标出红色的矩形信息点，并利用双摄像机针对标出的特征点进行采集，然后将２幅树木图像进行对比研究，分别计算出在一定时间间隔内树木上信息点空间信息，从而确定该段时间内信息点的位置变化。试验结果表明：针对标定的信息点，传统测量方法在高度和粗度上数值相近，与林木生长实际不符；而基于视觉技术的测量，其测量结果与林木的实际增长过程是一致的，能够很好地实现对树木的无损测量研究，判断出树木的生长状态变化情．．．
[期刊] 西南农业学报
[作者]
和志娇 谭宏伟 徐中志 和加卫 程在全 和根强 董霞
在总结多种蜜蜂DNA提取方法的基础上,以酒精浸泡保存的东方蜜蜂为试材,发展了一种提取蜜蜂DNA的方法。用此方法提取蜜蜂DNA的OD260/280值显示产物纯度较高,能够被限制性内切酶完全酶切,取材少,时间短。用ISSR分子标记技术对其PCR扩增,可得到清晰的条带。用这种蜜蜂基因组DNA提取的改良方法所获的DNA数量和质量都很高,可用于各种分子生物学实验。
关键词：
蜜蜂 基因组DNA 提取方法
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
沈蔚 王家为 王林振 朱瑞芳 朱卫东 栾奎峰 杨龙
利用遥感手段快速准确地提取海岸线,是目前海洋科学研究、地形图测绘、海道测量、海岸带与海岛调查等工作的重要内容。本文以基岩海(岛)岸线为研究对象,在对机载LiDAR点云数据的存储格式、处理流程进行了分析后,基于平均大潮高潮面和激光反射强度,利用TerraSolid软件过滤LAS格式的LiDAR数据,初步获得海岛点云,随后引入Alpha Shapes模型算法自动提取海岛岸线并同步实现了噪音点的剔除。经与高分辨率卫星影像叠加对比分析,本文方法提取的海岛岸线平面精度较高,且具有良好的自适应性、速度快、稳定性高等特点,非常适合基岩海(岛)岸线提取与绘制。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
黄昊 程起群 郑将臣
为找到日本鲭(Scomber japonicus)、澳洲鲭(S.australasicus)和羽鳃鲐(Rastrelliger kanagurta)这三种鲭科鱼类鉴别的新标记,采用形态框架等形态分析方法和线粒体标记的方法开展研究。共分析采自海南的33 ind样本,其中日本鲭19 ind,澳洲鲭9 ind,羽鳃鲐5 ind。形态判别分析显示,利用2个可量参数(体高和眼径)或者3个框架参数[D(2-3)、D(3-5)、D(2-4)]构建的判别公式均能鉴别这三种鲭科鱼类,判别准确率均为100%。通过PCR扩增和测序,获得三种鲭科鱼类的线粒体细胞色素b(Cytb)和控制区(D-loop)序列。经对位排...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
柳晓利 董辉 丛斌 张柱亭 冮爽
为了探明有效的基因组DNA提取方法和PCR反应体系,从而得到符合分子生物学实验要求的基因组DNA模板的数量和质量,以单头松毛虫赤眼蜂为材料,应用CTAB法、SDS法和Chelex法进行基因组DNA提取效果的比较,并将核酸助沉剂用于赤眼蜂DNA的提取中,然后将提取的基因组DNA采用L16(45)正交设计试验,对影响赤眼蜂基因组DNA PCR反应体系的5因素(Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、DNA模板、Taq聚合酶)4水平进行筛选。结果表明:CTAB法优于SDS法和Chelex法,且核酸助沉剂的加入明显增强了模板DNA提取效果。同时确立的ITS2的PCR优化反应体系为:总体积为25mL,M...
[期刊] 统计与决策
[作者]
秦德智 ,刘新卫 ,高明成 ,刘鹏
[期刊] 国际经济评论
[作者]
安妮·克鲁格 欧阳洁 王立荣 张艳花
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