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[期刊] 西南农业学报
[作者]
许恬 黄大明 李蓉 黄怡婷 李杏蔚 张磊 覃茜
【目的】明确造成南宁植物园青秀山苏铁园内苏铁叶片干枯的病因，研究防治手段，为有效保护苏铁种质资源提供理论基础。【方法】采集不同发病苏铁植株上的枯萎叶片样本113个，使用平板培养及稀释分离法将病原真菌进行分离纯化，通过柯赫氏法则测定分离菌株致病力，依据形态学及分子生物学鉴定等手段对所获得分离株进行物种鉴定，选取代森锰锌、啶氧菌酯、苯甲·丙环唑、苯甲·嘧菌酯、氟菌·肟菌酯、氯氟醚·吡唑酯和百菌清等7种杀菌剂对病原菌进行室内药效试验。【结果】通过对枯萎组织的微生物分离纯化，共获得72株分离菌株，经ITS序列分析发现分别来自炭疽菌属、镰刀菌属、链格孢菌属、拟盘多毛孢属、叶点霉属、黑孢霉属、枝孢菌属、球毛壳菌属、炭团菌属、炭角菌属、葡萄座腔菌属、曲霉属及小新壳梭孢属等13个不同属。对其中的真菌进行致病力测定发现，镰刀菌属的GX2210菌株经针刺接种到苏铁羽片会产生枯萎病斑；进一步采用CaM、bTUB、RPB2和TEF1a基因序列分析，确定该菌株为变红镰孢菌（Fusarium incarnatum）；药效试验显示，代森锰锌是抑制该菌株的最有效药物，抑制中量（ID_(50)）为0.3577 mg/L。【结论】造成南宁植物园苏铁叶枯病的病原菌为变红镰孢菌。代森锰锌对变红镰孢菌具有较好的抑制作用，可考虑用于苏铁叶枯病防治。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
任晓凤 刘苗 周倩 杨华
2021年春季，从湖南省怀化市中方县正清制药青风藤基地和湖南农业大学试验基地分别采集青风藤叶枯病病叶，利用组织分离法获得病原菌，并进行柯赫氏法则验证。借助形态学鉴定和分子系统学分析，明确青风藤叶枯病病原为交链隔孢(Alternaria alternata)。利用菌丝生长速率法对5种药剂(95%苯醚甲环唑、98%咪鲜胺、96%己唑醇、96.5%丙硫菌唑、98%嘧菌酯)进行筛选，结果显示95%苯醚甲环唑抑菌效果最好，EC_(50)为0.043 6 mg/L;98%嘧菌酯抑菌效果最差，EC_(50)值为8.447 3 mg/L。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
任晓凤 刘苗 周倩 杨华
2021年春季，从湖南省怀化市中方县正清制药青风藤基地和湖南农业大学试验基地分别采集青风藤叶枯病病叶，利用组织分离法获得病原菌，并进行柯赫氏法则验证。借助形态学鉴定和分子系统学分析，明确青风藤叶枯病病原为交链隔孢(Alternaria alternata)。利用菌丝生长速率法对5种药剂(95%苯醚甲环唑、98%咪鲜胺、96%己唑醇、96.5%丙硫菌唑、98%嘧菌酯)进行筛选，结果显示95%苯醚甲环唑抑菌效果最好，EC_(50)为0.043 6 mg/L;98%嘧菌酯抑菌效果最差，EC_(50)值为8.447 3 mg/L。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
贾丹 孔令富 严晖 戴春祥 胡青 高宇
【目的】查明引起瓦氏黄颡鱼(Pelteobagrus vachelli)出现大量死亡的病原和指导规范用药。【方法】从患病鱼肝脏中分离得到大量优势生长的细菌,分析了分离菌株的形态特征和生理生化特性,同时克隆了菌株16S rRNA和主要粘附素基因(Mah)序列。【结果】分离菌株与嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)16S rRNA序列在系统进化树上聚类为一支(bootstrap 93),序列相似性为99.5%;Mah基因与嗜水气单胞菌菌株WC10-1相似性为99.7%。结合菌株生理生化特征和相关基因序列,初步判定该致病菌为嗜水气单胞菌。回归感染实验表明,人工感染病鱼出现与自然发病相同的病症,且再次从肝脏和肾脏中分离到与自然发病相同的细菌。药敏试验结果表明,该致病菌对盐酸环丙沙星、诺氟沙星、噁喹酸3种抗生素敏感;对氨苄青霉素、磺胺嘧啶、新诺明、甲砜霉素4种药物不敏感。【结论】嗜水气单胞菌是引起云南省养殖瓦氏黄颡鱼死亡的病原菌;可考虑将盐酸环丙沙星、诺氟沙星、噁喹酸作为防治瓦氏黄颡鱼嗜水气单胞菌引起相关疾病的药物。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
冯兴浪 丁戈野 张秋实 侯金亮 刘智明 陈中元 向建国 肖调义 李军华
从湖南省醴陵市某大口黑鲈工厂化养殖场患烂身病大口黑鲈体表溃疡处分离得到1株病原菌MS315509，经形态学与分子生物学鉴定，该分离菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。人工感染结果显示，MS315509对大口黑鲈鱼苗的半数致死剂量为5.47×10~(7 )cfu/mL；MS315509携带细胞兴奋性肠毒素基因(alt)、细胞毒性肠毒素基因(act)和黏附素基因(aha1) 3种毒力基因。采用12种抗生素与12种中草药对菌株MS315509进行药物敏感性试验，结果表明MS315509对庆大霉素和头孢拉定等抗生素和石榴皮、苏木和五倍子等中草药高度敏感，对四环素、头孢唑啉、卡那霉素、苯唑西林、恩诺沙星、青霉素、强力霉素、链霉素抗生素和黄连、艾叶和熟地黄等中草药耐药。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
冯兴浪 丁戈野 张秋实 侯金亮 刘智明 陈中元 向建国 肖调义 李军华
从湖南省醴陵市某大口黑鲈工厂化养殖场患烂身病大口黑鲈体表溃疡处分离得到1株病原菌MS315509，经形态学与分子生物学鉴定，该分离菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。人工感染结果显示，MS315509对大口黑鲈鱼苗的半数致死剂量为5.47×10~(7 )cfu/mL；MS315509携带细胞兴奋性肠毒素基因(alt)、细胞毒性肠毒素基因(act)和黏附素基因(aha1) 3种毒力基因。采用12种抗生素与12种中草药对菌株MS315509进行药物敏感性试验，结果表明MS315509对庆大霉素和头孢拉定等抗生素和石榴皮、苏木和五倍子等中草药高度敏感，对四环素、头孢唑啉、卡那霉素、苯唑西林、恩诺沙星、青霉素、强力霉素、链霉素抗生素和黄连、艾叶和熟地黄等中草药耐药。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
汤小美 林天元 周珊珊 李国凤 刘普 叶振风 吴中营 王东升 朱立武
[目的]为了明确黄河故道地区造成梨树根腐病的病原菌的种类,研究18种常用杀菌剂对该病原菌的抑制效果。[方法]通过对梨树根腐病发病根系样品病原菌的分离和单孢纯化,根据代表性菌株形态学观察、rDNA-ITS序列分析和致病性试验,进行病原菌的种类鉴定,对菌丝生长和孢子萌发有效抑制的化学药剂进行筛选,并对部分药剂进行田间防效试验。[结果]从发病根系样品中分离纯化得到4个菌株,经形态学和rDNA-ITS序列分析,鉴定为同一致病菌;结合致病性试验结果,确定该致病菌是腐皮镰刀菌(Nectria haematococca
关键词：
梨树 根腐病 病原菌 鉴定 杀菌剂 筛选
[期刊] 淡水渔业
[作者]
肖克宇 江为民 金燮理
报道了鳖烂嘴病并从患病鳖的溃烂嘴部及肝脏分离到３株细菌，人工感染试验证实为病原菌，经形态和生理生化试验鉴定均为奇异变形杆菌（Ｐ．ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）。该菌的主要特性为菌体杆状，革兰氏染色阴性，周生鞭毛。尿酶、苯丙氨酸脱氨酶、硝酸盐还原、鸟氨酸脱羧酶、酪氨酸变透明、葡萄糖产酸和产气、木糖产酸等为阳性。氧化酶、吲哚产生、甲基葡萄糖产酸，麦芽糖产酸等为阴性。对硫酸庆大霉素、卡那霉素、痢特灵等药物高度敏感。
关键词：
鳖,烂嘴病,奇异变形杆菌
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王小秋 葛礼姣 仇亮 翟彩娇 王广达 宋益民 程玉静
从发病严重田块采集蘘荷叶枯病病叶，采用组织分离法进行病原菌分离、纯化，获得代表性致病菌株RH–1，对RH–1进行鉴定，并测定其生物学特性。结合病原菌形态学特征和分子生物学鉴定，构建真菌内转录间隔区(ITS)、β–微管蛋白基因(β–Tubulin)和TEF–1α系统发育树，鉴定该菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。分别在温度(5、10、15、20、25、30、35℃)、pH(4、5、6、7、8、9、10)和光照时间(连续光照、连续黑暗、12h光照/12 h黑暗、24 h光照/24 h黑暗)条件下用PDA培养基培养RH–1，结果在30℃、pH 9和连续光照下菌丝生长较快。分别用葡萄糖、α–乳糖和麦芽糖以及酵母膏、牛肉膏、(NH4)_2SO_4、NH_4Cl、蛋白胨和NH_2CH_2COOH等量替代Czapek基础培养基中的碳源和氮源，发现菌丝生长的较适碳源为葡萄糖或麦芽糖，最适氮源为牛肉膏或蛋白胨。将RH–1分别接种于红蘘荷和绿蘘荷，发现绿蘘荷的抗病性强于红蘘荷的。
关键词：
蘘荷 病原菌 尖孢镰刀菌 生物学特性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王小秋 葛礼姣 仇亮 翟彩娇 王广达 宋益民 程玉静
从发病严重田块采集蘘荷叶枯病病叶，采用组织分离法进行病原菌分离、纯化，获得代表性致病菌株RH–1，对RH–1进行鉴定，并测定其生物学特性。结合病原菌形态学特征和分子生物学鉴定，构建真菌内转录间隔区(ITS)、β–微管蛋白基因(β–Tubulin)和TEF–1α系统发育树，鉴定该菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。分别在温度(5、10、15、20、25、30、35℃)、pH(4、5、6、7、8、9、10)和光照时间(连续光照、连续黑暗、12h光照/12 h黑暗、24 h光照/24 h黑暗)条件下用PDA培养基培养RH–1，结果在30℃、pH 9和连续光照下菌丝生长较快。分别用葡萄糖、α–乳糖和麦芽糖以及酵母膏、牛肉膏、(NH4)_2SO_4、NH_4Cl、蛋白胨和NH_2CH_2COOH等量替代Czapek基础培养基中的碳源和氮源，发现菌丝生长的较适碳源为葡萄糖或麦芽糖，最适氮源为牛肉膏或蛋白胨。将RH–1分别接种于红蘘荷和绿蘘荷，发现绿蘘荷的抗病性强于红蘘荷的。
关键词：
蘘荷 病原菌 尖孢镰刀菌 生物学特性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王一光 林羽 陈方永 杨小平
为了查明浙江省温州市瑞安大面积杨梅枝条枯死的主要原因,采用组织分离法对枯死的杨梅枝条进行病原分离,获得1种主要真菌分离物HN01。根据分离物的培养性状、孢子大小,结合显微镜检测和分子生物学ITs序列测定,该菌株被鉴定为聚多拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sydowiana)。对菌株进行柯赫氏法则验证,证明聚多拟盘多毛孢是导致杨梅枝条枯死的病原菌。筛选4种杀菌剂对该病原菌进行室内毒力测定,结果50%咪鲜胺可湿性粉剂的防效较好,EC50值为1.21mg/L。
关键词：
杨梅 拟盘多毛孢 ITs序列 室内毒力
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王一光 林羽 陈方永 杨小平
为了查明浙江省温州市瑞安大面积杨梅枝条枯死的主要原因,采用组织分离法对枯死的杨梅枝条进行病原分离,获得1种主要真菌分离物HN?01。根据分离物的培养性状、孢子大小,结合显微镜检测和分子生物学ITs序列测定,该菌株被鉴定为聚多拟盘多毛孢(Pestalotiopsis sydowiana)。对菌株进行柯赫氏法则验证,证明聚多拟盘多毛孢是导致杨梅枝条枯死的病原菌。筛选4种杀菌剂对该病原菌进行室内毒力测定,结果 50%咪鲜胺可湿性粉剂的防效较好,EC50值为1.21 mg/L。
关键词：
杨梅 拟盘多毛孢 ITs序列 室内毒力
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张桓桥 商宝娣 赵凤 周贤君 张效平 李小义 孔杰 杨星 陶莎
为探明昆明裂腹鱼(Schizothorax grahami)患"溃疡病"的致病原理,本研究在无菌条件下从患病昆明裂腹鱼体表溃烂处、肝脏与肾脏组织中分离、纯化病菌,采用形态学观察、生理生化特性鉴定及16S rDNA、dnaJ、cpn60等基因的序列分析进行细菌种类鉴定,通过回归感染确定其致病性,并以K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果显示:自患病昆明裂腹鱼分离纯化获得形态大小均一的细菌菌落,随机选取肾脏分离细菌(BL61C)作为试验菌;形态学观察、生理生化特性鉴定及基因序列分析结果显示菌株BL61C为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii);健康昆明裂腹鱼回归感染BL61C后的发病特征与自然病例一致,并从组织中再次分离到同种致病菌,表明维氏气单胞菌BL61C是引起本次昆明裂腹鱼溃疡病的致病菌,半数致死浓度(LC_(50))为5.09×10~7 CFU/mL;药敏试验结果表明分离菌对大观霉素、阿奇霉素、氧氟沙星、氯霉素、氟苯尼考、头孢他啶、头孢克肟和头孢噻肟等8种药物敏感,对克拉霉素、制霉菌素、四环素等20种药物耐药。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李雪玲 谢美华 杨海艳 陈华红 闫俊梅 王振吉 范树国
从高山榕发生叶枯病的病叶上分离到一株真菌，菌株编号记为ＣＸ００２１Ｄ４。利用传统的形态学观察与现代分子生物学技术相结合的方法，并依据其形态特点与培养性状进行了初步研究。结果表明，病原菌为丝孢纲（ＨｙｐＨｏｍｙＣｅｔｅｓ）瘤座孢目（ｔｕｂｅｒＣｕｌａｒｉａｌｅｓ）瘤座孢科（ｔｕｂｅｒＣｕｌａｒｉａＣｅａｅ）镰刀菌属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｌｉｎｋ）层生镰孢菌。该菌对营养要求不高，碳源和氮源均能利用，最佳碳源和氮源分别为葡萄糖和牛肉膏。该菌对温度和ｐ Ｈ值的适应范围均较广，２５～２８℃菌丝生长速度最快，２８～３０℃之间孢子萌发率最高；适宜孢子萌发的ｐ Ｈ值为７．０～８．０，弱碱性更利于孢子萌发；有无光．．．
关键词：
高山榕 叶枯病 病原鉴定 生物学特性
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
冯晓晓 施斌 陈恩磊 王国荣 吴慧明 郑永利
该研究对2020年浙江设施栽培的番茄进行病害调查，利用柯赫氏法则进行病原菌的致病性测定，采用形态观察、革兰氏染色法、脂肪酸含量测定及16Sr RNA-gyr B-rpoB-rpo D四基因联合系统发育分析等方法对分离的病原菌进行种属鉴定，并进行药剂室内毒力测定。该研究表明番茄髓部坏死病有明显的发病中心，设施大棚中易传播扩散；经形态学、生理生化和分子鉴定等方法确认该病原菌为绿黄假单胞菌（Pseudomonas viridiflava）；中生菌素对番茄髓部坏死病菌的抑制效果较好，其EC50仅0.106 mg/L，是较为理想的杀菌剂。
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