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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 黄衍章  李世广  王转红  
采用半人工饲料混药法,观察了苏云金芽孢杆菌对初期性储粮害虫印度谷螟Plodia interpunctella(Hbner)幼虫生长发育的影响。结果表明:苏云金芽孢杆菌对印度谷螟幼虫的毒杀作用并不明显,当苏云金芽孢杆菌剂量≤20000IU/g时,处理7d后对印度谷螟幼虫的毒杀率与对照没有显著差异;当苏云金芽孢杆菌剂量≥2500IU/g时,其对印度谷螟的化蛹和羽化均表现出明显的抑制作用。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 马自杰  张婉婷  廖美德  
【目的】本文明确了添食枯草芽孢杆菌对斜纹夜蛾生长发育及中肠消化酶活力的影响。【方法】将枯草芽孢杆菌菌悬液分别配制成单位饲料含菌量分别为6×10~8,6×10~6和6×10~(4 )cfu/g的含菌饲料,以不含菌的人工饲料作为对照(CK)。然后,将待测幼虫在初生阶段从正常饮食中转移到不同含菌量饮食中,连续喂食直至化蛹,并对斜纹夜蛾幼虫消化酶活力等指标进行测定统计。【结果】斜纹夜蛾幼虫在取食不同含菌量人工饲料下均能正常完成世代发育,但对其世代总历期有一定延滞效应;取食单位饲料含菌量为6×10~6cfu/g人工饲料幼虫相对取食率虽显著低于其余各组,但其食物转化率和食物利用率却显著高于其余各组;取食单位饲料含菌量为6×10~8cfu/g人工饲料幼虫相对生长率和近似消化率显著低于对照(CK)组,但其余各组之间差异不显著;此外,四龄幼虫蔗糖酶活力与其取食单位饲料含菌量成正比;取食单位饲料含菌量为6×10~6cfu/g人工饲料幼虫化蛹率以及蛹羽化率最高,虫/蛹重最重,单雌产卵量也最大。【结论】单位饲料含菌量为6×10~6cfu/g人工饲料对斜纹夜蛾幼虫具有较好的取食适合度。
[期刊] 华北农学报  [作者] 胡晓婷  宋健  王容燕  杜立新  曹伟平  王金耀  冯书亮  
为了发掘新的Bt资源,从3种不同土壤类型的样品中分离得到了285株苏云金芽孢杆菌菌株。采用杀虫活性测定方法从中获得了13株对铜绿丽金龟幼虫具有高毒力的菌株。利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE蛋白分析法,研究了这13株苏云金芽孢杆菌的杀虫晶体蛋白基因类型和晶体蛋白表达情况。结果显示,有12株均含有编码毒杀铜绿丽金龟幼虫毒素蛋白的cry8Ca基因,而FTL53没有鉴定到已有的基因类型。这13株菌的伴孢晶体都含有分子量为130 kDa的蛋白。本研究为不断发现新型的、具有高毒力的cry毒素基因奠定了基础。
[期刊] 华北农学报  [作者] 宋健  曹伟平  王金耀  冯书亮  杜立新  
为明确磁处理水对苏云金芽孢杆菌生长的影响,用恒定磁场处理的磁化水配制液体培养基进行苏云金芽孢杆菌菌株的培养,结果表明,在28~50 Gs磁场强度处理水可以提高G-02菌株的产孢量,G-02在43 Gs磁场强度处理水配制的培养基中产孢量最大,达到6.1×108孢子/mL,比对照提高了11%;在7~43 Gs磁场强度内处理水可以提高HD-1菌株的产孢量,HD-1磁场强度处理水配制的培养基中在14 Gs产孢量最大,达到6×108孢子/mL,比对照提高了28%。在43 Gs处理2~12 h的磁处理水可以提高G-02菌株的产孢量,而在14 Gs处理2~14 h的磁处理水可以提高HD-1菌株的产孢量。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 胡逸超  雷薇  孙建生  李季刚  邹克兴  苏赞  梁伟  蔡联合  陈琦  邹承武  
【目的】明确一株具有烟草甲幼虫毒杀作用苏云金芽孢杆菌在蜡样芽孢杆菌群中的进化关系,并对该菌株所携带的cry基因进行鉴定,为其在农业上的开发应用提供参考依据。【方法】对苏云金芽孢杆菌GXZY032菌株的16S rRNA和gyrB基因序列进行PCR扩增测序,并进行相应的进化树分析;使用PCR技术对GXZY032菌株基因组所包含的cry杀虫基因进行鉴定。【结果】菌株GXZY032的16S rRNA序列经PCR扩增得到1.5 kb片段,在进化树中以较低的置信值与多个BtII群菌株聚到一起。gyrB基因序列经PCR扩增并测序得到1.2 kb片段,所构建的进化树有6个置信值较高的分支,构成BtI、BtII、B.cereus I、BtIII、Bt+Bw和Bt+Ba 6个群,其中菌株GXZY032的序列与BtII群聚集一起,置信值为99%。对8种cry基因进行PCR鉴定,结果表明,菌株GXZY032包含cry1、cry2和cry10 3种类型cry基因。【结论】苏云金芽孢杆菌菌株GXZY032属于BtII群,具有cry1、cry2和cry10 3种类型cry杀虫基因。
[期刊] 华北农学报  [作者] 苏旭东  马雯  马晓燕  王雪静  李英军  檀建新  
采用温度筛选从云南省刁苓山土壤中分离得到一株伴孢晶体为长菱形的苏云金芽孢杆菌BSH-1。利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE对菌株所含cry基因类型和晶体蛋白的构成进行鉴定、分析,结果表明:菌株BSH-1具有的cry基因组合为:cry1Aa,cry1Ac,cry1Db,cry2Ab,cry1Ia,表达的晶体蛋白有130,70和56 kDa 3种,该蛋白对甜菜夜蛾具有较高杀虫活性,LC50为1.43 ng/mg。该菌株的基因组合类型对构建杀虫基因工程菌具有重要参考价值。
[期刊] 林业科学  [作者] 戴莲韵  
采用砂土管和滤纸片两种保藏方法,对分属31个亚种的61株有代表性的苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)经过1—23年保存后的菌体存活情况、形态特征及对林业主要害虫舞毒蛾(lymantriadispar)幼虫的杀虫活性进行了试验;并对苏云金芽孢杆菌5个亚种的标准菌株和保存不同年限后的11项生理生化特性及酯酶型进行了测定。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 戴经元  王波  罗曦霞  喻凌  詹学明  喻子牛  
对从中国20个省(区)采集的1542个土壤样品中分离的410株苏云金芽孢杆菌进行了血清学鉴定。结果表明,218株(53.2%)属于已知30个标准H-血清型中的15个H-血清型,即H1、H2、H3、H4、H5、H6、H7、H8、H13、H14、H15、H16、H17、H22和H26。其余的192株中,除175株为无鞭毛或自凝菌株无法进行血清学鉴定外,16株(3.9%)的H-抗原不与已知27个标准H-抗血清起交叉反应,其中有4株的H-抗血清也不与已知27个标准菌株的H-抗原起交叉反应;另一菌株无H-抗原,但其伴孢晶体和芽孢不分离,并连成长链状。这5个菌株生化反应也与H-血清型1-27的标准菌株不同...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 蔡亚君  彭可凡  戴顺英  高梅影  
从土壤中分离出几株广谱杀鳞翅目昆虫的苏云金芽孢杆菌。其中杀虫效果最好的1株C-33血清型为H5,产生近方形和菱形的伴孢晶体,含有cry1Aa、cry1Ab、cry1Ac、cry1C基因,产生144 kDa和77 kDa的晶体蛋白质。毒力生物测定证明C-33对棉铃虫及甜菜夜蛾有高毒力。对该天然广谱Bt菌株C-33进行了摇瓶发酵和小试发酵试验,结果表明其发酵性能良好。通过2L全自动罐发酵试验,优化了发酵培养基和发酵条件,发酵效价达到3400~3700 IU/μ1(棉铃虫)。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 张丽丽  李镇宇  李海林  韩瑞东  赵永利  
该文利用不同受害程度的油松针叶饲养油松毛虫幼虫,研究其对幼虫生长发育的影响.结果表明:油松毛虫取食受害松针后,营养指数都有所下降,尤其是取食受害50%的松针对幼虫影响最大,其取食量、排粪量最小,对食物的消化和利用指数较低,幼虫发育缓慢,死亡率增大,蛹重减轻,从而影响了油松毛虫的种群动态;取食受害25%和受害75%松针的幼虫的营养指数比较接近.同时深色型幼虫的营养指数较浅色型的高,死亡率较低,但在取食受害50%的松针后期,深色型幼虫的一些营养指数反而比浅色型的低.
[期刊] 中国农业科学  [作者] 陆慧慧  林志强  谭万忠  罗华东  鲜菲  毕朝位  余洋  杨宇衡  
【目的】分析并鉴定对马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)具强致病性的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CPB012菌株的杀虫基因型,为充分而有效地利用此生防菌奠定基础。【方法】CPB012菌株在LB培养基上30℃培养2—3 d,用苯酚品红进行晶体染色,观察伴孢晶体形态。cry1—cry10杀虫基因的检测选用技术成熟的PCR-RFLP(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism)法,即对某一类基因(如cry1、cry2…)保守区序列设计通用引物,并引入...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 陶玉贵  汤斌  黄伟  徐先炉  
采用以啤酒糟为主要原料进行压力脉动固态发酵苏云金芽孢杆菌的方法,研究了不同压力脉动及培养条件对生物农药毒力效价的影响。试验结果表明:压力脉动条件为低压0.05 mPa维持10 min,高压0.2 mPa维持30 min;最佳发酵条件为原料含水量58%、pH 8.5、温度28℃;生物农药的毒力效价可达7300 IU/mg。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李怡萍  梁革梅  仵均祥  陈豪  马康生  吴孔明  郭予元  
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白具有高度专一性,其只对靶标害虫有效,对天敌等其他昆虫无害,转Bt基因植物和Bt杀虫剂是目前世界上产量最大、应用最广泛的生物防治技术。通过对Bt的发现和分类、Bt的结构与功能、Bt毒蛋白的杀虫机理、昆虫对Bt的抗性机制及昆虫体内Bt受体蛋白与抗性的关系等研究现状的论述与分析,对Bt作物害虫抗性治理策略和前景进行了展望。
[期刊] 华北农学报  [作者] 杜立新  董明  王容燕  马铭泽  王金耀  曹伟平  宋健  冯书亮  
苏云金芽孢杆菌SHJ-5菌株是从黑龙江采集的土样中分离获得的新菌株,对其伴孢晶体形状、基因型、蛋白表达以及杀虫活性进行了系统研究。菌株SHJ-5产生的伴孢晶体形状为钝菱形;利用PCR-RFLP技术对该菌株的基因型进行鉴定,结果表明,该菌株含有cry1Aa、cry1Ea、cry1Be、cry1Ah、cry1Ai、cry2Ab、cry1i和vip3A基因;SDS-PAGE晶体蛋白检测结果显示,该菌株表达130~150 kDa和60 kDa大小蛋白;生物活性测定表明,菌株SHJ-5对棉铃虫和小菜蛾有较高杀虫活性,校正死亡率分别为100%和96.7%。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 李恩杰  李娜  王青华  张永安  王玉珠  曲良建  
[目的]探究伊氏杀线真菌与苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对松材线虫的联合毒力。[方法]使用Esteya vermicola孢子悬浮液与Bt发酵液处理松材线虫,通过线虫的形态变化、死亡率及死亡速度3个方面测定E.vermicola与Bt联合对松材线虫的影响。[结果]经过E.vermicola孢子悬浮液处理过的线虫会出现内容物渗漏,体腔收缩、弯曲、断裂的现象;高浓度的E.vermicola孢子悬浮液与Bt发酵液联合处理松材线虫可以明显地提高线虫的死亡率,最高可以达到100%;联合处理的线虫死亡速度较快,随着处理时间的延长,死亡率会一直呈上升的趋势。[结论]应用这两种生防微生物在合适的浓度下混配能够在较短时间内提高松材线虫的死亡率。
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