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[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 马良进  张立斌  崔永三  冯炎龙  
在用5种农药的不同浓度处理后的马铃薯+蛋白胨+葡萄糖+琼脂(PPDA)培养基上培养苏云金杆菌Bacillusthuringiensis,结果表明在农药释稀5000倍时,对苏云金杆菌的生长没有影响。而苏云金杆菌与5种农药按1∶1和3∶1比例混配后的杀虫效果试验表明,苏云金杆菌菌体浓度为1012个·L-1与绿植(稀释浓度5000倍)或虫螨杀星(稀释浓度5000倍)的混配杀虫效果最好。表2参5
[期刊] 华北农学报  [作者] 郭亚平  马恩波  任竹梅  范仁俊  薛锐  
应用苏云金杆菌乳剂对地下害虫细胸金针虫进行了初步的防治研究 ,并对死虫进行了菌体培养检测。结果表明 ,细胸金针虫对苏云金杆菌较为敏感 ,在室内饲养条件下设不同浓度梯度毒土接入健壮供试虫体 ,在 4 8~ 96h之内虫体死亡率达到最高 ,其中低龄幼虫更敏感。通过死虫分离菌体培养检测可以看出 ,虫体死亡确因感染苏云金杆菌所致。培养菌落及菌体涂片镜检可以观察到苏云金杆菌不同发育历期的形态变化。苏云金杆菌可以作为高效的微生物杀虫剂用于地下害虫金针虫的防治。
[期刊] 林业科学  [作者] 陈颖  韩一凡  李铃  田颖川  聂绍基  
本研究首先建立了美洲黑杨叶片外植体的再生系统,并利用Horsch等人1985年发明的叶盘法,将分别带有嵌合基因NPTII和1.8kb或2.1kbBt.基因的土壤杆菌LBA4404与美洲黑杨叶片共培养。采用30mg/l和50mg/l两种浓度的卡那霉素筛选转化子,约28天左右的时间,有不定芽从外植体切口处形成。两种卡那霉素浓度下共形成275个伸长芽,存活了187株。这187株分别进入卡那霉素30mg/l,50mg/l的生根培养基后,生根率分别为9.62%和8.02%。PCR反应证明部分植株已成功地进行了转化。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 王志英  孙丽丽  张健  曹传旺  
以苏云金杆菌和白僵菌为有效成分制成混配菌剂,采用高效小型粉碎机将筛选的助剂及原药混匀,在测定助剂对微生物活体的生物活性、制剂性能影响的基础上,进行混配菌剂助剂的筛选。通过生物测定筛选获得最佳混配比例,并将其加工成可湿性粉剂。结果表明:苏云金杆菌库斯塔克亚种和球孢白僵菌最佳混配质量比为3∶1,润湿分散剂为1%Morwet EFW、3%SDS、9%Morwet D425、9%TERSPERSE 2020;紫外保护剂为0.3%黄原胶,以凹凸棒土为载体补足100%。以此配方制备的混配菌剂的质量悬浮率72.73%,孢子悬浮率75.13%,润湿时间<1min,平均粒度为13.76μm。苏云金杆菌和白僵菌可...
[期刊] 华北农学报  [作者] 吴瑞华  李国勋  冯书亮  王容燕  王金耀  曹伟平  杜立新  陈丹  
苏云金杆菌是目前应用较广泛的生物杀虫细菌之一,其产生的杀虫蛋白毒素是主要的杀虫成分,目前对苏云金杆菌的毒力和杀虫蛋白毒素的检测主要采用生物测定、SDS-PAGE等方法,但这些方法的灵敏度较差。本文综述了酶联免疫吸附分析法在苏云金杆菌蛋白毒素检测中的应用,以及在检测中采用的ELISA的类型和基本原理,并对其应用前景进行了展望。
[期刊] 华北农学报  [作者] 冯静静  郭巍  刘廷辉  孙永祥  孙伟明  徐大庆  
克隆对鞘翅目害虫有毒力的B t新菌株GW S7的cry7Ab8基因,并对该基因进行表达和杀虫活性的研究。利用全长PCR方法克隆cry7Ab8基因,将cry7Ab8基因插入到表达载体pET28b,获得重组质粒pETcry7Ab8,转化E.coliBL21(DE3),诱导后表达130 kDa的蛋白。将cry7Ab8基因连接到大肠杆菌-苏云金杆菌的穿梭载体pSXY422b,获得重组穿梭质粒pScry7Ab8,电激转化到苏云金杆菌无晶体突变株HD73-(cry-),获得工程菌B ioHD7Ab8,表达蛋白后进行生物活性测定。生物活性测定结果显示Cry7Ab8蛋白对马铃薯瓢虫二龄幼虫有较强的杀虫活性,L...
[期刊] 华北农学报  [作者] 尹新明  郭线茹  贾新成  吴云汉  邱立友  
在含有Bt毒素的人工饲料中,通过加入碱性化合物提高其对昆虫中肠的作用,或加入蛋白酶激活剂、无机化合物和有机物来提高Bt的毒力效价。试验结果表明,加入碳酸钙、硫酸锌、氯化镁、苹果酸、马来酸、甲酸和巯基乙醇酸钠,可使Bt毒力效价分别提高095,122,037,045,117,2.10和90倍,其中加入硫酸锌、甲酸和巯基乙醇酸钠的增效效果较好。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 朱文  杨志荣  刘世贵  侯若彤  
采用石蜡组织切片和电镜超薄切片技术,对苏云金杆菌亚种B.t.7侵染蝗虫后,在宿主中肠组织的病理变化和细胞病理超微结构的变化进行了研究。结果表明,这株苏云金杆菌感染蝗虫18小时后,宿主中肠组织开始出现病变,48小时以后中肠上皮细胞开始溃烂。宿主中肠细胞器如线粒体、内质网、核糖体和细胞核等均有不同程度的病变,其中以线粒体病变最为严重,中肠细胞表面的微绒毛也有的呈现空泡状突起、脱落等病症表现。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王容燕  冯书亮  范秀华  曹伟平  胡明峻  
通过正交试验优选出对金龟子幼虫有杀虫活性的苏云金杆菌HBF 1菌株的发酵培养基组合为:氮源B4 4%,淀粉1 2%,酵母粉0.5%,KH2PO40.04%,MgSO40.05%。用此配方进行摇瓶发酵,发酵液的平均菌数可达到44亿/mL,晶体产生量为2 1130mg/mL,发酵液稀释50倍对铜绿丽金龟幼虫进行生测,14d平均死亡率达到78 3%。
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 钱华  吴蓉  柴希民  左小明  赵小立  
报道了苏云金杆菌注射处理马尾松毛虫5龄幼虫后对血淋巴抗菌物质的诱导效果、诱导动力学、抗菌物质的活性、抗菌的种类。结果表明,通过注射法可诱导马尾松毛虫幼虫产生抗菌物质,其活力高峰出现在诱导后42h。诱导后60h的血淋巴稀释100倍,对苏云金杆菌的溶菌活力仍达142×10-9mol·s-1。其抗菌物质对苏云金杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌等均有抑菌作用。
[期刊] 农业现代化研究  [作者] 费成煜  
通过发酵工艺条件研究,发现发酵菌数的高低并不能代表杀虫毒力高低。另外通过培养基浓度、培养基组成、培养温度和通气量试验,使发酵毒力效价从原来的1000IV/mg,平均提高到2200IV/mg,最高罐批达3800IV/mg,使苏云金杆菌制剂的质量有了较大提高。
[期刊] 林业科学  [作者] 张立钦  王满囷  刘进  李周直  
本文首次研究了苏云金杆菌(Bt) 油烟雾剂脉冲式烟雾载药技术。研究结果表明,Bt 菌粉柴油烟剂经过6HY- 25 型烟雾机后,仍保持活力;经纯化培养Bt 对家蚕毒力没有下降;Bt 烟雾直接对家蚕仍有致病力。经初步筛选,Bt 油烟雾剂所用油以0 号柴油为较好,Bt 菌粉在Bt 柴油烟雾剂中悬浮性好,烟雾化后Bt 存活力高,且能自然扩散;食用植物油次之,而100 号汽油对Bt 有杀伤作用。研究还发现,烟雾机喷药咀直径大小是影响Bt 存活的重要因素之一,4 号喷咀明显比2 号喷咀效果好。综上所述,脉冲式烟雾载药技术应用于Bt 生物农药的使用是可行的,这为生物农药施药方法提供了一条新的、简便的途径。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李怡萍  梁革梅  仵均祥  陈豪  马康生  吴孔明  郭予元  
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)杀虫晶体蛋白具有高度专一性,其只对靶标害虫有效,对天敌等其他昆虫无害,转Bt基因植物和Bt杀虫剂是目前世界上产量最大、应用最广泛的生物防治技术。通过对Bt的发现和分类、Bt的结构与功能、Bt毒蛋白的杀虫机理、昆虫对Bt的抗性机制及昆虫体内Bt受体蛋白与抗性的关系等研究现状的论述与分析,对Bt作物害虫抗性治理策略和前景进行了展望。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李国清  陈长琨  严焯辉  
根据敌百虫与苏云金杆菌 (Bt)混用具有显著增效作用的结果 ,分别用Bt 2 40mg·L-1,敌百虫 90mg·L-1和两者的混剂 (2 3mg·L-1敌百虫加 5 7mg·L-1Bt或 90mg·L-1敌百虫加 2 2 5mg·L-1Bt)处理棉铃虫 5龄幼虫 ,测定其对活体棉铃虫幼虫乙酰胆碱酯酶的影响。结果表明 :若以每个头部计算 ,Bt单用并不影响乙酰胆碱酯酶 ,但与敌百虫混用时 ,能增加敌百虫对乙酰胆碱酯酶的抑制作用。此外 ,Bt处理显著降低了幼虫头内蛋白质含量 ,处理后 1,2 ,3和 4d ,蛋白质含量分别是对照的 85 % ,79% ,73%和 72 %。基于以上结果 ,讨论了...
[期刊] 华北农学报  [作者] 宋萍  郭丽伟  苏俊平  王勤英  
苏云金杆菌XPZ-9菌株是从土壤中分离的对鳞翅目幼虫有特异杀虫活性的新菌株。光学显微镜下观察到该菌株可产生菱形和圆形伴胞晶体,SDS-PAGE检测表达的主要蛋白条带分子量约为70 kDa。PCR-RFLP分析结果表明该菌株含有新基因cry1Ah。生物活性测定表明该菌株对鳞翅目害虫棉铃虫、小菜蛾、亚洲玉米螟和美国白蛾的二龄幼虫都具有较强的杀虫活性。
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