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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
吴黎明 李曦 伍辉军 高学文
抗菌二肽溶杆菌素(Bacilysin)由L-丙氨酸残基和L-不典型的氨基酸抗荚膜菌素(Anticapsin)残基组成,是目前已知的芽胞杆菌合成的结构最简单的肽类抗菌物质之一。Bacilysin的作用靶标6-磷酸葡萄糖胺合成酶是微生物细胞壁合成关键酶,它对真菌和细菌都具有广谱的抗菌活性,因此,Bacilysin在农业和医药领域具有广阔的应用前景,近年来成为了天然产物的研究热点。本文综述了Bacilysin在生物合成途径及调控、抗菌功能和作用机制等方面的研究进展,提出Bacilysin在生产实践中存在的主要问题并展望了Bacilysin的研究趋势,以期为Bacilysin的研发和应用提供参考。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
曲晓旭 刘洪霞 高玲 陆兆新 吕凤霞 张充 赵海珍 别小妹
［目的］本文旨在建立一种利用ＰＣＲ技术鉴别抗菌脂肽类型和筛选抗菌脂肽产生菌的快速、准确、灵敏的方法。［方法］以枯草芽孢杆菌（ＢａＣｉｌｌｕｓ ｓｕＢｔｉｌｉｓ）、淀粉液化芽孢杆菌（Ｂ．ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａＣｉｅｎｓ）和多黏类芽孢杆菌（ＰａｅｎｉＢａＣｉｌｌｕｓ Ｐｏｌｙｍｙｘａ）的典型菌株为研究对象，针对几种代表性脂肽的合成酶基因设计特异性引物进行ＰＣＲ扩增，并通过测序法验证检测结果的正确性，推测芽孢杆菌生物合成抗菌物质的潜在能力。［结果］ＰＣＲ结果表明：所有检测菌株均具有ｓｕＲｆａＣｔｉｎ合成酶调控基因；除Ｐ．Ｐｏｌｙｍｙｘａ Ｊｓａ－９外，其他菌株均检测到ｆｅｎｇｙＣｉｎ合成酶基因的存．．．
关键词：
抗菌脂肽 芽孢杆菌 调控基因 检测
[期刊] 海洋渔业
[作者]
李金燕 王作春 徐嘉泉 田晓清 杨丽雯 俞晶 邵欧文 杨桥 张晓玲 杨希
为探究罗伊氏菌素对大肠杆菌抗菌活性的分子机制，本研究通过产罗伊氏菌素罗伊氏乳杆菌ATCC 55730的摇瓶发酵及甘油诱导制备获得罗伊氏菌素，比较了其在不同温度条件下的稳定性，并分析了其对8种标准病原菌的抗菌效果。利用大肠杆菌K-12全基因敲除文库Keio系统，对其抗菌活性功能基因进行了筛选，并探讨了其抗菌活性的分子机制。结果表明，菌株ATCC 55730经甘油诱导及发酵制备所罗伊氏菌素的浓度为26.13 mmol·L-1，其在不同温度条件下（-20 °C、25 °C及37 °C）均表现出良好的产物稳定性。罗伊氏菌素对5种亚型产气荚膜梭菌、沙门氏菌LT2、白色念珠菌及产肠毒素大肠杆菌K-88的最小抑菌浓度（MIC）分别为0.52～1.83、1.12、1.67及0.79 mmol·L-1。从Keio系统中筛选获得了60个罗伊氏菌素抗性基因及69个敏感基因，其中两个关联核心基因cyaA及yheS分别与细胞膜通道蛋白及药物外排泵形成有关。由此推测，上述两个通路可能是罗伊氏菌素抗菌活性的关键分子作用靶点。本研究为揭示罗伊氏菌素的抗菌机制并推动其实际应用提供了科学参考。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
马渝童 孟凡强 陆兆新
[目的]本试验旨在鉴定一株从自然环境中筛选的地衣芽胞杆菌（Bacillus licheniformis）JNBS001发酵产物中的抗菌物质，及其对大肠杆菌（Escherichia coli）、单增李斯特菌（Listeria monocytogenes）的抑菌活性和机制，初步探索其作为一种抗菌物质在食品防腐保鲜体系中的应用前景。[方法]对JNBS001进行全基因组测序，并预测次级代谢产物的合成基因簇，用LC-MS/MS进行非靶向鉴定；随后测定JNBS001发酵产物的抑菌活性和抑菌谱、发酵产物冻干粉对大肠杆菌和单增李斯特菌的最小抑菌浓度（MIC），并通过测定K~(+)和Ca~(2+)泄漏、碱性磷酸酶（AKP）活力、细胞膜通透性以及细胞形态观察分析JNBS001发酵产物的抑菌机制。[结果]测序结果表明JNBS001基因组全长3 914 347 bp，GC含量46.59%，共编码3971个基因，预测出13种次级代谢产物的合成基因簇，其中完整的、相似性100%的基因簇有7个；结合LC-MS/MS非靶向鉴定数据，确认了macrolactin H和bacilysin为JNBS001发酵产物中的抗菌物质；JNBS001的发酵产物对大肠杆菌、沙门氏菌（Salmonella）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、单增李斯特菌、阪琦肠杆菌（Enterobacter sakazakii）和藤黄微球菌（Micrococcus luteus）均有抑菌活性；其抑菌机制分析结果表明JNBS001的发酵产物改变了大肠杆菌和单增李斯特菌的细胞形态，增加膜的通透性，并使细胞内容物大量外渗，从而使细菌死亡。[结论]JNBS001发酵产物中的抗菌物质包含macrolactin H和bacilysin，其发酵产物具有广谱抑菌特性，且通过破坏细菌细胞膜、细胞壁结构的完整性实现抑菌。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陆兆新 孟凡强
植物乳杆菌素(plantaricin)是由多个氨基酸组成的多肽类抗菌素。它是一类重要细菌素,具有种类多、抑菌谱广、不易产生耐药性、安全性高等优点,因此在食品、饲料和医药等领域有潜在应用价值。然而,因植物乳杆菌素产量低而影响了其在食品和医药中的应用。本文从植物乳杆菌素种类、群体感应系统及植物乳杆菌素基因簇等方面介绍植物乳杆菌素诱导及调控的最新研究进展。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈武 彭曙光 周清明 黎定军 罗宽
采用75%乙醇沉淀、阴离子交换色谱层析和阳离子交换色谱层析等方法,分离并纯化侧孢芽孢杆菌(Bacillus laterospours)2-Q-9菌株外泌抗菌肽BL2Q9。结果表明,BL2Q9的相对分子质量为7 800,等电点为10.2。Edman降解测序发现其N末端封闭,串联质谱测序结果表明其与细菌第Ⅳ类鞭毛合成蛋白pilQ的前体蛋白以及转录抑制子CodY蛋白的部分序列相似,但与已知抗菌肽的序列相似性较低。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙力军 陆兆新 别小妹 吕凤霞 方传记
【目的】研究培养基对解淀粉芽孢杆菌ES-2菌株产生抗菌脂肽的影响,为选择合适的产抗菌脂肽的培养基提供指导。【方法】通过HPLC技术对培养基中的碳、氮源对ES-2菌株抗菌脂肽组分的影响进行试验。【结果】改进的Landy培养基抗菌脂肽产量较高;葡萄糖是ES-2菌株产生脂肽的良好碳源,特别是对surfactin的产生有明显的促进作用;蔗糖和乳糖也是产生fengycin的良好碳源;L-谷氨酸和L-天门冬酰胺是抗菌脂肽产生的良好氮源;而不同的氨基酸组合并不有利于抗菌脂肽的产生;实验结果还显示,6种脂肪酸对抗菌脂肽的产生起到抑制作用。【结论】改进的Landy合成培养基是ES-2菌株产生脂肽适宜的培养基,在...
[期刊] 华北农学报
[作者]
胡瑞萍 张铎 张丽萍 张根伟 张蕾 赵宝华
为了分离纯化及鉴定枯草芽孢杆菌BSD-2代谢产物中抗菌肽,采用盐酸沉淀、Sephadex G-50层析以及反相HPLC对其进行分离纯化,并利用Tricine-SDS-PAGE、MAIDL-TOF-MS、红外光谱和核磁共振技术对其分子量、氨基酸序列以及结构进行初步解析。结果显示该抗菌肽是由29个氨基酸组成,分子量为3 514 Da,等电点为10.46。红外光谱和核磁共振分析其结构中含有-CH2-、-CH3、-OH、-NH2、-CH、-CO-以及苯环等官能团。
[期刊] 水产学报
[作者]
张皎皎 马富平 李艳红 吴正理 姚维志
为优化嗜水气单胞菌拮抗菌——甲基营养型芽孢杆菌WM-1的发酵条件,获得抑菌物质产生的最佳培养基配方和培养条件,本实验以嗜水气单胞菌为指示菌,以发酵上清液的抑菌活性为检测指标,采用单因素和正交实验设计,对菌株WM-1的发酵条件进行优化。结果显示,菌株WM-1最适发酵培养基为可溶性淀粉1.0%、牛肉膏1.5%、硫酸镁0.07%、磷酸氢二钾0.05%;最佳发酵条件为初始pH 7.5、培养温度30°C、装液量20%、摇床转速210 r/min、培养时间48 h。在最适培养基和最佳发酵条件下,菌株WM-1发酵液抑菌圈直径达(22.5±0.50)mm,抑菌活性比优化前提高了40.6%。本研究为嗜水气单胞菌的防治提供了新的材料、为甲基营养型芽孢杆菌应用于嗜水气单胞菌的生物防控提供了理论基础。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
叶晶晶 曹宁宁 吴建梅 胡祚忠 张剑飞
作为一种理想的生防菌筛选对象,芽孢杆菌已引起人们的广泛关注。近年来,国内外对其各方面应用的研究日益增多。文章主要对芽孢杆菌的生防作用形式与机制、应用现状及存在的问题进行了综述,并对相关研究趋势进行了展望,以期进一步扩大其在新型生物农药研发中的应用前景。
关键词：
芽孢杆菌 生物防治 拮抗作用 作用机制
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李建洪 万秋英 王沫 姜锡权 喻子牛
为筛选对昆虫有高毒力的苏云金芽胞杆菌特异性菌株 ,从韩国不同地区土壤中筛选出两株对鳞翅目和双翅目昆虫具有杀虫活性的苏云金芽胞杆菌菌株 K980 5和 K990 3,它们分属于苏云金芽胞杆菌库斯塔克亚种和鲇泽亚种 ,形成典型的双金字塔型伴胞晶体 .两菌株不但对小菜蛾、甜菜夜蛾具有较高的生物活性 ,而且对双翅目昆虫致倦库蚊有毒 .K980 5含有 cry Aa,cry Ab,cry C,cry D和 cry 基因 ,K990 3含有 cry Aa,cry Ab,cry Ac,cry E和 cry 基因
关键词：
苏云金芽胞杆菌 新菌株 cry基因
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
宫安东 孔宪巍 翟新可 路亚南 文淑婷 张静柏
[目的]本文旨在筛选兼有溶磷和抑菌作用的微生物菌株,分析其在水体和土壤中的溶磷效果以及对植物生长的作用,同时分析其抑菌活性,鉴定其抑菌物质。[方法]采用稀释涂平板法,从茶园土壤中分离具有溶磷和抑菌作用的菌株WY8-7,通过形态学、生理生化和分子生物学分析,确定菌株WY8-7的分类地位;检测菌株WY8-7在土壤和培养液中对难溶性无机磷的降解作用;检测其对苗期玉米植株生长的影响;对峙培养法分析菌株WY8-7对不同病原真菌的抑菌作用;超高效液相色谱四级杆飞行时间质谱鉴定抑菌功能物质。[结果]经鉴定,菌株WY8-7为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis),在固体培养基、液体培养基和土壤中均可转化难溶性无机磷,提升可溶性磷含量;液体振荡培养20 d后,可溶性磷含量达512.77 mg·L~(-1),为对照的174倍;菌株WY8-7可提升土壤中可溶性磷含量,并促进苗期玉米的生长,与对照组相比,在叶长、叶宽、单叶叶面积、株高和鲜质量等指标均有显著增长(P<0.05),增长率分别达17.68%、22.08%、42.62%、20.34%和20.59%;质谱分析表明,菌株WY8-7可产生伊枯草菌素A和丰原素A两类抑菌物质,对3种真菌具有高效广谱抑菌作用,对禾谷炭疽菌的抑菌率最高,达87.34%。[结论]分离自茶园的枯草芽胞杆菌WY8-7,在土壤和液体振荡培养中可高效转化难溶性无机磷为可溶性磷,促进苗期玉米植株生长,同时WY8-7还可产生伊枯草菌素A和丰原素A两种脂肽类物质,抑制多种病原真菌生长。WY8-7具有高效溶磷和抑菌作用,为新型微生物菌肥的研发提供重要材料。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
张荣胜 刘永锋 刘邮洲 罗楚平 刘长河 李美荣 陈志谊
通过离子注入技术对枯草芽孢杆菌生防菌Bs-916突变选育,得到一株拮抗性能比出发菌Bs-916提高15%以上的突变菌株H-74。通过对其抗菌物质的高效液相色谱(HPLC)分析表明,H-74分泌的脂肽类抗菌物质主要是表面活性素。在PDA平板上的水稻纹枯病菌菌丝抑制试验中,它能有效抑制新生菌丝的生长,并使细胞内含物外泄。盆栽控病试验表明,它对水稻纹枯病菌的相对防效达到73.35%。将H-74分泌的脂肽类抗菌物质单喷于水稻植株上,测定与植物抗病相关的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的变化,发现其对植物抗病相关酶活性表达有明显的诱导作用。结果还显示同时接种脂肽类...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
向亚萍 陈志谊 罗楚平 周华飞 刘永锋
【目的】明确55株芽孢杆菌(Bacillus spp.)菌株对3个植物病原真菌(小麦纹枯病菌Rhizoctonia cerealis、小麦赤霉病菌Fusarium graminearum、西瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.niveum)抑菌活性及与其产生的脂肽类抗生素种类的定性定量关系。【方法】采用平板对峙培养分别测定55株芽孢杆菌活体菌及其脂肽类抗生素粗提物对3个真菌的抑菌活性;根据脂肽类抗生素合成相关基因序列srf A、itu A和fen A对55株芽孢杆菌进行PCR扩增;采用质谱及液相色谱分析55株芽孢杆菌脂肽类抗生素的种类、数量。【结果】55株芽孢杆菌菌株及其...
[期刊] 华北农学报
[作者]
王文夕 孔建 赵白鸽 程红梅 申效诚 张桂芬
枯草芽孢杆菌Ｂ－９０３菌株是从郑州果园中筛选出的，它代谢产生的抗菌物质对多种植物病原菌具有强抑制作用。通过对其抗菌物质产生条件的研究认为，在ＮＹＤＡ培养液中，培养液初始ｐＨ值为７时，最有利于抗菌物质的产生；振荡培养１１２ｈ，培养滤波的抑菌活性可达最大值；不同初始接菌量对抗菌物质的产生时间影响不大；在２５０ｍｌ三角瓶中，随装液量减少，培养液抑菌活性有增大趋势；大米粉和豆饼粉是最适合产生抗菌物质的碳、氮源；调节培养滤液ｐＨ值至４为抑菌活性物质最简便的保存方法，振荡培养１１２ｈ的培养滤液的最低抑菌浓度为稀释２３１８倍。
关键词：
抑菌物质,抗菌素,枯草芽孢杆菌
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