通过传统分离培养法从动物肠道分离得到112株芽胞杆菌,其培养物通过离心过滤后采用氨基酸全自动分析仪对分离得到的100多株芽胞杆菌进行上清氨基酸分析,采用打孔法测定芽胞杆菌对大肠杆菌O8株的抑制效果,通过紫外诱变和SG(2G氨乙基)GLG半胱氨酸筛选对菌株进行选育.结果发现,不同芽胞杆菌菌株产赖氨酸能力相差较大,其中产赖氨酸水平高、抑菌性好的菌株枯草芽胞杆菌PA105,上清赖氨酸水平超过0.3g/L.将枯草芽胞杆菌PA105进行紫外诱变和AEC筛选,获得产赖氨酸高且抗菌的突变菌株枯草芽胞杆菌PL83,上清赖氨酸水平达到0.582g/L,几乎比常规菌株提高了1倍.

将科研项目成果应用于本科实验教学,设计了"紫外(UV)和甲基磺酸乙酯(EMS)诱变选育大肠杆菌赖氨酸营养缺陷型菌株(Lys–)"综合实验项目。以大肠杆菌(E.coli DH5a)为出发菌株,通过UV和EMS单一诱变和复合诱变的方法,利用青霉素法淘汰野生型菌株,采用逐个检出法进行初筛、划线对照法进行复检,通过传代培养检测Lys–突变株的遗传稳定性;对青霉素淘汰野生型菌株相关步骤重要参数的确定从原理和方法上进行探讨;通过优化UV、EMS诱变及复合诱变条件,对选育大肠杆菌Lys–突变株的高效诱变方法进行探讨。

12月21日,湖南省科技厅组织有关专家对中国科学院亚热带农业生态研究所李丽立研究员主持的"高产赖氨酸芽孢杆菌研制及其在养殖业中的应用"进行了科技成果鉴定。该项目针对我国养殖业抗生素滥用严重,饲料氮营养素利用效率低,以及赖氨酸添加成本高等关键问题,与湖南农业大学、湖南省微生物研究院合作开展多学科联合攻关。在研究获得了猪鸭肠道微生物发育区系图谱的基础上,重点

半硬粒高赖氨酸突变体开采号是从北京农家种二黄玉米自交选系过程中分离出的新资源.它是1984年在二黄自交4代的单株果穗上出现的,经过选择加代,第7代成为各种性状稳定的纯合自交系.1991年经墨西哥玉米小麦改良中心分析测定,赖氨酸含量占百克蛋白质的4.2%,即占全子粒的0.411%.而普通玉米自330(对照)赖氨酸含量占百克蛋白的2.3%,开采号比普通玉米(自330)赖氨酸含量高82%.它是继奥帕克-2(O2)、弗洛里-2(fl2)、奥帕克-7(O7)三个突变体之后发现的又一个高赖氨酸玉米新资源.以开采号转育的高赖氨酸玉米子粒,可克服O2转育的容重低 子粒易受病虫危害的缺

研究了1株从锰污染的土壤中分离的细菌M14,初步鉴定其为赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus sp.)。该菌在生长过程中可以将Mn(Ⅱ)氧化成不溶于水的以Mn(Ⅳ)为主的生物锰氧化物。再利用这种生物锰氧化物去吸附和解析溶液中的金离子,从而达到了贵重金属回收再利用的目的。该菌保藏于中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCC NO:M2012084。本研究结果在净化和回收采矿等废水方面具有良好的应用前景。

利用生物信息学软件I-Mutant2.0分析植物乳酸菌素PlnJ的氨基酸序列，筛选出最不稳定的氨基酸位点，进行定点突变，构建点突变重组表达质粒。对点突变重组表达质粒进行原核表达，并筛选表达最适条件；采用镍亲和层析法纯化重组蛋白。以大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌作为指示菌，探究100℃水浴加热0、5、15、30 min对重组PlnJ抑菌功能的影响。结果表明，PlnJ第3位氨基酸——赖氨酸(AAG)对其稳定性具有重大影响。以人工合成第5位氨基酸，即赖氨酸(AAG)突变为缬氨酸(GTG)的PlnJ核苷酸序列作为模板，成功构建重组表达质粒，PCR和酶切鉴定结果显示目的条带184 bp,测序后证明突变成功。重组蛋白诱导表达条件的优化结果表明：在37℃、12 h、0.8 mmol·L~(-1)IPTG的最优诱导条件下，特异目的蛋白表达显著(27.5 ku);咪唑洗脱液浓度280 mmol·L~(-1)是最优洗脱条件，可获得较为单一的目的蛋白。采用牛津杯抑菌试验法及麦氏比浊法比较突变前后的PlnJ蛋白的抑菌效果，结果表明，突变后的蛋白[PlnJ(G5)]与突变前的蛋白(PlnJ)100℃加热0、5、15、30 min,对大肠杆菌的抑菌效果均差异显著(P<0.05),而对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑菌效果均差异极显著(P0.05)。综上，第5位氨基酸，即赖氨酸(AAG)突变为缬氨酸(GTG)后，PlnJ(G5)的热稳定性得到了提高，且不改变其抑菌效果。

以1年生苦参为材料,测定苦参根中生物总碱、苦参碱和氧化苦参碱含量,研究添加外源赖氨酸对苦参中生物碱含量的影响。结果表明,与对照相比,添加不同质量浓度的赖氨酸后,苦参总碱的含量都有所升高,添加量为600 mg/L时最有利于苦参总碱含量的增加,7、8、9、10月4个采样时间苦参总碱含量分别为对照的159.43%,168.33%,137.97%,144.52%;灌根和叶面喷施2种添加方法间没有显著性差异;添加600 mg/L外源赖氨酸后,7、8、9、10月4个时期苦参碱和氧化苦参碱的总量比对照分别提高102.38%,77.79%,48.63%,51.15%。因此,添加适当浓度的外源赖氨酸可提高苦参中...

为建立潜育化稻田微生物改良技术，采用MWMM(modified wolfe’s mineral medium)培养基富集微好氧FeOB，结合16S rRNA测序等技术鉴定菌株种类，分别采用100 mL 10~6 (T1)、10~7 (T2)、10~8 (T3) CFU/mL菌株发酵液处理潜育化水稻土，评价菌株对潜育化水稻土壤的还原性物质、土壤养分、氮循环功能基因丰度和水稻秧苗生长的影响，并利用16S rRNA高通量测序技术评价该菌株对土壤微生态的影响。结果显示：筛选到的对Fe~(2+)具有较强氧化作用的FeOB为球形赖氨酸芽孢杆菌WH07(Lysinibacillus sphaericus WH07)；相比于CK，土壤氧化还原电位（Eh）显著提高（P<0.05），并由负电位转为正电位；T1、T2、T3处理土壤还原性物质总量分别减少26.47%、41.53%、53.19%，亚铁含量分别减少0.37%、21.50%、50.09%，亚锰含量分别减少7.84%、21.57%、37.25%。土壤碱解氮含量分别显著增加15.50%、27.38%、48.90%(P<0.05)，速效磷分别显著增加12.52%、17.34%、27.38%(P<0.05)，速效钾分别显著增加11.56%、17.20%、19.34%(P<0.05)，有机质分别显著增加8.66%、22.22%、45.05%(P<0.05),pH显著分别增加3.40%、8.94%、16.99%(P<0.05)。土壤AOAamoA基因丰度分别增加11.94%、14.68%、33.83%,nosZ基因丰度分别增加42.97%、75.78%、118.75%,nifH基因丰度分别增加38.29%、51.05%、216.13%,UreC基因丰度分别增加16.74%、54.51%、60.94%。水稻株高分别增加5.44%、10.98%、36.00%，叶龄分别增加10.21%、23.42%、36.94%，鲜质量增加分别12.61%、22.52%、28.38%，白根数分别增加10.14%、32.92%、46.81%。土壤微生物多样性指数Chao1和Shannon指数相比于CK均显著降低（P<0.05）。门水平上相对丰度前10的土壤细菌中，有8个显著下调（P<0.05），如Proteobacteria等、2个（Bacteroidetes和Firmicutes）显著上调。在相对丰度前50的属中，3个处理分别有20、19、22个属显著上调（P<0.05），包括Macellibacteroides等6个FeOB;25个属在3个处理中均显著下调（P<0.05），包括MBNT15等4个铁还原菌。调控网络分析显示菌株WH07潜在地与FeOB协同改善土壤理化性质和生物活性，最终促进了秧苗生长。结果表明，应用菌株WH07显著改善了潜育化水稻土壤理化性质，改变了土壤微生物群落结构和功能。

通过携带Mini-Tn10转座子的温度敏感性质粒载体pIC333构建了苏云金芽胞杆菌YBT-1518菌株的插入突变体库。从突变体库中筛选得到1株芽胞不能在萌发剂L-丙氨酸诱导下萌发的突变株(命名为MA1),进一步的试验表明该突变株菌株的芽胞在其他氨基酸L-苯丙氨酸、L-缬氨酸和L-亮氨酸以及糖类萌发剂葡萄糖、果糖和蔗糖的诱导下也都不能萌发,表明MA1很可能属于新型的芽胞萌发缺陷突变株。

选择体重为（２２．６２±０．５２）ｇ稚鳖９０只，平均分成６组，分别饲喂含赖氨酸为１．４２、１．８７、２．２２、２．５７、２．９２和３．３２％的等能等氮半合成饵料，试验期４５ｄ。结果表明，赖氨酸缺乏会降低鳖的生活力，导致其食欲下降、生长受阻、体蛋白沉积下降、肝生长受阻和赖氨酸－α－酮戊二酸还原酶活力下降沙＜０．０１）；赖氨酸对鳖的增重、饵料系数、体蛋白沉积量和净沉积率、体赖氨酸沉积量和净沉积率、肝重／体重和肝赖氨酸－α－酮戊二酸还原酶活力影响极显著（Ｐ＜０．０１），并成极显著或显著二次回归关系（Ｒ２＝０．７６６７－０．９５９４－，Ｐ＜０．００５－０．０２）。根据这些指标确定的赖氨酸需要量差异不明...

试验以酪蛋白、白鱼粉、豆粕和晶体氨基酸为蛋白源,配制了15组试验饲料,分别测定了中华绒螯蟹幼蟹对赖氨酸(Lys)、蛋氨酸(Met)和精氨酸(Arg)的需要量。养殖试验在室内玻璃纤维水族缸中进行,试验水温为(28±3.0)℃,pH为7.4左右,试验周期为56d。试验组1～试验组5为Lys试验,试验组6～试验组10为Met试验,试验组11～试验组15为Arg试验,试验用蟹平均初重分别为:Lys试验(2.050±0.027)g,Met试验(2.027±0.033)g,Arg试验(2.05±0.032)g。每个试验设5个氨基酸梯度,其中Lys梯度为:1.58%、1.98%、2.38%、2.78%和3....

为观察不同日粮蛋白质(CP)和赖氨酸(Lys)含量对奶牛产奶性能、氮利用和血液代谢激素的影响,试验采用4×4拉丁方设计,选择4头经产中国荷斯坦奶牛,随机接受4种日粮处理:12.5%CP和0.44%Lys的日粮1;12.6%CP和0.58%Lys的日粮2;14.1%CP和0.45%Lys的日粮3;14.1%CP和0.60%Lys的日粮4。试验分为4期,每期18 d。第1天至第14天为适应期,第15天至第18天为收集期。结果表明:日粮4和日粮2的产奶量显著高于日粮3和日粮1(P0.05);日粮4和日粮2的氮利用率和奶氮排出量明显高于日粮3和日粮1(...

以河南省生产上主要推广的15个玉米品种为材料,于2004-2005年在8个不同的环境条件下进行了2年多点试验,研究基因型和环境对玉米粗蛋白和赖氨酸含量的影响。结果表明:基因型、环境以及基因型与环境的互作效应对玉米粗蛋白和赖氨酸含量均有显著影响,独立效应大于互作效应,在独立效应中,基因型效应大于环境效应;HE-1、HE-2、豫单101和豫单2002粗蛋白含量高于11%,赖氨酸含量高于0.35%,是较理想的高蛋白、高赖氨酸优质专用的玉米品种;郑州、南阳和洛阳比较适宜种植高蛋白、高赖氨酸优质专用玉米。

为研究饲料中精氨酸(Arg)、赖氨酸(Lys)水平及其相互作用对大菱鲆生长、体成分和肌肉氨基酸含量的影响,本实验以初始体质量为(18.48±0.16)g的大菱鲆作为研究对象,采用3×3双因素设计,在基础饲料中分别添加Arg(0%、0.9%和2.0%)和Lys(0%、1.19%和2.39%),配制成9种等氮等能的实验饲料,每个处理设3个重复,每重复30尾鱼,养殖周期为8周。实验结果表明,当饲料中Lys添加量为1.19%时,大菱鲆增重率和特定生长率较其他两种添加量组显著升高(P0.05)。饲料效率、蛋白质效率、蛋白质保留率...

将90头平均体重为(32.0±1.5)kg的杜长大三元杂交猪随机分为5个组,1组为对照组(粗蛋白质含量为17.47%、可消化赖氨酸含量为0.80%),2-5组为试验组.试验组采用2×2因子设计,粗蛋白质含量分别为15.47%和13.47%,可消化赖氨酸含量分别为0.80%和0.85%,试验期50 d,研究日粮粗蛋白质和赖氨酸含量对生长猪生长性能及血液生化指标的影响.结果表明:与对照组相比,降低日粮粗蛋白质含量,赖氨酸含量不变,对猪的生产性能无显著影响(P>0.05);当日粮粗蛋白质含量为15.47%,可消化赖氨酸含量为0.80%或0.85%,血清尿素氮含量显著降低(P<0.05),必需氨基酸含...