为探明芽孢杆菌处理对柑桔苗木黄龙病的抑制效果,本研究对复合菌剂进行分离得到单菌落,对No.4菌株进行细菌纯培养鉴定,通过序列测定确定其分类地位,并采用固体发酵方法制备菌剂,用该菌剂对3个品种的盆栽苗木进行灌根处理。结果表明:No.4菌株属芽孢杆菌属,革兰氏染色呈阳性;通过16SrDNA和recA基因测序分析,证明该No.4菌株与贝莱斯芽孢杆菌同源性达93%;该菌剂灌根21次时,‘沃柑’和‘沙糖橘’黄龙病阳性率由处理前的100%分别降低至50%和75%,而对照样品的阳性率均保持不变;No.4菌剂处理能促进‘沃柑’、‘沙糖橘’和南丰蜜橘3个品种的新生根系增多,褐变根系减少;扫描电镜和石蜡切片观察表明:南丰蜜橘韧皮部杆菌造成根系褐变,染病植株根系的表皮细胞易产生木栓化,表皮细胞上翘,内皮层产生空洞,结构破坏;No.4菌剂处理后,病原诱导启动子GST1及转录因子WRKY22和WRKY24基因的mRNA相对表达量提高。可见,No.4菌剂对柑桔苗木黄龙病有一定程度的抑制效果,对褐变根系有明显的缓解作用。

【目的】本文探究了枯草芽孢杆菌对白粉病病的抑制作用及其防治效果。【方法】采用扫描电子显微镜(SEM)观察枯草芽孢杆菌对白粉菌菌丝的抑制作用,同时结合田间及烘烤对比实验测定烟草生长期和烘烤过程中枯草芽孢杆菌对白粉病的防控效果。【结果】枯草芽孢杆菌对白粉菌菌丝生长和分生孢子萌发均有明显的抑制作用,其能使白粉菌菌丝顶端肿胀变形呈球状,导致新生分生孢子的个数显著减少;田间实验显示,枯草芽孢杆菌对烟草白粉病的田间防效可达70%以上,与化学药剂甲基硫菌灵相当,且对烟草叶片有一定的促生作用;烘烤前在发病烟叶上喷施枯草芽

【目的】由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani AG-3)引起的马铃薯黑痣病是马铃薯生产中重要的土传病害,严重影响马铃薯的产量和质量。利用微生物杀菌剂防治马铃薯黑痣病是环境友好、切实可行的措施之一。本研究旨在获得有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌并明确其防病作用方式,为生防细菌发酵工艺的优化、微生物杀菌剂的合理施用提供科学依据。【方法】通过对峙培养法和温室盆栽试验筛选有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌,通过Biolog微生物鉴定系统、16S rDNA序列以及gyrA、gyrB、rpoB和rpoC多基因序列分析对生防细菌进行分类鉴定。通过盆栽试验比较生防细菌菌株发酵液、无菌体上清液和菌体悬浮液对马铃薯黑痣病的防治效果,利用高效液相色谱(HPLC)对脂肽提取物进行分离,通过抑菌活性测定结合质谱(UPLC-Triple TOF-MS/MS)技术鉴定生防细菌产生的抑菌活性物质。采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术测定马铃薯根际黑痣病菌的DNA拷贝数。【结果】通过对2 106株细菌进行筛选,获得3株有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌,其中HMB33604菌株对马铃薯黑痣病的防治效果较高,达到52.9%。通过生理生化及多基因序列比对,将HMB33604菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌株发酵液和上清液对马铃薯黑痣病具有显著的防治效果,分别为52.2%和66.4%,而菌体悬浮液对马铃薯黑痣病的防治效果仅为16.9%,证明该菌株主要通过产生抑菌活性物质而起到防治马铃薯黑痣病的作用。HMB33604菌株可以产生泛革素(fengycin)、伊枯草菌素A(iturin A)和表面活性素(surfactin),抑菌试验证明泛革素和伊枯草菌素是HMB33604菌株产生的主要抑菌活性物质,这两种脂肽类抗生素能够显著抑制黑痣病菌的生长,并且造成菌丝畸形。菌株发酵液和无菌体上清液均显著降低马铃薯根际黑痣病菌的DNA拷贝数,与对照相比分别降低了60.3%和64.0%;而菌体悬浮液处理后根际黑痣病菌的DNA拷贝数仅降低10.3%。【结论】获得一株有效防治马铃薯黑痣病的生防细菌——解淀粉芽孢杆菌HMB33604,该菌株主要通过产生抑菌活性物质而发挥生防作用。泛革素和伊枯草菌素是HMB33604菌株产生的主要抑菌活性物质。泛革素和伊枯草菌素不仅造成黑痣病菌菌丝畸形,还可显著降低马铃薯根际黑痣病菌的数量,从而有效防治马铃薯黑痣病。

通过温室盆栽试验,育苗期接种丛枝菌根真菌(AMF),移栽时接种死谷芽孢杆菌(Bacillus vallismortis HJ-5)、有机肥(OF)或者生物有机肥(HJ-5OF),研究了不同处理对棉花黄萎病和棉花生长的影响。结果表明:配合施用AMF与HJ-5OF显著降低了棉花黄萎病的发病指数,与对照相比其病情指数下降了72.80%;根际可培养微生物数量和种类发生显著变化,施用AMF与HJ-5OF处理的真菌、大丽轮枝菌菌核数量分别比对照下降了68.88%、47.20%,细菌、放线菌数量分别为对照的23.81倍、2.40倍;根际区系中,真菌的种类显著降低,细菌的种类显著增加;AMF和HJ-5OF的协...

为探讨益生性枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞黏附及对嗜水气单胞菌的抑制作用,以草鱼肠上皮细胞为研究对象,检测了枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞的黏附率、对嗜水气单胞菌的黏附抑制率和对各种生理生化指标的影响。结果显示:枯草芽孢杆菌对草鱼肠上皮细胞形态、细胞中四甲基偶氮唑盐(MTT)OD值、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)和谷草转氨酶(GOT)活性等各种生理指标无显著影响,但在孵育3h和6h后分别显著降低了Na+,K+-ATP酶和谷丙转氨酶(GPT)的活性;与嗜水气单胞菌孵育3h后,肠上皮细胞由椭圆变成不规则形态,

从尼罗罗非鱼（ＯｒｅＯｃｈｒＯｍｉｓ ｎｉｌＯｔｉｃｕｓ）肠道内容物中分离筛选出具有反硝化能力并拮抗无乳链球菌（ｓｔｒｅｐｔＯｃＯｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ）的芽孢杆菌好氧菌株，并对其中拮抗性最强的１株芽孢杆菌进行形态学、生理生化特性、１６ｓ ｒｒｎａ基因序列鉴定，进一步研究其最适生长条件、水解淀粉和蛋白的能力，并进行菌株药物敏感试验及安全性检测。经鉴定，筛选出的菌株（命名为ｎＹ ５）为蜡样芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）。在反硝化性能检测培养基中接种１％的ｎＹ５菌液后，对５０ ｍｇ／ｌ的亚硝酸盐氮１２ ｈ去除效率达到１００％；对本实验室保存的２１株不同来源的无乳链球菌均有拮抗作．．．

为了明确地衣芽孢杆菌对马铃薯晚疫病菌的抑制作用,研究了地衣芽孢杆菌对马铃薯晚疫病菌菌丝生长、游动孢子释放、游动孢子萌发、孢子囊萌发产生芽管的抑制作用。结果表明:地衣芽孢杆菌对马铃薯晚疫病菌的菌丝生长、游动孢子释放和游动孢子萌发有明显的抑制作用,对菌丝生长的抑制作用,抑菌带平均宽度达到5.58 mm,在稀释度为10-1时地衣芽孢杆菌对游动孢子释放的抑制率高达86.11%,对游动孢子萌发的抑制率也达到了78.1%。但地衣芽孢杆菌对马铃薯晚疫病菌的孢子囊萌发产生芽管抑制作用较弱。

以水霉菌(Saprolegnia ferax)的生物防治为切入点,通过对本实验室保存的9株芽孢杆菌(Bacillus spp.)与水霉菌JL菌株进行对峙拮抗试验,筛选出具有明显抑制水霉菌JL菌株的芽孢杆菌BA1(P<0.05)。经进一步测定菌株BA1对不同来源水霉菌株试验,结果显示菌株BA1对水霉菌株6#、10#、S2也有明显的抑制作用(P

[目的]微囊藻水华给湖泊生态系统及人类健康带来很大危害,本研究旨在探寻高效环保的微生物抑藻材料。[方法]通过流式细胞仪测定短短芽孢杆菌B15不同发酵时间及添加量下无菌发酵上清液的抑藻率,通过激光共聚焦显微镜和电子显微镜观察处理后的藻细胞形态,并通过叶绿素荧光仪测定处理前、后藻细胞光合作用的变化。另外,检测了发酵上清液在不同温度、p H值和蛋白酶处理下的活性变化。[结果]0.3%、0.7%、1.0%和2.0%添加量的发酵液处理6 d后抑藻率分别为51.89%、79.89%、89.47%和86.94%。发酵液

为了检测具有群体感应抑制作用的地衣芽孢杆菌T-1对动物的安全性及对水体生态环境的影响,实验采用异育银鲫、斑马鱼及小鼠为安全评价的测试动物;采用小球藻、大型及萼花臂尾轮虫为水体生态评价的测试对象,参照国标的急性毒性实验方法对地衣芽孢杆菌T-1进行动物安全性及生态环境评价。结果显示:异育银鲫腹腔注射浓度为11 200 mg/L(2.6×1011CFU/m L)菌株T-1菌液后,连续观察96 h,异育银鲫均健康生长,未出现不良症状或死亡;将斑马鱼浸泡在浓度为2 240 mg/L(5.2×1010CFU/m L)的菌液中,连续观察96 h,斑马鱼健康生长,未出现不良症状或死亡;SPF级小鼠(ICR品系...

为探明生防菌哈茨木霉(Trichoderma harzianum)VT9-3r和枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)VT4-1x对马铃薯致病菌Rhizoctonia solani、Fusarium oxysporum、Alternaria solani的抑制作用,采用对峙培养确定生防菌株抑菌作用,利用扫描电镜观察生防菌株对病原菌菌丝生长的影响,并采用盆栽试验分析其对由R.solani引起的马铃薯黑痣病的防效。结果表明:T.harzianum VT9-3r和B.subtilis VT4-1x能有效抑制3株病原菌的生长;B.subtilis的菌体和代谢物质都具有抑制作用,拮抗抑菌率由大到小依次为A.solani(55.4%)>R.solani(51.3%)>F.oxysporum(48.1%),无菌代谢液对病原菌的抑制率随着浓度升高而增强;扫描电镜观察发现T.harzianum通过竞争和重寄生作用抑制病原菌,拮抗抑菌率F.oxysporum(64.0%)>R.solani(63.6%)>A.solani(60.2%),其无菌代谢液抑菌效果则较差;盆栽试验表明2种生防菌剂处理后,均能显著防治R.solani引起的马铃薯黑痣病,且使用两菌剂以1∶1体积比复合处理后,防效高达81.5%。综上,哈茨木霉主要通过重寄生、枯草芽孢杆菌通过拮抗机制抑制马铃薯致病菌,2种不同抑菌机制的菌剂复配施用能更有效防治马铃薯黑痣病。

[目的]本文旨在分离具有良好抗菌活性的芽孢杆菌菌株作为抗生素替代品材料。[方法]通过热处理和抑菌板双重筛选对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有抗菌活性的芽孢杆菌,并通过形态学、生理生化和分子生物学方法鉴定分离菌株。体外测定分离菌株发酵上清液对4株耐药致病菌的抑制作用。[结果]分离到6株对革兰氏阳性菌和阴性菌均具有抗菌活性的芽孢杆菌,其中分离菌株BB11的抑菌活性最强,对沙门氏菌C782和大肠杆菌K_(12)D_(31)的抑菌圈直径分别达15.34和6.26 mm。染色镜检BB11菌为带芽孢的革兰氏阳性菌,理化特性

【目的】探索芽孢杆菌3种组合菌剂对蒙古栎幼苗生长的影响，明确不同菌剂对其促生效果，为芽孢杆菌在蒙古栎苗木培育中的应用提供理论依据。【方法】以一年生蒙古栎容器苗为材料，使用枯草芽孢杆菌单一菌剂(B1)、枯草芽孢杆菌+地衣芽孢杆菌等比例混合菌剂(B2)、枯草芽孢杆菌+地衣芽孢杆菌+解淀粉芽孢杆菌等比例混合菌剂(B3)进行接种。每种菌剂均设原液(C0)和20倍稀释液(C2)2个浓度，清水为对照(CK)，分析不同种类和浓度的菌剂对蒙古栎幼苗生长指标、光合参数和非结构性碳水化合物(NSC)的影响。【结果】芽孢杆菌增加了蒙古栎幼苗苗高、地径、叶片数和各器官生物量的积累，也增强了幼苗的光合作用，同时改变了幼苗根系形态和非结构性碳水化合物(NSC)的分配模式。其中，B1、B2和B3菌剂分别增加了叶、茎和根系的生物量占比；3种菌剂均降低了幼苗的NSC含量，增加了叶片中可溶性糖与淀粉的比率，且促使NSC向根系中分配。B1菌剂对幼苗生物量和光合作用的促进效果优于B2菌剂；而B2菌剂对幼苗地上部分、根系形态和NSC的影响大于B1菌剂。【结论】芽孢杆菌菌剂对蒙古栎幼苗生长具有明显的调节作用，可提高蒙古栎苗木生长潜力，3种菌剂中，枯草+地衣+解淀粉芽孢杆菌混合菌剂的处理效果最佳。该研究可为芽孢杆菌在蒙古栎优质苗木培育中的应用提供理论支持。

【目的】针对大规格油茶容器苗培育周期长、成本高等问题开展研究，油茶提高种苗生长效率，实现速培育。【方法】以长林4号、40号和53号1年生油茶容器苗为试验材料，利用盆栽试验测定枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌施用浓度对油茶种苗生长的影响。【结果】苗高、地径、干物质重量和根冠比在加入枯草芽孢杆菌后，4号增加6.26%、2.49%、21.87%和30.77%,40号增加24.32%、11.51%、52.63%和61.70%；加哈茨木霉菌后，4号增加3.98%、-8.85%、25.51%、30.77%,40号增加39.39%、21.34%、80.73%和69.61%;53号在加入枯草芽孢杆菌后干物质重量增加21.90%。根系长度在4号、40号和53号加入枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌后分别较CK最大提升48.78%、57.32%、-22.51%,77.37%、121.42%、-35.33%;4号和40号的根系直径和根系表面积显著高于CK，其中枯草芽孢杆菌和哈茨木霉菌加入后根系直径分别提升39.23%、53.51%,88.18%、117.67%，根系表面积提升48.98%、69.79%,123.67%、134.56%。4号、40号和53号在加入枯草芽孢杆菌的叶片SPAD值较CK分别最大提升-12.81%、1.54%、-5.85%，叶面积分别提升1.50%、18.04%和-13.51%，长宽比分别为-9.61%、22.84%、-3.86%，形状系数为2.66%、4.41%和2.24%；哈茨木霉菌后较CK分别最大提升0.28%、1.47%、-4.44%，叶面积分别提升0.90%、1.85%和12.88，长宽比分别提升-6.43%、5.56%、0.57%，形状系数为1.76%、2.36%、2.07%。【结论】综上所述，两种菌剂的分别加入对40号根茎生长和物质积累等均得到大幅度提升，4号根系生长和物质积累显著增加，53号根茎生长和物质积累受到抑制，但叶面积变化较大；哈茨木霉菌对种苗生长促进作用好于枯草芽孢杆菌，4号和40号分别以200、150～200 g/m~3为宜。

筛选获得对灰霉病菌具有抑制活性的芽孢杆菌菌株,明确其胞外抑菌物质的活性及稳定性,为灰霉病提供安全、高效、易行的生物防治方式,并为其后续生防制剂的研发提供科学依据。采集我国云南、黑龙江、新疆、河北等地蔬菜种植土壤样品129个,采用稀释涂平板法分离获得芽孢杆菌4 200株,采用平板对峙法获得191株具有灰葡萄孢菌拮抗性能的菌株,其中菌株KA4的抑菌能力最强,对灰霉病菌的抑菌率为65.34%。采用形态学、生理生化特征以及16S rDNA和gyrB基因序列分析相结合的鉴定方法进行了KA4菌株的鉴定,将其鉴定为解淀粉芽孢杆菌,命名为BA-KA4。BA-KA4的无菌发酵液具有较强的抑菌活性,稀释10,20,40倍的无菌发酵液对灰葡萄孢菌的抑菌率分别为78.83%,65.19%,45.38%。通过单因素法测定了不同处理温度、pH值和紫外照射时间对BA-KA4无菌发酵液抑菌活性的影响,该菌株的无菌发酵液具有良好的温度、pH和紫外线稳定性。综上,解淀粉芽孢杆菌BA-KA4能够抑制灰霉病菌生长、胞外抑菌物质活性稳定,可作为灰霉病生物防治的优良微生物资源,具有良好的开发前景。