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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
彭定祥
经过十多年的苧麻自交纯化研究,先后选育出了一批纯合自交系,摸索了苧麻自交纯化的有效选择方法。研究结果表明。因苧麻长期异交,杂合程度高,按亲本综合性状或多个表现型性状选择,难以纯合;按自交退化原理,选择生长势较弱的自交后代个体自交,能加快纯合进程,是一种可取的选择方法,但由于自交个体生长势弱、生活力低、生殖器官退化等原因难以连续自交;在自交各代中,先按亲本叶柄颜色、雌蕾颜色选择后代个体进行自交。其它性状能随之逐渐纯合。在本研究中,最快的自交纯化途径为:自交1—2代,按自交退化原理选生长势较弱的单株自交,从2—3代开始,按亲本叶柄颜色、雌蕾颜色选择单株自交,当这两个性状基本纯合时,同时选择其它性状...
关键词：
苧麻 自交 选择
[期刊] 中国农业科学
[作者]
谭龙涛 喻春明 陈平 王延周 陈继康 温岚 郑建树 熊和平
目的研究苎麻自交后代群体的遗传多样性和群体结构,探究自交纯合进度,对自交后代群体的纯合趋势进行判断。方法以中苎1号为材料,采用筛选出的多态性高的31对SSR引物和48对SRAP引物对3个自交后代群体的基因组DNA进行扩增。通过DNA位点纯合率和遗传多样性参数分析群体的遗传多样性。用Structure、NTSYS和AMOVA软件对群体结构进行分析。并用标记指数来比较SSR和SRAP标记方法的标记效率。结果 SSR和SRAP标记得到的多样性指标变化明显,从S3代到S5代,平均扩增出57条和157条多态性条带,DNA位点纯合率上升了5.2%和4.61%,多态性位点减少了13个和44个,有效等位基因数...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
叶开玉 卢美英 于萍 陈殿余
针对龙眼组织富含多糖、单宁、色素及酚类物质的特点,采用改良的SDS法和CTAB法进行龙眼顶芽、叶片和茎皮3种组织总RNA的提取与纯化研究。结果表明,两种方法提取的总RNA均具有28、18、5S 3条清晰、完整的条带,且无降解现象;A260/A280均介于1.8~2.0之间,A260/A230均大于2.0。说明改良的SDS法和CTAB法提取的总RNA具有很高的纯度,可以满足后续分子生物学研究的要求。
[期刊] 水产学报
[作者]
林华娟 秦小明 章超桦 长岛裕二
为了获得麻痹性毒素标准品,以毒化扇贝为试验材料,对扇贝中的麻痹性毒素(PSP毒素)进行了提取和分离纯化。以酸性80%乙醇溶液反复提取麻痹性毒素,得到了总毒性为6170MU的毒素粗提液。毒素粗提液经过超滤、Bio-GelP-2凝胶柱层析和Bio-Rex70离子交换柱层析等二次层析柱分离纯化后得到以膝沟藻毒素群(GTXs)为主的纯化PSP毒素。HPLC分析结果显示,扇贝中主要含有膝沟藻毒素GTX3,GTX1、GTX2、GTX3、和GTX4的组成比例约为2∶4∶14∶1(以HPLC上的峰面积比例计)。纯化后的毒素可以作为标准物质用于GTX1-4的HPLC分析。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
何新华 郑青松 刘玲 刘兆普 张静 魏微 汪辉
以干菊芋块茎粗粉为原料,对菊芋菊粉纯化中脱蛋白和脱色工艺条件进行优化。结果表明,菊粉纯化的最佳工艺条件为:灭多酚氧化酶(PPO)活性的最佳温度为90℃,时间10 m in;石灰乳脱蛋白最佳pH值为11~12,蛋白去除率约为83.61%;磷酸回调最佳pH值为6~6.5,蛋白去除率为12.53%。菊粉提取液最佳脱色条件:采用D311弱碱阴离子树脂,脱色温度45℃,色素浓度0.796 Abs,洗脱速度为4 B.h-1,树脂对色素的吸附量可达15.58ΔA.mL-1,菊粉平均损失率为3.08%。
关键词：
菊芋 菊粉 灭酶活 除蛋白 脱色
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
潘琛 任百光 盖颖
木质素是绿色植物生长发育所需的重要化合物之一。肉桂酰辅酶Ａ还原酶（ＣＣＲ）是在木质素合成过程中，催化苯丙烷类合成途径第１步的关键酶。本文以其底物之一——对香豆酰辅酶Ａ酯为例，以现有的辅酶Ａ酯合成纯化的文献报道为参考，介绍经过整合改进并不断试验而得到的ＣＣＲ底物的合成与纯化方法。从大肠杆菌中提取出来的重组酶４－香豆酸辅酶Ａ连接酶（４ＣＬ）用于合成ＣＣＲ底物，这比从植物组织中提取更易获得。提纯后的４ＣＬ可以在－８０℃下保存３、４个月。４ＣＬ反应后的产物在２个不同梯度下通过Ｃ１８反相柱进一步纯化，并用高效液相色谱仪监测。在整个纯化过程中，所有用于装载对香豆酸和对香豆酰辅酶Ａ酯的容器都用锡箔纸完全包裹．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴旭东 张奇 侯玉霞 张文吉
从鲶肌肉、肝、肾、血中提取基因组DNA。经过0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,DNA带型整齐。紫外分光光度仪测定基因组DNA的D260 nm/D280 nm达1.77~1.82,证明所提取基因组DNA质量较好,可用作聚合酶链式反应(PCR)的模板所需。
关键词：
鲶 基因组DNA 提取方法
[期刊] 中国农业科学
[作者]
常洪 于永梅 钱耕荪 冀德君 吴一迁
目的寻找中缅树鼩孟德尔性状的适宜纯化方法。方法以Rife-Buranamanas母子性状组合频率定律鉴别了中缅树鼩8种孟德尔性状的遗传机制;以群体遗传学和概率矩阵方法探讨了动物克隆、超数排卵与胚胎移植、“理想型横交”和多元测交四种选育体制对中缅树鼩驯化群孟德尔性状纯化和保持一般的遗传多样性的效率。结果在中缅树鼩基因组背景下,野生型毛色、暗色眶缘、白色腹毛、有季节性红斑、肉色掌底皮肤、非竖耳、圆尾和对称乳房是显性孟德尔特征;对于规模既定的群体而言,不同体制下一代间淘汰率之比也就是近交增量、基因多样度损失量之比;就性状纯化的效应而言,多元测交体制优于“理想型横交”。以普通果蝇(Drosophila...
关键词：
中缅树鼩 孟德尔特性 纯化方法
[期刊] 淡水渔业
[作者]
吴旭东 侯玉霞 张文吉
从组织提取RNA的完整性对于分子生物学研究是至关重要的。RNA提取方法有多种。采取异硫氰酸胍法从黄河鲶肌肉、血液、全鱼、肾脏、肝脏、卵巢中提取出完整RNA,结果表明,通过该方法所提取RNA质量高,效果好,可以用于进一步的分子生物学研究。
关键词：
黄河鲶 RNA提取 异硫氰酸胍法
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
蒋建林 蒋金书
本文报道了改进的柔嫩艾美耳球虫各阶段虫体纯化方法。用胃蛋白酶消化盲肠道组织，铜筛过滤除去大颗粒杂质后，以1．1mol·mL－1蔗糖离心漂浮卵囊，然后用小于0．5mol·mL－1蔗糖溶液反复漂洗，最后以5％次氯酸钠消毒处理，获得了大量纯化柔嫩艾美耳球虫卵囊。孢子化卵囊经研磨，消化，游离出子孢子后，过DEAE-纤维素52层析柱，以0．05mol·mL-1，Tris－HCl，（pH＝80，0．15mol·mL1-NaCl）洗脱，层析往高5cm，洗脱液水柱高3cm，流速为2mL·min－1，纯化出了子孢子。取人工感染球虫鸡的120h后的盲肠，游离出第二代裂殖子，铜筛过滤后，过柱方法同前，纯化出了第二代...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
邬晓勇 何钢 颜军 郭晓强 苟小军
对传统抗生素的活性测定方法进行了比较及改进,建立了蛙皮抗菌肽的活性测定方法——TTC微量稀释法;利用SephadexG25凝胶层析分离抗菌肽粗品获得一个活性组分命名为G5,利用TTC微量稀释法测定活性组分G5抑制大肠杆菌的MIC是80μg/mL、抑制铜绿假单胞菌的MIC是20μg/mL、抑制金黄色葡萄球菌的MIC是80μg/mL;活性组分G5再经凝胶HPLC分离纯化获得两个活性组分Ⅰ和Ⅱ,组分Ⅰ和组分Ⅱ再分别经过RP-HPLC分离纯化获得两个色谱纯的活性组分命名为RanaⅠ和RanaⅡ。
关键词：
抗菌肽 活性筛选 分离纯化
[期刊] 林业科学
[作者]
李姝江 朱天辉
撑×绿杂交竹(Bambusa pervariabilis×Dendrocalamopsis grandis)梢枯病是长江中上游退耕还林毁灭性病害之一,可造成严重的生态和经济损失。由于该病是近年来四川栽培区新发现的病害,相关研究较少,目前仅对该病的病原及发生规律(朱天辉等,2009a)、症状特点及空间格局(朱天辉
关键词：
梢枯病菌 毒素 蛋白 致病活性 杂交竹
[期刊] 中国水产科学
[作者]
刘雪兰 余为一 李槿年
本研究建立鼠红细胞膜吸附法纯化中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)血清凝集素的方法,并与硫酸铵盐析、凝胶过滤层析和离子交换层析等其他提取方法进行比较。实验结果表明,中华绒螯蟹血清经鼠红细胞膜吸附后,再由EDTA把结合的凝集素从膜上解离,可以获得纯化的高活性凝集素。该纯化物在PAGE中出现2个清晰的区带,一个是大分子的b带,另一个则是由3种大小相近的小分子组成的c区带;在SDS-PAGE中,则显示出3个分子量接近、约为100 000的条带。经50％饱和硫酸铵盐析或用Sephadex G200凝胶过滤层析法可浓缩但不能纯化中华绒螯蟹血清凝集素。经DEAE-Sephadex A50离子...
关键词：
中华绒螯蟹 凝集素 鼠红细胞膜吸附 纯化
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
何沙娥 张智俊
为了获得完整、高纯度的竹林土壤微生物总DNA,采用改良的十二烷基硫酸钠-高盐抽提法对5种竹林土壤进行DNA提取,通过DNA凝胶回收试剂盒纯化粗提的DNA,利用细菌16 S rDNA基因的V3区引物对纯化的DNA进行了聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)验证。结果表明,该方法所需土壤样品少,抽提的DNA片段均在23kb以上,完整性好;采用DNA凝胶回收试剂盒纯化能够有效去除粗提DNA中大部分杂质,获得高质量的DNA;以此DNA为模板进行DGGE检测所反映的微生物信息量丰富。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
汪浩 乔绪稳 陈瑾 李图帅 张元鹏 侯继波 郑其升 孙卫东
[目的]验证利用革兰氏阳性增强基质颗粒(GEM)浓缩纯化口蹄疫病毒(FMDV)抗原的可行性。[方法]将含有3个自溶素基序的锚钩蛋白基因(PA)与针对O型口蹄疫病毒特异性纳米抗体基因(VHH)串联克隆入原核表达载体p ET-32a(+)中,构建原核表达载体p ET-VPA,将其转化大肠杆菌宿主菌BL21(DE3),表达获得融合重组蛋白VPA。先将GEM颗粒与重组蛋白VPA在37℃孵育30 min,离心,取沉淀用适量的FMDV抗原液重悬,再经一步低速离心,获得沉淀即为浓缩纯化的口蹄疫病毒抗原。利用SDS-PA
关键词：
GEM技术 口蹄疫病毒 抗原纯化
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