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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
夏兵兵 汪袁 樊彦红 李银环 王晴晴 孙卫东 张海彬 何成华
[目的]本试验旨在研究脱氧血腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的小鼠骨髓源性成熟树突状细胞(mature dendritic cell,m DC)的表型和吞噬功能的影响。[方法]体外培养小鼠骨髓细胞诱导分化成未成熟的树突状细胞,分别用不同质量浓度的DON(0、125、250、500 ng·m L(-1))处理DC 6 h后,再加入LPS刺激18 h。以仅用LPS处理的为阳性对照组。用流式细胞仪检测DC表型(CD80、CD86和M
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
姜云晶 杨子鹏 朱电锋 范梦雪 陈晓芳 储小燕 张娅菲 刘秦 刘锦芳 李玉 冯士彬 吴金节 王希春
【目的】研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对PC12细胞自噬的影响。【方法】以不同质量浓度(0(CK),125,250,500,1 000和2 000ng/mL)的DON处理PC12细胞24h后,采用倒置显微镜、透射电镜、免疫荧光、荧光定量PCR、Western-blot等技术,研究DON对PC12细胞形态和超微结构、LC3聚点率及自噬相关基因classⅢPI3 K、Beclin-1、P62 mRNA和蛋白LC3Ⅱ、P62、classⅢPI3K表达的影响。【结果】不同质量浓度的DON均可诱导PC12细胞自噬,各试验组细胞自噬水平均高于对照组(CK),并随着DON质量浓度的增大而先增加后下降,在DON质量浓度为1 000ng/mL时达到峰值。与对照组相比,各试验组classⅢPI3 K mRNA和Beclin-1mRNA表达水平均极显著增高(P<0.01),P62mRNA表达水平随着DON质量浓度的增加总体呈下降趋势,差异达显著(P<0.05)或极显著(P<0.05)或极显著(P<0.05)或极显著(P
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
萧晟 刘丹丹 甘芳 黄克和
[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对体外培养的仔猪空肠上皮细胞(IPEC-J2)增殖、凋亡和屏障功能的影响,探讨DON的肠道毒性作用及相关机制。[方法]以不同浓度(0、0.5、1、2、4、8、和16μmol·L~(-1))DON处理IPEC-J2细胞24 h后,采用MTT、Hoechst 33258、Western blot、Millipore-ERS和IFA法检测DON对IPEC-J2细胞增殖、凋亡、屏障功能和自噬水平的影响;在4μmol·L~(-1) DON处理组添加自噬激活剂雷帕霉素(Rapa)来提高细胞的自噬水平,用上述方法检测Rapa对DON引起的IPEC-J2细胞增殖毒性、凋亡和屏障功能的影响。[结果]与对照组相比,当DON浓度为4、8和16μmol·L~(-1)时,细胞活性显著(P<0.05)或极显著(P<0.01),细胞跨膜电阻(TEER)值和紧密连接蛋白Occludin表达显著下降(P<0.05),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ和Atg5表达显著下降(P<0.05)。添加Rapa可以显著缓解DON引起的细胞毒性、凋亡和屏障功能障碍。[结论]DON通过抑制自噬引起IPEC-J2细胞增殖下降、凋亡增加和屏障功能障碍。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
许伟 范梦雪 孟婷婷 胡文娟 宫佳杰 陈晓芳 姜云晶 朱电峰 冯士彬 李玉 吴金节 王希春
［目的］本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ｄｅｏｘｙｎｉｖａｌｅｎｏｌ，ｄｏｎ）诱导ＰＣ１２细胞凋亡及对相关基因ＢＣｌ－２、Ｂａｘ、Ｂｉｄ ｍＲｎａ和蛋白Ｃｌｅａｖｅｄ－ＣａｓＰａｓｅ ３、Ｃｌｅａｖｅｄ－ＣａｓＰａｓｅ ９表达水平的影响。［方法］用不同质量浓度的ｄｏｎ（０、１２５、２５０、５００、１ ０００和２ ０００ ｎｇ·ｍ ｌ～（－１））对ＰＣ１２细胞染毒２４ ｈ，采用透射电镜观察、流式细胞术、荧光定量ＰＣＲ、ＷｅｓｔｅＲｎ－Ｂｌｏｔ等方法，研究ｄｏｎ对ＰＣ１２细胞的超微结构、凋亡率、凋亡相关基因及蛋白表达的影响。［结果］不同浓度的ｄｏｎ均可诱导细胞凋亡，各试验组细胞凋亡率均极显著高于．．．
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
萧晟 刘丹丹 甘芳 黄克和
[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)暴露对体外培养的仔猪空肠上皮(IPEC-J2)细胞增殖、凋亡和屏障功能的影响,探讨DON的肠道毒性作用及其相关机制。[方法]以不同浓度的DON(0、0.5、1、2、4、8、和16 μmol/L)处理IPEC-J2细胞24 h后,采用MTT法、Hoechst 33258、western blot、Millipore-ERS和IFA检测DON对IPEC-J2细胞增殖、对细胞凋亡、屏障功能和自噬的影响;通过添加自噬激活剂雷帕霉素(RAPA)来升高细胞的自噬水平,用上述方法检测RAPA对DON引起的IPEC-J2细胞增殖毒性、凋亡和屏障功能的影响。[结果]与对照组相比,当DON浓度达到4、8和16 μmol/L时:1)细胞增殖显著下降(P<0.05);2)凋亡细胞数量和凋亡相关蛋白Cleaved-caspase3表达显著增加(P<0.05);3)细胞跨膜电阻和紧密连接蛋白occludin表达显著下降(P<0.05);4)自噬相关蛋白LC3-II和Atg5表达显著下降(P<0.05);5)当添加自噬激活剂雷帕霉素(Rapa)时,可以显著缓解DON引起的细胞增殖毒性、凋亡和屏障障碍。[结论]DON暴露通过抑制自噬引起IPEC-J2细胞增殖下降、凋亡增加和屏障功能障碍。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
魏澍 刘金玲 单风平
观察蛋氨酸脑啡肽(MENK)对巨噬细胞-粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)诱导的小鼠骨髓来源树突状细胞TLR-4表达的影响,探讨蛋氨酸脑啡肽对小鼠骨髓来源树突细胞免疫功能的调节机制。体外制备小鼠骨髓细胞用GM-CSF协同MENK诱导培养7d后用RT-PCR法检测TLR-4的mRNA表达,用Western-Blot检测TLR-4蛋白的表达。结果表明:MENK协同诱导组TLR-4的表达高于正常对照组(p<0.01)和GM-CSF诱导组(p<0.05),MENK可以促进树突状细胞TLR-4的表达。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
丁举静 何成华 刘俐君 马彦娜 张海彬
为了探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对体外培养仓鼠肾细胞(BHK-21)的线粒体膜电位及Bax和Bcl-2蛋白表达的影响,采用细胞培养、流式细胞术、免疫细胞化学染色等方法,研究DON对细胞早期凋亡率、线粒体膜电位及Bax和Bcl-2蛋白表达的变化。结果显示:不同浓度的DON均可诱导BHK-21细胞凋亡,各浓度组的凋亡率都显著高于对照组(P
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王育伟 吴文达 施志玉 任喆 何成华 张海彬
[目的]脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)是饲料及原料中广泛存在的真菌毒素,本文以幽门结扎大鼠为模型研究DON对大鼠胃液组成的影响。[方法]将24只禁食Wistar大鼠随机分为4组,分别以0、1、5和25 mg·kg(-1)的DON灌胃染毒0.5 h后进行幽门结扎术,4 h后收集胃液。测定胃液体积、p H值、胃蛋白酶含量及活性、黏蛋白和金属离子含量等。[结果]与对照组相比,1、5和25 mg·kg(-1)DON染毒大鼠胃液体积分别下降了24.88%、51.39%和60.88%(P
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈晓芳 张娅菲 储小燕 姜云晶 朱电锋 范梦雪 冯士彬 李玉 吴金节 王希春
[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对仔猪海马神经细胞的凋亡及其信号通路的影响。[方法]体外培养仔猪海马神经细胞至对数生长期,以不同质量浓度的DON(0、125、250、500、1 000和2 000 ng·mL~(-1))进行处理,采用倒置显微镜和透射电镜观察细胞的形态学变化及线粒体结构,CCK-8试剂盒检测细胞的存活率,流式细胞仪检测线粒体膜电位的变化,ELISA试剂盒检测caspase-3酶活性,荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Bcl-2和Bax mRNA的表达水平。[结果]DON可显著抑制仔猪海马神经细胞存活率并诱导细胞发生明显的形态学变化,且具有剂量和时间效应;DON可降低线粒体膜电位,增强caspase-3酶活力,并通过上调Bax mRNA和下调Bcl-2 mRNA的表达,增加Bax/Bcl-2值。[结论]DON可通过引起线粒体功能障碍,激活caspases-3并调节Bcl-2家族基因,从而诱导仔猪海马神经细胞凋亡。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
徐剑宏 祭芳 王宏杰 王建伟 林凡云 史建荣
【目的】分离筛选能够降解脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的细菌,以期能在该毒素的生物解毒处理中得到应用。【方法】用高产毒禾谷镰刀菌F-25接种灭菌的小麦籽粒,培养后获得DON毒素;然后以DON毒素为唯一碳源进行DON毒素降解菌的驯化富集培养,得到能够降解DON毒素的混合菌群,逐一对分离到的细菌进行DON毒素降解能力检测,得到能够降解DON毒素的菌株。【结果】筛选得到的菌株DDS-1对液体培养基中的DON毒素的降解能力达95%以上,显著高于其它菌株;从形态、生理生化特性以及16S rDNA序列进行分析,DDS-1菌株初步鉴定为徳沃斯氏菌Devosia sp.;把DDS-1添加到小麦饲料中后,饲料中的...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
宋玉立 陈利锋 聂理 徐朗莱 徐雍皋
脱氧雪腐镰刀菌烯醇对小麦愈伤组织ＳＯＤ活力的影响宋玉立１陈利锋１聂理２徐朗莱２徐雍皋１（１南京农业大学植物保护学系，２理学院，南京２１００９５）ＥＦＦＥＣＴＯＦＤＥＯＸＹＮＩＶＡＬＥＮＯＬＯＮＴＨＥＡＣＴＩＶＩＴＩＥＳＯＦＳＵＰＥＲＯＸＩＤＥＤＩＳ...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
郭晋丽 赵志辉 郭文博 孙真真 杨俊花 张德福
[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)对高产蛋鸡生产性能、蛋品质、血常规、血液生化指标以及肝脏抗氧化能力的影响。[方法]选用26周龄体质量为(1.90±0.2)kg、产蛋率一致的海兰蛋鸡120只,随机分为6组,每组4个重复,每个重复5只,对照组每天灌胃等量生理盐水,试验组每天分别灌胃1、5、10、20和50 mg·kg~(-1)DON,连续灌服6周。[结果]与对照组相比,不同质量浓度DON处理组蛋白高度和哈夫单位均显著升高,白细胞(WBC)和血小板(PLT)数量均显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中红细胞(RBC)数量、血红蛋白(HGB)含量和红细胞压积(HCT)极显著上升至最高(P<0.05或P<0.01),蛋壳颜色和肝脏组织中总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性显著降低(P<0.05或P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
史建荣 刘馨 仇剑波 祭芳 徐剑宏 董飞 殷宪超 冉军舰
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),又称呕吐毒素,是由小麦赤霉病菌禾谷镰刀菌复合群(Fusariumgraminearum species complex)产生的单端孢霉烯族毒素,毒素在小麦籽粒中累积。作为B型单端孢霉烯族毒素,DON可以引起呕吐、拒食、腹泻、出血甚至死亡,对猪的危害尤其严重。近年来,小麦赤霉病在世界各地高频率流行,尤其在中国长江中下游小麦生产区以及黄淮部分小麦产区、美国中西部小麦主产区,导致小麦中DON毒素严重超标,并引发了严重的食品安全问题。本文对国内外小麦中DON毒素的污染现状、产毒镰刀菌种类及其化学型的分布及其趋势、毒素产生的调控机制以及小麦中DON毒素的防控途径进行了论述,...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
朱电锋 张娅菲 储小燕 陈晓芳 刘秦 冯士彬 李玉 吴金节 王希春
[目的]本试验旨在通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)体内试验,根据仔猪血清细胞因子水平、肠黏膜sIgA水平及肠道免疫球蛋白mRNA相对表达量的变化,研究DON对断奶仔猪免疫机制的影响。[方法]选取30头21日龄"杜×长×大"三元杂交断奶仔猪,随机分为对照组、DON低剂量组和DON高剂量组,对照组饲喂基础饲粮,低剂量组和高剂量组分别饲喂含1和2 mg·kg-1DON的基础饲粮。试验期60 d。在试验开始后的0、14、28、42和60 d,所有仔猪经前腔静脉采血,检测血清细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-6水平;试验结束时,每组随机选取5头仔猪剖杀,取十二指肠、空肠和回肠,检测肠道黏膜sIgA水平及肠组织IgA、IgM、IgG mRNA相对表达量。[结果]DON能显著或极显著降低仔猪平均日采食量与平均日增重,增加料重比(P<0.05,P<0.05),其中DON高剂量组的作用效果比低剂量组更加明显。[结论]DON可以降低仔猪的生长性能、血清细胞因子及肠道免疫水平,对断奶仔猪具有一定的免疫毒性作用。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
付佳 梁金逢 阴银燕 杨倩
为建立鸡骨髓源树突状细胞(DC,dendritic cells)体外培养方法,用重组鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rGM-CSF)和重组鸡白细胞介素4(rIL-4)体外诱导鸡骨髓细胞分化为DC,然后通过形态观察、表型鉴定及功能分析来初步鉴定所培养的DC。试验结果表明:培养7 d后,光学显微镜下观察到细胞表面不规则,有显著的树突状突起,呈典型的DC形态,流式细胞仪测得细胞表面CD11c和MHCⅡ分子的表达量分别为69.3%和63.0%。经脂多糖或CpG-ODN刺激24 h后的DC,其表面成熟分子标志CD40和CD86上调表达,同时其刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强(P<0.01)。结论:本...
关键词：
树突状细胞 体外培养 鉴定
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