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[期刊] 中国农业科学  [作者] 贾玉东  颜菲菲  曾卫东  张才乔  
【目的】探讨胰岛素样生长因子-I(IGF-I)对产蛋鸡等级前卵泡发育的影响。【方法】用免疫组化和RT-PCR法检测IGF-I受体在鸡等级前卵泡中的表达,研究IGF-I对鸡早期卵泡发育的影响。【结果】IGF-I受体在等级前卵泡颗粒层和膜层均有表达,且随着卵泡的发育其表达水平逐渐增高,在小黄卵泡(SYF)阶段达到最大;同时,卵泡体外培养结果表明IGF-I(100 ng.mL-1)、FSH(10 n.mL-1)及IGF-I+FSH处理可显著增加SYF中膜层和颗粒层的厚度及细胞密度,且IGF受体在颗粒层和膜层中的表达水平也显著增加,其中以IGF-I+FSH联合处理组的效果最为显著。【结论】IGF-I能...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵瑞霞  李邦佑  周木清  夏瑜  梁佐钊  杨中祥  吴新诚  龚炎长  彭秀丽  李文明  熊家军  余勇  张淑君  
以广东温氏集团培育的黄羽肉鸡种蛋胚胎为研究对象,并以与人和小鼠胚胎发育相关的胰岛素样生长因子2受体(insulin-like growth factor type II receptor,IGF2R)基因为候选基因,进行了SNP位点的筛选和多态性的检测,探讨了IGF2R的变异对胚胎死亡的影响。在IGF2R第34外显子中发现2个SNP位点,对具有AlwNⅠ酶切位点的SNP位点进行了PCR-RFLP检测,分析了胚胎IGF2R的SNP位点PCR-RFLPs基因型在死亡和正常发育胚胎中分布特征。经2χ检验,鸡基因IGF2R第34外显子AlwNⅠ-RFLP基因型在死亡和正常发育胚胎中存在显著差异,在死亡...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张根华  陈伟华  赵茹茜  周浩良  陈杰  
应用放射免疫分析法,对出雏后5日龄和10日龄的肉鸡和蛋鸡血清中胰岛素样生长因子(IGF-1)水平进行了测定。结果表明:胚后早期发育阶段,蛋鸡的血清IGF-1水平随体重的增加而增加,并且高于肉鸡,尤以10日龄时更为显著(P<0.01)。不同品种相同日龄的雌性雏鸡间差异不显著,但雄性蛋鸡的血清IGF-1水平却显著高于雄性肉鸡(P<0.01);另外,同一品种雏鸡的血清IGF-1水平未见有显著的性别差异(P>0.05)。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 周孜  王锋  胁田正彰  
以12 5Ⅰ标记的、人工合成的人胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF Ⅰ )为底物 ,以鸡肾脏的提取液为粗酶液 ,研究在不同时间、粗酶液浓度、温度及pH值等条件下的酶促分解反应情况。结果显示 :①IGF Ⅰ分解酶反应时间以 30min为宜 ;②粗酶液的含量宜在 1 0 8μg·μL-1以下 ;③酶活性在 4 5℃时最高 ;④此酶在 5 0℃以下稳定 ,当温度升至 5 5℃时其活性急剧下降 ,升至 6 0℃时将降至最大活性的 2 0 %左右 ;⑤此酶最适pH值为 6 5~ 7 0。
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 张殿昌  
[期刊] 水产学报  [作者] 华益民  林浩然  
[期刊] 华北农学报  [作者] 杨兵  王金洛  胥清富  宋维平  赖平安  徐福洲  
选用1日龄北京油鸡60只,随机各半分为试验组和对照组。试验组自7日龄起,每10 d自颈部皮下注射 生长抑素卵黄抗体(SS-IgY)制剂1mL;对照组做生理盐水平行处理。采用RIA法、双抗法测定不同生长阶段鸡只血 中胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ),甲状腺激素(T3和T4)浓度,结果为:与对照组相比,试验组鸡只血中IGF-Ⅰ和T4 浓度极显著增高(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 邓益锋  张皎  侯加法  
选择58周龄高产期伊莎笼养蛋鸡90羽,应用PCR扩增鸡IGF-I启动子上游7 kb处基因片段,用PstI消化产生限制性片段长度多态性,分析IGF-I多态性与胫骨、股骨、肱骨骨密度之间的关系。结果表明,伊莎蛋鸡PP、Pp、pp基因型频率分别为0.256、0.311、0.433,P和p等位基因频率分别为0.411 1和0.588 9。方差分析显示,肱骨的骨密度与IGF-I基因多态性相关,PP基因型组的骨密度和骨矿含量均显著大于pp基因型(P<0.05),股骨、胫骨基因型间无显著差异。PP基因型体质量显著大于Pp基因型。表明伊莎笼养蛋鸡IGF-I基因多态性和肱骨骨密度显著相关,P等位基因具有一定的优...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 刘军  陈爱敬  黄峰  赵胜军  胡兵  侯永清  
利用One-Step RT-PCR技术,从鲫(Carassius auratus)肝胰脏组织中克隆了胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ),并进行了序列分析。结果表明,鲫IGF-ⅠcDNA由486个核苷酸组成,编码包括信号肽、成熟肽(B、C、A、D四个域)和E域的161个氨基酸。核苷酸同源性分析揭示,鲫IGF-ⅠcDNA序列与金鱼的同源性最高,为99.18%;与鲮、三角鲂、团头鲂的同源性次之,分别为94.44%、94.65%、94.44%;与鲤、草鱼的同源性相对较低,为86.03%和85.29%。E区域的分析结果表明,鲫IGF-Ⅰ序列为Ea-2亚型。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 吴秀梅  徐黎明  赵景壮  刘淼  曹永生  卢彤岩  尹家胜  
在鱼类胚胎发育过程中,胰岛素样生长因子-II(insulin-like growth factors-II,IGF-II)起着关键的作用。本研究根据Gen Bank收录的鲑鳟鱼IGF-II基因序列设计引物,以哲罗鱼(Hucho taimen)肝RNA提取物为模板,利用RT-PCR方法扩增出哲罗鱼IGF-II基因开放阅读框。将目的基因IGF-II与原核表达载体p SUMO连接构建出重组表达载体p SUMO-IGF。将该重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta中进行目的蛋白的诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,约在40 k D处含有清晰的条带,与预期结果相符;目的蛋白以包涵体形式存在。对包涵体进行...
[期刊] 水产学报  [作者] 王晓玉  徐黎明  刘淼  赵景壮  卢彤岩  曹永生  尹家胜  
为进一步了解哲罗鲑IGF-I,实验采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从哲罗鲑肝脏的总RNA中扩增出胰岛素样生长因子-I(IGF-I)的C DNA开放阅读框(oPeN ReADING FRAme,oRF)序列。利用原核表达载体P S构建重组表达质粒(IGF-I/P S),并将其转化到宿主大肠杆菌RoSeTTA后经IPTG诱导获得重组哲罗鲑IGF-I蛋白。经SDS-PAGe电泳检测,在35~50 ku有条带与预期相符,且重组蛋白以包涵体的形式存在。包涵体经变性/复性实验后,获得纯化的IGF-I融合蛋白。eLISA鉴定结果显示,目的蛋白能特异性识别抗鱼类IGF-I抗体,表明获得了具有免疫...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘根桃  陈伟华  郑元林  陈杰  韩正康  
胰岛素样生长因子-1(IGF-1)分别与两种载体蛋白——牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OA)用戊二醛连接,经紫外分光光度仪扫描确定偶联成功。以IGF-1-BSA作为免疫原,皮内多点注射免疫青紫兰兔,制备IGF-1抗体,经ELISA法测定,血清效价为1∶2000,放免工作浓度为1∶15000。采用氯胺-T标记IGF-1,用酸醇抽提法处理样品,去除IGF-1结合蛋白。所建立的IGF-1放免标准曲线,其最小检测量为0.06ng/mL,批内误差为4.8%,批间误差为8.2%(n=10)。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王锐  赵跃  张永云  李卫真  王淑燕  霍海龙  刘丽仙  苗永旺  霍金龙  
为了克隆猪胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-I)以及检测该因子在各组织中的转录水平,分别提取猪13种组织RNA并反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增IGF-I编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH 5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与牛等5个物种构建系统进化树。同时采用半定量RT-PCR方法分析IGF-I在猪13种组织中的表达情况。结果显示,猪IGF-I编码区全长462 bp(GenBank登录号:JX827417),编码153个氨基酸。氨基酸二级结构预测表明无规卷曲占的比例最大,为57.52%。氨基酸序列同源性分析表明,与牛...
[期刊] 水产学报  [作者] 白俊杰  叶星  李英华  李新辉  简清  罗建仁  
采用逆转录 -聚合酶链式反应 (RT PCR)方法 ,从草鱼肝脏的总RNA中扩增出胰岛素样生长因子 I(IGF I)基因序列 ,定向克隆至质粒pUC18。测定了该基因序列 ,推导其编码的蛋白质序列。克隆的cDNA序列编码包括B、C、A、D和E五个区域的 117个氨基酸。与鲤IGF I成熟肽比较 ,核酸序列和氨基酸序列的同源性分别为 93.8%和 97.1%。E区域分析结果表明 ,所克隆的草鱼IGF I序列属于IGF IEa 2亚型
[期刊] 中国农业科学  [作者] 袁安文  邓治邦  王乃东  许道军  薛立群  
【目的】探索外源促性腺激素对卵巢在雄性受体内生长、卵泡发育和卵母细胞成熟与发育能力的影响。【方法】将1日龄小鼠卵巢移植到7~12周龄雄性小鼠肾囊下,回收前用促性腺激素对受体进行处理或不处理,同龄雌性小鼠用促性腺激素进行处理后作为对照。移植21d后回收移植卵巢,观测移植体的回收率及生长和卵泡发育;对卵母细胞进行体外成熟、体外受精,观察2-细胞胚和囊胚发育率。【结果】移植21d后,未处理组移植体回收率为85.4%,与处理组(90.7%)差异不显著(P>0.05)。未处理组移植体卵泡发育至成熟阶段,回收卵母细胞均处在GV期,平均每枚移植体回收卵母细胞数为(41.4±25.8)枚,2-细胞胚胎发育率为...
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