利用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和等电聚焦双向电泳 (IEF 2D)对胡杨不同类型愈伤组织和愈伤组织分化不定芽过程中表达的蛋白进行了研究。发现 :不同类型愈伤组织中表达的蛋白存在着明显的差异。在光照和培养基中BA NAA值为 1时诱导产生的有极强器官发生能力的茎基愈伤组织 ,其蛋白组分明显地少于经过继代培养、器官发生能力明显下降的愈伤组织 ,表明了茎基愈伤组织本身分化程度低。实验获得了不同类型愈伤组织和愈伤组织分化不定芽过程中不同阶段所表达的特异蛋白 ,表现为经过黑暗和培养基中BA NAA值为 0 5的继代增殖培养 ,愈伤组织产生了特异的 2 4 5kDa和 5 ...

为探讨大量元素和植物激素对无患子愈伤组织诱导和芽苗增殖的影响并优化培养基组成,试验采用正交设计研究了不同浓度的大量元素、BA和NAA对无患子茎段培养的影响,并对试验数据进行极差分析和方差分析。结果表明BA在无患子茎段愈伤组织诱导和芽苗增殖中起主要作用,其次为MS大量元素,NAA无明显作用。全量MS和2.0 mg·L-1的BA最适于无患子茎段上愈伤组织的诱导与再分化以及芽苗的增殖和伸长;MS大量元素含量降低、BA和NAA浓度增加均不利于无患子离体培养物的生长,这在愈伤组织的再分化上表现尤为显著。无患子茎段培养的最适培养基是MS+BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1,本试验中...

将灰毡毛忍冬茎段和叶片接种在MS培养基中,并在培养基中添加不同浓度的生长素2,4-D,6-BA,NAA,以此探讨茎段和叶片2种外植体在不同浓度的生长素组合中愈伤组织的诱导和增殖情况。结果表明:叶片诱导愈伤组织的效果比茎段好,并且叶片和茎段诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L。

实验以玉米自交系齐319幼胚进行愈伤组织的诱导及继代培养,提取继代5次和10次的胚性愈伤组织中可溶性蛋白质进行双向电泳。运用2-D凝胶图像分析软件PDQuest进行分析,探究玉米胚性愈伤组织长期继代培养的分子调控机理。结果表明,长期继代10次相比5次共有20个有明显差异的蛋白点,其中14个表达下调,6个表达上调。通过质谱分析及搜索数据库鉴定出14-3-3-like protein GF14-12和ferritin-1,chloroplastic 2个蛋白,可能是愈伤组织长期继代后细胞生长代谢途径受到影响的

为了筛选出卷叶贝母愈伤组织快速增殖的最佳培养条件,从不同激素配比、培养温度、光照强度与时间等方面筛选出卷叶贝母愈伤组织快速增殖的最佳培养条件,并利用紫外分光光度法测定其总生物碱含量。结果显示,愈伤组织增殖的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1,最适温度为20℃,最适光照时间12±2 h.d-1,在此培养条件下卷叶贝母愈伤组织培养40 d可增殖3倍以上。

对高愈伤组织增殖力品种Aikoku和低愈伤组织增殖力品种Moritawase进行了形态学和组织学的观察。在相同的培养条件下2品种表现出不同的形态和组织学特征,证实了基因型对愈伤组织增殖的作用。Aikoku的愈伤组织颜色淡黄、增殖较快,而Moritawase的愈伤组织则呈褐色且增殖速度慢。组织学的观察表明,Aikoku的种胚盾片上皮组织以及由上皮细胞起源的愈伤组织的细胞分裂活性高于Moritawase;而且在上述2个品种中还观察到不同的细胞分化类型,在Aikoku的愈伤组织中观察到了带有表皮状结构的圆形细胞块,而在Moritawase的愈伤组织中却观察到了根状结构。在本研究中还观察到Aikoku...

对不同抗、感病品种棉花愈伤组织在黄萎病菌毒素诱导下 ,体内过氧化物酶和 SOD活性的变化进行了测定 ,结果表明 ,感病品种中 POD活性的升高大且早于抗病品种 ;感病品种 SOD活性随诱导时间延长而迅速下降 ,耐、抗病品种 SOD活性的降低较慢 ;随着病菌毒素诱导时间的增加 ,在电泳凝胶透射扫描系统中愈伤组织中有数种病原相关蛋白 (PR蛋白 )表达

【目的】为建立和优化火龙果的再生体系。【方法】以成年植株茎段作为外植体,研究了不同表面灭菌方法、不同取样时间及取样部位对外植体污染、褐化的影响,以及不同植物生长调节剂浓度及配比、培养条件等对茎段愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。【结果】适宜幼嫩茎段表面灭菌的方式为75%酒精消毒30 s+0.1%HgCl_2消毒6～8 min,适宜成熟茎段表面灭菌的方式为75%酒精消毒30 s+0.1%HgCl_2消毒12～15 min;以春季萌发的10～20 cm枝条诱导愈伤组织效果较好,最适愈伤组织诱导的培养基为MS+TDZ 0.4 mg/L+KT 0.8 mg/L,暗培养7 d,再转入光照培养,愈伤组织为黄绿色、致密状,外表有颗粒状突起。愈伤组织增殖培养基以MS+TDZ 0.4 mg/L+KT(或ZT) 0.8 mg/L效果较好,增殖系数在8倍以上。在愈伤组织分化过程中,添加20%～30%的椰子水对不定芽的形成具有一定促进作用,但分化率较低。【结论】以成年火龙果植株茎段建立的再生体系,愈伤组织分化率总体表现较低,最高分化率仅13%,因此还有待进一步加强和完善。

利用已经连续培养 35～ 38代、其腋芽增殖生长能力已衰退的香椿试管苗为材料 ,研究了Thidiazuron(TDZ)对叶、叶柄、茎段外植体形成愈伤组织的反应以及对腋芽增殖生长、生根的影响 ,结果显示 ,TDZ+0 .2 m g/ L NAA能使不同外植体形成愈伤组织的能力显著提高 ,其中茎段形成愈伤组织的能力较强。 TDZ小于0 .0 2 mg/ L时对芽的增殖生长起促进作用 ,而且可恢复腋芽旺盛的分枝增殖能力 ;TDZ高于 0 .0 2 mg/ L 则全面抑制生长 ,并随质量浓度的升高变态苗增多 ;经 TDZ培养过的试管苗其生根率并未降低。

以黑荆树叶片为外植体,MS培养基为基本培养基,研究了外源激素对愈伤组织诱导、增殖及分化的影响。结果表明:外源激素6-BA与IBA组合、6-BA与2,4-D组合、TDZ与IBA组合均可诱导愈伤组织,但诱导率差异达极显著水平;不同外源激素组合上诱导的愈伤组织,其增长率为165.21%~208.53%,其中以6-BA与IBA组合的增长率最大;在添加TDZ与IBA的培养基上易分化出不定芽,但不同培养基上诱导的愈伤组织对不定芽的分化率和芽的生长影响达极显著差异。综合考虑,筛选适宜愈伤组织诱导、增殖培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.5mg/L IBA,诱导率为43.36%,平均增量和增长率分别...

以羊角槭Acer yangjuechi幼嫩茎段和叶片为外植体,研究基本培养基和植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤(6-BA),萘乙酸(NAA),激动素(KT)和N-苯基-N′~(-1),2,3-噻二唑-5-脲(TDZ)对愈伤组织诱导、增殖与分化的影响。试验通过植物组织培养技术诱导外植体产生愈伤组织,并对愈伤组织进行增殖与分化。结果表明:最适宜愈伤组织诱导的外植体为茎段,基本培养基和适当的植物生长调节剂配比均能促进愈伤组织的诱导增殖与分化;诱导效果最好的基本培养基为木本植物培养基(WPM培养基)。在诱导中, 6-BA的效果显著高于NAA和KT。羊角槭愈伤组织诱导最佳培养基为WPM+0.3 mg·L~(-1)NAA+0.5 mg·L~(-1)KT+0.5 mg·L~(-1)6-BA,诱导率达62.9%;愈伤组织增殖最佳培养基为WPM+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,增殖倍数达2.4倍。TDZ对分化有重要作用, WPM+1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA+1.5 mg·L~(-1)TDZ能促进愈伤组织产生最多不定芽芽点。

以马尾松春梢嫩茎为试验材料,研究了外植体大小及处理方式、培养基类型、激素种类和浓度对马尾松嫩茎愈伤组织诱导和增殖的影响,结果表明:取春季嫩茎为材料,外植体大小以小于2 mm的材料随机接种,在改良GD培养基中添加0.300、.50 mg/L的NAA和0.50、2.00 mg/L的2,4-D,均有利于马尾松嫩茎愈伤组织的诱导和增殖。2个最适诱导和增殖培养基配方是:改良GD+0.50 mg/L NAA+2.00 mg/L 2,4-D+0.50mg/L 6-BA+2.00 mg/L KT和改良GD+0.50 mg/L NAA+0.50 mg/L 2,4-D+2.00 mg/L 6-BA,其中NAA和2...

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg·L~(-1))、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg·L~(-1))、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg·L~(-1))和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg·L~(-1))组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg·L~(-1))、6-BA(0、0.5、1.0 mg·L~(-1))和TDZ(0、0.2、0.5 mg·L~(-1))组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO_3和NH_4NO_3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS+2,4-D 3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 0.2 mg·L~(-1)+TDZ 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖40 g·L~(-1)+琼脂7.0 g·L~(-1),诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+TDZ 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖40 g·L~(-1)+谷氨酰胺100 mg·L~(-1)+琼脂7.0 g·L~(-1),体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO_3浓度提高1倍、NH_4NO_3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍; 1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。

【目的】陆地棉（Gossypium hirsutum）的遗传转化技术存在转化周期长、转化效率低等问题，其中，愈伤组织增殖速度慢是导致棉花转化周期长的关键因素。探究陆地棉愈伤组织增殖的最适光照条件，为缩短棉花转化周期提供技术基础。【方法】以陆地棉受体品种WC的下胚轴为外植体诱导愈伤组织，设置红光、蓝光、红蓝光（1﹕1）和白光（CK）4种不同光照处理，研究不同光质下愈伤组织的增殖速度、形态特征，以及相关基因表达水平和相关酶活性的差异，解析光照对愈伤组织增殖的影响并获得最优光照条件。【结果】不同光质对诱导棉花外植体出愈和愈伤组织生长具有明显影响。在4种不同光照处理下，红蓝光相较其他光质具有更显著地促进外植体出愈和愈伤组织增殖的效果，表现为愈伤组织分化时间更短，7—15 d，即与其他处理存在明显表型差异，7 d愈伤组织鲜重红蓝光（0.39 g）>蓝光（0.34 g）>白光（0.24 g）>红光（0.23 g）,15 d时，红蓝光（1.15 g）>蓝光（0.98 g）>白光（0.69 g）>红光（0.51 g），红蓝光照射下的愈伤组织鲜重是白光对照的1.65倍，比单一蓝光或红光照射下的愈伤组织鲜重增加16.5%或125.5%；与此相一致的是，红蓝光处理下，第二周的愈伤增殖率也最高，达14.67%，比红光处理（7.17%）增加1倍多。4种光质下，愈伤增殖及体胚再生相关基因的表达量，红蓝光处理均显示最高。此外，红蓝光处理下愈伤组织的过氧化氢酶（CAT）活性显著提高，活性氧（ROS）含量低于白光对照。【结论】不同光质条件下，棉花外植体的愈伤组织增殖速度不同，红蓝光（1﹕1）促进外植体出愈和愈伤增殖表现最优，其次为蓝光，再次为白光，单独的红光不利于棉花出愈和愈伤增殖。红蓝光（1﹕1）处理诱导光受体及其互作因子、愈伤增殖等相关基因的表达，增强愈伤组织内过氧化氢酶的活性，降低活性氧含量，促进细胞分裂，进而促进愈伤增殖。

The calluses induced from bluegrass seeds were treated with different concentrations of NaCl to test their survival rate and quality.The results showed that the suitable concentration was 15 g?L-1 for NaCl-tolerant callus selecting.The analysis of survival rate and growth of callus showed that the m...