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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 吕朋安  赵敏孟  高天  李蛟龙  张林  高峰  
[目的]本文旨在研究胚蛋注射丙酮酸肌酸(creatine pyruvate,CrPyr)对肉鸡空肠黏膜酶活性、胃肠激素浓度、营养素转运载体及味觉感受体基因表达水平的影响。[方法]选取16日胚龄AA肉鸡商品代胚蛋720枚,随机分成3组,每组8个重复,每个重复30枚,分别设为空白对照组、盐水组(0.6 mL 0.75%生理盐水)、CrPyr组(12 mg CrPyr溶于0.6 mL 0.75%生理盐水)。在孵化17.5 d进行羊膜腔注射试验,每枚蛋重注射剂量为0.6 mL。出壳后,将每组的公雏挑出并称质量,并从各组选出与公雏平均体质量接近的80只公雏,随机均分成8个重复,饲养到出壳后21 d。分别在孵化19 d(-19 d)和出壳0、7、21 d采集空肠黏膜样本,测定空肠黏膜酶活性、胃肠激素浓度及营养素转运载体和味觉感受体基因mRNA表达水平。[结果]与对照组和盐水组相比,CrPyr组显著提高了孵化19 d鸡胚及出壳当天(0 d)肉鸡空肠黏膜二糖酶(蔗糖酶、麦芽糖酶)和碱性磷酸酶(AKP)的活性(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王曼  陈娟  孔一力  马海田  邹思湘  
300羽1日龄雄性AA肉鸡随机分为4组,每组3个重复,每个重复25羽。分别于基础日粮中添加质量分数为1%、5%和10%丙酮酸肌酸(CrPyr),以不添加CrPyr为对照,饲喂至42日龄时各组每个重复分别随机宰杀4只,采集血样、肝脏、腹脂、左侧胸肌和腿肌,测定血清葡萄糖(BG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酸激酶(CK)、尿酸(UA)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、胰高血糖素、胰岛素和瘦素含量,以及肌肉核酸和蛋白质含量。结果表明:与对照组相比,CrPyr...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 蔡万存  李向飞  蒋广震  刘双庆  刘文斌  
[目的]本文旨在探究大米蛋白替代鱼粉以及补充微囊或者晶体赖氨酸对团头鲂生长、肠道消化吸收功能以及氨基酸代谢的影响。[方法]制备了4组等氮等能的饲料,分别为鱼粉组(FM)、大米蛋白组(RPC)、大米蛋白添加微囊赖氨酸组(MRPC)和大米蛋白添加晶体赖氨酸组(CRPC)。将鱼饱食投喂8周,每日投喂3次。[结果]FM组团头鲂每日生长指数和饲料效率显著高于RPC组(P0.05)。RPC组肠道蛋白酶、脂肪酶、Na+,K+-ATP酶、碱性磷酸酶、肌酸激酶和γ-谷氨酰转肽酶的活性显著低于FM组(P0.05)。RPC组肝
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 姚宏  郑玉才  李志雄  谈永萍  徐亚欧  王爱林  董传豪  冯卫东  饶开晴  
[目的]研究低氧环境下改变种蛋内铜离子(Cu~(2+))含量对藏、肉鸡两品种鸡胚发育、血管生成和机体抗氧化性能的影响,并探讨其影响机制。[方法]选择重量相近的藏鸡、科宝肉鸡种蛋各132枚,随机分为3组。孵化前蛋内注射不同Cu~(2+)浓度的CuSO_(4)注射液100 μL,对照组0 μg·mL~(-1)(注射100 μL 体积分数为0.9% Nacl溶液),低剂量组75 μg·mL~(-1),高剂量组300 μg·mL~(-1),低氧环境下孵化。12胚龄时固定和采集尿囊膜,采用Image-Pro Plus6.0图像分析软件对鸡胚尿囊膜血管面积、条数进行测量;记录出雏率,采集1日龄血清及各组织并测定其重量;使用试剂盒检测与抗氧化相关的指标;采用实时荧光定量PCR检测肝脏和尿囊膜中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因的表达。[结果]与对照组相比,肉鸡出雏率与蛋内注射Cu~(2+)浓度呈正相关,低剂量组出雏重/蛋重、腿体比以及高剂量组肝体比均显著提高(P < 0.05);藏鸡低剂量组肝体比显著高于对照组(P < 0.05)。肉鸡高剂量组的尿囊膜血管面积和中血管数显著增加(P < 0.05);高剂量的CuSO_(4)能促进藏鸡尿囊膜上大、中、小血管的形成并增加血管面积(P < 0.05),低剂量组的藏鸡尿囊膜中、小血管数量显著增加(P < 0.05)。藏、肉鸡试验组血清中铜锌超氧化物歧化酶(Cu, Zn-superoxide dismutase,Cu/Zn-SOD)活力均显著高于对照组(P < 0.05),丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量显著低于对照组 (P < 0.05),而谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione Peroxidase,GSH-Px)活力不受Cu~(2+)的影响。注射高剂量的CuSO_(4)能显著上调藏、肉鸡肝脏和尿囊膜中VEGF基因的表达(P < 0.05),且藏鸡尿囊膜和肝脏中VEGF基因的表达均显著高于肉鸡(P < 0.05)。[结论] 低氧环境下种蛋内注射CuSO_(4)可提高藏鸡和肉鸡机体的抗氧化能力,促进两品种鸡胚血管生成以应对低氧环境;两品种间肉鸡机体抗氧化能力强于藏鸡,而藏鸡的血管生成能力强于肉鸡。
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)  [作者] 孟雅菲  申铁  彭棋  陈震  
光合生物通过光合作用,可将光能转化为储存在生物体内部的生物质能,生物质能的生成速率受光合生长速率的影响.研究影响光合生长速率的因素,有利于提高生物质能的生成速率.蓝藻是最早进行光合作用和释氧的原核生物,具有遗传背景简单、固碳效率高等特点.丙酮酸铁氧化还原蛋白酶(PFOR)是丙酮酸固碳代谢的关键酶,在丙酮酸异化过程中起着重要作用.首先根据蓝藻的代谢网络,模拟敲除其中的酶PFOR,并利用通量平衡分析、通量可变性分析和多目标优化方法研究基因敲除后的代谢网络.通过研究分析,推测出酶PFOR对蓝藻光合生长速率的影响.
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 安琪  李春保  赵凡  王冲  张广红  徐幸莲  周光宏  
[目的]本文旨在研究短期分别摄入以牛肉和鸡肉为主的膳食对中国汉族男性青年的消化吸收、体质量和生理功能的影响。[方法]45名汉族男性青年志愿者摄食以牛肉为主的膳食2周,再摄食以鸡肉为主的膳食2周,测定各膳食阶段志愿者蛋白质消化、体质量和血液生化指标的变化情况。[结果]不同膳食阶段人体粪便蛋白质及其酶解产物不同。牛肉膳食阶段人体粪便样品酶解肽段中极性较大的肽段更多,更容易被酶解。牛肉膳食阶段志愿者的体质量变化显著高于鸡肉膳食阶段,血液中总胆固醇、低密度脂蛋白、葡萄糖、平均血红蛋白量、平均血红蛋白浓度、红细胞体积分布宽度的变化显著低于鸡肉膳食阶段,单核细胞、嗜碱性粒细胞、巨大不成熟细胞、平均血小板体积、血小板体积分布宽度、血小板压积的变化显著高于鸡肉膳食阶段。牛肉膳食阶段与鸡肉膳食阶段志愿者血压及血液中甘油三酯、高密度脂蛋白、淋巴细胞等指标变化不明显。[结论]分别摄入以牛肉和鸡肉为主的膳食会对人体消化吸收、体质量和血液指标产生不同的影响。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 黄为一  王世梅  李霞  焦德茂  
磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)是C4植物的光合关键酶,100mg/L除莠霉素A对PEPC活性有完全的抑制作用,而对C3植物的光合关键酶1,5-二磷酸核酮糖羧化酶(RubisCO)的活性却没有影响。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 杨俊花  沈向真  王喜乐  陈杰  
为研究添加葵花油和丙酮酸钙对山羊瘤胃消化代谢、瘤胃内容物中共轭亚油酸(c9,t11-CLA)含量及组织内源合成CLA前体反式油酸(TVA)积累的影响,进行了体外与体内两组试验。体外试验分对照组、葵花油组(16 mg,约占干物质质量2%)、丙酮酸钙组(80 mg)和二者组合组(16 mg葵花油+80 mg丙酮酸钙)。体内试验选用5只装有永久性瘤胃瘘管的山羊,采用自身对照,分为对照期和试验期(7 mL.d-1葵花油+0.05 g.kg-1.d-1丙酮酸钙),每期15d,间隔期10 d。结果表明:葵花油、丙酮酸钙和二者组合添加对瘤胃pH值、NH3-N和微生物粗蛋白(MCP)浓度、挥发性脂肪酸(VFA...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 葛欣竺  史宇星  王莎莎  刘智慧  蔡文杰  周敏  王世贵  唐斌  
【目的】丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PYK)是一种调节性糖酵解酶,负责调节糖酵解和糖异生之间的平衡,具有重要的生理作用。本研究通过分析异色瓢虫(Harmonia axyridis)3条HaPYK的序列结构,并结合RNA干扰(RNAi)技术,探讨HaPYK在瓢虫体内的生物学功能。【方法】基于从异色瓢虫全基因组中获得的3条HaPYK序列(被分别命名为HaPYK1-1、HaPYK1-2、HaPYK2),通过生物信息学方法分析其理化性质和序列结构,以及与其他昆虫之间的同源性。然后采用显微注射的方法将体外合成的dsRNA导入羽化第1天成虫体内,在注射后48和72 h分别收集试验材料,提取虫体总RNA后进行反转录,随后采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术测定3个HaPYK的表达水平以评估RNAi效果,并检测与海藻糖代谢相关基因的表达水平,最后检测葡萄糖、糖原、海藻糖含量以及两种海藻糖酶的活性。【结果】HaPYK1-1、HaPYK1-2、HaPYK2的开放阅读框分别为1 350、1 569、1 656 bp;蛋白大小分别为449、522、551 aa,理论等电点分别为5.04、5.02、5.01。保守结构域预测表明3条HaPYK均属于Pyruvate_kinase超家族。HaPYK二级结构主要是α-螺旋和无规则卷曲,另外也含有延伸链和β-转角。3条序列的寡聚物类型均为同源四聚体。系统进化树显示,HaPYK与同为鞘翅目的昆虫具有较近的亲缘关系,如马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)和赤拟谷盗(Tribolium castaneum)。注射ds HaPYK1-1后,HaPYK1-2和HaTRE1-4的表达量显著下调,而HaPYK2、HaTRE1-1、HaTRE1-2、HaTRE2-like、HaTPS的表达量显著上调;注射ds HaPYK1-2后,HaTRE1-1、HaTRE1-2、HaTRE1-3、HaTRE1-5、HaTRE2、HaTPS的表达量显著上调;注射ds HaPYK2后,仅HaTRE1-1表达量在48 h表现为显著上调,HaTRE1-3、HaTRE1-4、HaTRE1-5、HaTRE2、HaTRE2-like的表达量均下调。与对照组相比,在ds HaPYK1-2组中48 h时可溶性海藻糖酶(TRE1)活性显著降低,海藻糖和糖原含量显著增加;在ds HaPYK1-1或ds HaPYK2组中48 h时葡萄糖含量减少,72 h时葡萄糖、海藻糖含量增加,膜结合型海藻糖酶(TRE2)活性显著提高;在ds HaPYK2组48 h时,海藻糖含量显著减少,而糖原含量显著增加。【结论】异色瓢虫体内存在3个HaPYK,通过导入外源ds HaPYK能成功干扰靶标基因的表达水平,且抑制表达后海藻糖代谢会受到影响,但3个HaPYK的调控机制不尽相同。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 郭彪  王芳  侯纯强  董双林  孙皓  
研究了水温从17℃突变为27℃对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)稚虾己糖激酶(HK)和丙酮酸激酶(PK)活力及热休克蛋白(HSP70)表达的影响。主要结果如下:(1)温度突变后,凡纳滨对虾肝胰脏中己糖激酶活力逐渐增大,温度突变后3h达到最高,是温度突变前的2.54倍(P<0.05)。随后,对虾己糖激酶的活力逐渐下降,72h酶活力基本恢复到温度突变前的水平。(2)温度突变后1h,凡纳滨对虾丙酮酸激酶的活力降到最低,随后逐渐增大;6h达到最高,随后对虾丙酮酸激酶的活力逐渐下降并在72h恢复到温度突变前的水平。(3)温度突变0.5h后,凡纳滨对虾肌肉中HSP70的表达量迅速升高...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王丽娟  计成  郭宝海  岳洪源  
用十二指肠灌注法在不麻醉状态下研究饲料寡肽对鸡肠道氨基酸吸收的影响。灌注用寡肽分别是 4种常规饲料 (鱼粉、豆粕、棉粕、菜粕 )体外酶水解产物的 2组低分子量组分 (
[期刊] 林业科学研究  [作者] 范正琪  李纪元  田敏  李辛雷  陈东亮  卢孟柱  
应用RT-PCR和RACE法从麻疯树总RNA中分离出pepc基因全长cDNA,长度为3 142 bp,阅读框2 898 bp,编码965个氨基酸,在GenBank中登录,序列号为EU069413。它的氨基酸序列与蓖麻、陆地棉、橙、大豆、花生、烟草、油菜、拟南芥的氨基酸同源性分别为94.94%、92.46%、90.60%、90.50%、90.50%、88.33%、84.61%、82.44%。该基因编码了pepc基因家族中的pepc1,蛋白属于C3型PEPC。推测了pepc编码蛋白分子量为110.6 kD,并对其稳定性、二级结构、疏水性等特性进行了分析,最后确定了该蛋白的功能位点和结构域。
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 王超莉  张智俊  屈亚平  王蕾  
关键词:
[期刊] 华北农学报  [作者] 贺飞燕  闫建俊  白云凤  冯瑞云  张维锋  
[期刊] 华北农学报  [作者] 赵晋锋  王高鸿  杜艳伟  李颜方  王振华  赵根有  余爱丽  
为解析谷子磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC,Phosphoenolpyruvate carboxylase)在非生物逆境胁迫下的响应特征。从谷子基因组中鉴定出一个Si PEPC(Seita. 1G020700)基因,利用相关软件对其氨基酸序列、蛋白特征、功能、信号途径、顺势应答元件等参数特征进行分析和预测,随后分析了该基因在幼苗期逆境胁迫下的动态表达模式及在拔节期、抽穗期、灌浆期不同光照处理和干旱胁迫下的表达。结果表明,该基因位于谷子1号染色体,基因组序列长6 652 bp,编码965个氨基酸,基因无可变剪切、不含内含子;功能域分析显示,该基因含PEPC基因的特征结构域;多序列比对发现,该PEPC蛋白与其他植物PEPC蛋白非常相似,具有非常保守的序列结构。实时荧光定量PCR分析表明,Si PEPC(Seita. 1G020700)在ABA、低温、PEG、高盐胁迫下表达量均有所上调,其中,在ABA处理时,表达量呈现波动,在12 h被诱导达到峰值。在低温处理时,表达量持续上升,在24 h达到峰值;在PEG和Na Cl处理时表达量整体呈上升趋势,均在12 h达到峰值,在24 h其表达量均急剧下降。进一步研究表明,Si PEPC基因在拔节期和抽穗期正常光照强度下参与了对干旱胁迫的响应,推测Si PEPC(Seita. 1G020700)基因参与了谷子对非生物逆境的应答,可能在干旱和其他逆境胁迫信号途径中起关键作用。
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