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[期刊] 中国农业科学  [作者] 卫恒习  李秋艳  高凤磊  李燕  张守全  李宁  
【目的】建立高效的胚胎移植技术体系,以提高克隆猪的生产效率。【方法】比较不同移植方法和不同受体母猪状况的胚胎移植分娩率和克隆猪的出生效率,利用体外发育能力相似的不同品种和发育阶段的克隆胚胎混合移植确定最佳的受体母猪发情同期时间。【结果】克隆胚胎经由输卵管伞移植比输卵管打孔移植具有更高的移植分娩率和克隆猪效率(2.2%和0.4%,P<0.01),而胚胎移植后辅助人工授精会降低克隆效率(0.6%和2.2%,P<0.01)。利用经产母猪作为移植受体比青年猪受体具有更高的克隆效率(3.0%和0.8%,P<0.01)和平均窝产仔数((5.5±0.7)头和(2.7±0.3)头,P<0.05)。受体母猪发情...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 剧世强  芮荣  卢庆  曹爱巧  李宁  林鹏飞  郭慧利  
【目的】通过优化猪体细胞核移植程序,建立获得克隆囊胚的有效方法。【方法】比较不同电激活参数、不同体外培养条件对猪体细胞克隆胚发育能力的影响。【结果】选用1.5kV·cm-1、80μs和1DC的参数组合,对猪核移植重构胚进行电融合和电激活,可获得较高的卵裂率和最高的囊胚发育率(分别为71.4%和14.3%),且囊胚发育率显著高于其它组(P<0.05);0.4%BSANCSU23培养液培养克隆重构胚72h,半量换液并未改善克隆胚的发育,但添加10%FBS可显著提高囊胚发育率(15.1%对10.3%,P<0.05)和DNA完整率(56.8%对46.6%,P<0.05);采用猪卵泡颗粒细胞(pGC)共...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 李文化  熊忠良  樊俊华  郑新民  华文君  魏庆信  
对湖北白猪青年母猪和经产母猪用孕马血清促性腺激素 (PMSG)和人绒毛膜促性腺激素 (HCG)进行超数排卵处理 ,发情后配种 ,手术采集胚胎并观察 ,实验发现 ,1 0IU/kg体重的PMSG能促进母猪的发情并显著提高青年母猪的排卵数 ,1 0IU/kg体重的PMSG对经产母猪的超排效果不明显。超数排卵影响胚胎的质量 ,自然发情母猪较超数排卵母猪排卵较快 ,且胚胎质量较好
[期刊] 中国农业科学  [作者] 崔奎青  刘庆友  谢英  韦精卫  石德顺  
对兔胚胎细胞核移植(NT)的有关影响因素进行了系统研究。结果发现电场强度100V·mm-1,脉冲时间15μs,电脉冲3~4次的融合率显著高于其它组(P<0.05);融合前激活卵母细胞,分裂率和囊胚率显著高于融合后激活(P<0.05);当用8~16-细胞胚胎的卵裂球作供核时,卵裂率和囊胚率显著高于致密桑椹胚卵裂球为供核组;当重组胚在含3%发情牛血清(OCS)的TCM199中培养48h后,转入含10%FCS的TCM199中继续培养,卵裂率和囊胚率显著高于一直在3%OCS或10%胎犊血清(FCS)中培养的重组胚(P<0.05)。将22枚2~4-细胞期重组胚移入同期发情的受体母兔输卵管内,34d后产下...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张运海  潘登科  孙国杰  孙秀柱  李燕  戴蕴平  李宁  
目的本研究系统比较了体外受精胚(IVFEs)、孤雌激活胚(PAEs)以及体细胞核移植胚(NTEs)的发育率和囊胚质量,同时还比较了PZM-3和NCSU-23两种培养基培养对PAEs以及NTEs发育的影响。方法利用体细胞核移植技术、体外受精技术和孤雌激活技术分别生产猪的NTEs、IVFEs和PAEs,开展体外培养。结果(1)IVFEs、PAEs和NTEs的卵裂率分别为72.0%,66.0%和63.5%,各组间没有显著差异(P>0.05);囊胚形成率分别为11.0%,22.6%和16.9%,也不存在明显不同(P>0.05);然而,在囊胚质量,即ICM细胞数/总细胞数的比例上,IVFEs和NTEs均...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 付静涛  朱士恩  余文莉  刘国世  冯建忠  张忠诚  
在生产条件下,对3个优良品种的127只绵羊(道塞特47只、萨福克49只、杜泊31只)和111只波尔山羊供体使用不同国别生产的促卵泡素(FSH)实施超数排卵处理,然后对1 231只小尾寒羊和奶山羊受体实施不同方法的胚胎移植,旨在筛选出切合于生产实际成本低、效率高的超数排卵和胚胎移植方案。实验结果表明,使用新西兰产FSH对波尔山羊超数排卵后平均获得可用胚胎14枚/只,显著高于澳大利亚产FSH效果(平均7.59枚/只)(P0.05);进一步采用中国科学院产和新西兰产FSH分别对道塞特、萨福克和杜泊3个品种...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 剧世强  赵雪璠  张妍婷  孔妍  李建珅  芮荣  
以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显著差异(P>0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P<0.05)。采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显著高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P<...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 万永杰  肖慎华  邓明田  张国敏  贾若欣  张艳丽  王锋  黄明睿  
[目的]研究不同的胚龄、移植季节以及胚胎数量对转人乳铁蛋白基因(h LF)体细胞克隆山羊生产效率的影响。[方法]用奶山羊的转h LF基因成纤维细胞为供体细胞生产克隆胚胎,并以不同的胚龄、胚胎数量,在不同的季节移植给同期的受体山羊。[结果]移植1细胞期和2~8细胞期胚胎受体羊的妊娠率(分别是17.95%和28.57%)、产羔率(分别是12.82%和14.29%)显著高于移植桑椹胚、囊胚的受体羊(3.70%和0,P
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 王配  李罗刚  张霞  王淑燕  霍海龙  曾日彬  刘民  王雪飞  霍金龙  
为探讨猪雄激素受体(Androgen receptor,AR)基因的序列、结构、表达和功能,以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)睾丸组织为材料,用RT-PCR技术获得猪AR基因cDNA序列,进行生物信息学分析,应用荧光定量技术明确其mRNA的多组织表达特征。结果表明:BMI AR基因cDNA长3 257bp(GenBank登录号:KU705631),包含2 688bp的全长编码区,位于猪X染色体,含有9个外显子和8个内含子;推导出的BMI AR蛋白含有1个核定
[期刊] 中国农业科学  [作者] 潘登科  刘吉  冯书堂  牟玉莲  张莉  
【目的】建立高效的猪体细胞克隆胚胎的体外培养体系。【方法】比较了克隆胚胎体外培养过程中高、低氧分压(20%O2和7%O2)和2种培养基(NCSU-23和PZM-3)及添加表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维促进因子(bFGF)对胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数的影响。【结果】(1)与高氧(20%O2)气相相比,低氧(7%O2)条件下NCSU-23显著提高了胚胎的囊胚率和细胞数(P<0.05,13.7%vs.8.2%;46.3vs.31.0),培养基PZM-3只能显著提高囊胚细胞数(P<0.05,49.4vs.36.6);(2)与NCSU-23相比,PZM-3无论在高氧还是低氧条件,囊胚率和囊胚细胞数...
[期刊] 华北农学报  [作者] 刘彦  季海峰  宋维平  高翚  莫余忠  
试验选用优质进口催情激素药物处理 112头乏情母猪 ,研究结果表明 ,母猪的胎次和膘情对于外源激素的繁殖调控效果有明显的影响 :( 1)在母猪胎次分组中 ,后备猪与经产猪的促发情率分别为 80 %和 92 3% ,配种分娩率分别为 2 5%和 58 33%。 ( 2 )在膘情分组中 ,各组的促发情率除了膘情过肥母猪最低 ( 2 0 % ) ,其他组为 10 0 % ;配种分娩率中膘情过肥和过瘦母猪最低( 0 ) ,而膘情适中、偏肥和偏瘦组的分别为 4 6 15% ,31 2 5%和 68 75%。
[期刊] 华北农学报  [作者] 张志远  张继希  徐红运  刘肖萍  卢晓艳  段二珍  夏平安  崔保安  
应用RT-PCR技术从90日龄健康仔猪肺巨噬细胞中克隆出猪Fcγ亚单位的cDNA序列,并将其亚克隆到原核表达载体pET-32a中,构建重组表达质粒pET-FcRγ,成功表达了分子量约为29 kDa的γ亚单位重组蛋白。将重组蛋白FcRγ-His免疫小鼠,制备获得鼠抗FcRγ-His重组蛋白多克隆抗体,将得到的重组蛋白多克隆抗体采用间接ELISA和Western-blotting试验方法检测,ELISA测定多克隆抗体的效价为1∶8 000。Western-blotting结果表明,制备的鼠抗FcRγ-His重组蛋白多克隆抗体可以与重组γ亚单位蛋白进行特异性结合,从而证明重组蛋白具有较好的免疫原性。...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 徐盛玉  张果  吴德  郭海燕  郑爱荣  张明  
【目的】研究采食水平对初产母猪妊娠早期孕酮分泌、胚胎存活和胚胎成纤维细胞生长因子受体-2(FGFR2)、孕酮受体(PGR)及胚胎和子宫内膜视黄醇结合蛋白4(RBP4)、叶酸结合蛋白(FBP)、子宫转铁蛋白(UF)基因表达的影响。【方法】母猪配种后随机分到3个组,按2.0倍、1.2倍和0.6倍维持需要供给饲粮(分别为采食高、中、低水平),妊娠12、25和35d屠宰母猪,收集血清、子宫液和胚胎、子宫组织,运用ELISA测定血清和子宫液中孕酮浓度,用RT-PCR测定目的基因在胚胎和子宫内膜中的表达。【结果】妊娠12、25和35d,血清孕酮浓度在采食高水平组极显著低于采食中、低水平组(P<0.01)。...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 刘彬  陈映  李强  曾仰双  谭娅  张顺华  朱砺  
[目的]研究不同品种、杂交方式、分娩胎次和分娩季节对母猪繁殖性能的影响。[方法]根据四川某猪场2015-2017的繁殖相关数据进行差异比较和相关性分析。[结果]不同品种间的繁殖性能差异显著,大约克和长白的总产仔数(TNB),出生窝重(BW),仔猪断奶窝重均显著高于杜洛克(P<0.05),三元杂交猪的断奶仔猪数和断奶窝重均显著高于纯种(约克×约克或长白×长白)和二元杂交组合(长白×大约克或大约克×长白)(P0.05);另外不同胎次的总产仔数、产活仔数和出生窝重差异显著(P<0.05),第1胎总产仔数和活产仔数显著低于第7胎(P<0.05);不同分娩季节的断奶窝重差异显著(P<0.05),长白和杜洛克的断奶均重差异显著(P0.05)。[结论]品种,杂交组合、分娩胎次和分娩季节均会影响母猪的繁殖性能。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 徐立仁  庄景新  宋士胜  田云  周淳  赵小南  戴伟华  
选择胎次相近的长大(长白猪×大约克)母猪106头分成试验组(60头)和对照组(46头)。试验组于妊娠112d注射律胎素2mL/只,对照组同期注射灭菌生理盐水。结果试验组白天分娩比例达90.00%(对照组为54.33%),从注射律胎素到开始分娩的时间平均为31.75h(对照组为89.36h),最后一胎儿被娩出到胎衣排出的时间平均为2.56h(对照组为3.62h),发情距断乳时间平均为4.29d(对照组为5.53d),差异均达到极显著或显著水平;而产程、分娩即时活仔数与总产仔数之比以及初生仔平均体重,两组间差异不显著。分别从两组随机取两头作相对密集(每3h一次)采血,监测孕酮、雌二醇浓度的动态变化...
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