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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李正平 杨倩
为研究胆酸钠促进山羊鼻腔相关扁桃体黏膜上皮吸收禽流感灭活病毒的形态学机制,经鼻腔接种胆酸钠和禽流感灭活病毒后,用组织学光镜和电镜制片技术研究山羊咽扁桃体和咽鼓管扁桃体上皮结构的变化以及灭活病毒的吸收情况。结果表明:单独应用灭活病毒后扁桃体黏膜上皮结构完整;而应用胆酸钠或胆酸钠配合灭活病毒后扁桃体中可观察到较多脱离黏膜上皮的细胞,脱落的细胞大部分是上皮细胞和淋巴细胞,上皮细胞间间隙增大,紧密连接被打开。应用胆酸钠配合灭活病毒后可观察到部分细胞内含有病毒的囊泡。鼻腔接种后第3天,应用胆酸钠的扁桃体黏膜上皮结构基本恢复,几乎没有观察到脱离上皮的细胞。结论:胆酸钠通过打开山羊鼻腔相关扁桃体黏膜上皮细胞...
关键词：
胆酸钠 山羊 扁桃体 灭活病毒
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
周利梅 周光宏 陈波
利用山羊慢性小肠瘘管进行灌注试验 ,并结合前腔静脉采血 ,研究山羊对不同浓度 (5 0 ,10 0 ,15 0 ,2 0 0和 2 5 0μmol·L-1)类胡萝卜素 (β 胡萝卜素与叶黄素 )的吸收。试验发现 :随灌注时间延长 ,在同一浓度下山羊小肠对类胡萝卜素的吸收量逐渐增加 ,血清中叶黄素与 β 胡萝卜素浓度分别在灌注后 2h与 2 5h达到峰值 ,而维生素A (VA)的浓度仅略有降低 ;山羊对两种类胡萝卜素的吸收均呈浓度依赖性 ,但吸收率保持不变 ;血清中类胡萝卜素的浓度随其在灌注液中浓度的升高而升高 ,但VA的浓度随灌注液中 β 胡萝卜素浓度的升高基本保持稳定 ;不同浓度的胆酸盐均...
关键词：
山羊 β-胡萝卜素 叶黄素 吸收 胆酸盐
[期刊] 中国农业科学
[作者]
马明 刘月焕 陈明勇 韩春华 林健
【目的】检测鸡、鸽和虎体内的流感病毒受体的类型和分布,以期解释3种动物对禽流感病毒易感性差异的机制。【方法】使用地高辛标记的外源性凝集素染色方法检测这些动物的喉头、气管、肺脏和肠道(直肠)的上皮细胞表面SAα2,6Gal和SAα2,3Gal连接键的类型。【结果】SPF鸡的上呼吸道黏膜上皮细胞表面有大量的SAα2,3Gal和少量的SAα2,6Gal;肺房上皮细胞表面只有SAα2,3Gal;而直肠黏膜上皮中SAα2,6Gal和SAα2,3Gal都没有表达。成年鸽的上呼吸道黏膜上皮细胞表面只有SAα2,6Gal,而没有SAα2,3Gal;而下呼吸道中SAα2,6Gal和SAα2,3Gal都没有;直肠...
关键词：
流感病毒受体 唾液酸 鸡 鸽 虎
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张晓文 杨倩
分别在禽流感灭活抗原(H5N2)中添加黏膜免疫佐剂CpG(CpG佐剂组)和重组IL-2(IL佐剂组),经过鼻腔免疫鸡群后研究呼吸道各段抗体分泌细胞的分布和数量变化。结果发现:在鼻腔免疫后第3周和第5周CpG佐剂组肺单位视野中IgA分泌细胞面积显著高于对照组(生理盐水)(P<0.05),CpG佐剂组和IL佐剂组肺和气管、气管叉单位视野中IgG分泌细胞面积和数量均显著或极显著高于对照组(P<0.05或P<0.01);免疫后第5周和第7周CpG佐剂组气管和气管叉单位视野中IgA分泌细胞面积显著高于对照组(P<0.05)。免疫后第7周2个试验组气管叉中IgG分泌细胞数量极显著高于对照组(P<0.01)...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张秋婷 关如婷 潘俊慧 杨兴淼 谢盛达 余都 王学飞 曹瑞兵
[目的]为了探究日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus, JEV）感染猪扁桃体的组织和细胞嗜性。[方法]本研究筛选JEV抗原、抗体均为阴性的健康商品仔猪3头，通过颈部皮下及静脉注射接种JEV NJ2008株，2×10~(7)TCID_(50)/头，对照仔猪注射生理盐水2 mL。饲养观察一周，期间采集鼻拭子、血液和扁桃体等组织样品。通过qPCR、组织切片免疫组化和免疫荧光等方法检测病毒。[结果]3头接毒仔猪体温均正常，试验仔猪7 d中均未观察到明显的临床症状。3头接种JEV NJ2008仔猪从接毒当天开始出现2 d的病毒血症，可从持续7 d采集的鼻腔拭子中检出JEV。JEV主要感染猪软腭扁桃体，攻毒仔猪的咽扁桃体、咽鼓管扁桃体、会咽扁桃体的免疫组化检测中未发现JEV阳性细胞。在软腭扁桃体中，JEV感染细胞主要分布于淋巴滤泡的周边和弥散淋巴组织中，JEV抗原阳性细胞多为形态不规则，细胞核较大，着色较淡，具有巨噬细胞或树突状细胞的特征。随后，通过CD11b、CD163和MHC II 细胞表面标志的检测，进一步鉴定JEV阳性细胞多为巨噬细胞或树突状细胞等抗原提呈细胞。[结论]本试验结果显示在JEV感染早期的1周内，仔猪扁桃体呈现持续性感染，其中JEV阳性细胞多为巨噬细胞或树突状细胞等抗原提呈细胞，这些结果为研究JEV在扁桃体中的持续感染机制奠定了基础。
关键词：
日本脑炎病毒 仔猪 扁桃体 细胞嗜性
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
白东宁 齐雪峰 赵献军 段连茂 靳亚平 李义 王大会 王芳
【目的】优化嗜酸乳杆菌对永生化山羊子宫内膜上皮细胞体外黏附的条件。【方法】通过革兰氏染色法,研究山羊子宫内膜上皮细胞的生长状态,嗜酸乳杆菌菌液浓度、菌体生长状态和pH值以及孵育时间对菌体黏附性能的影响。【结果】当山羊子宫内膜上皮细胞培养48 h,嗜酸乳杆菌菌液浓度为1.0×109mL-1,pH值为4.0,孵育时间120 min,嗜酸乳杆菌培养24 h时,嗜酸乳杆菌对山羊子宫内膜上皮细胞的黏附性最好。【结论】永生化山羊子宫内膜上皮细胞作为细菌黏附性能研究的体外模型是有效可行的。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨倩
在研究富含淋巴细胞的肠绒毛形成过程中观察了大量的猪小肠和子宫黏膜组织切片 ,发现小肠和子宫黏膜上皮内的淋巴细胞实际上就是来源于固有膜中的淋巴细胞 ,并能通过小肠上皮迁移到腔中 ,作者暂时称之为“腔排”现象。
关键词：
猪 黏膜上皮 淋巴细胞 “腔排”
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
申育萌 赵姗姗 杨倩
本试验选用MHCⅡ、CD11b和CD16三种猪树突状细胞(DC)的抗体,对10头2月龄的杜长大三元杂交猪咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体中的DC进行标记,应用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜技术对分布于猪扁桃体内的DC进行观察和分析。结果发现:猪咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体黏膜下固有层和淋巴滤泡内的DC可共表达CD11b与CD16或CD11b与MHCⅡ分子。咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体黏膜下固有层中双阳性DC数量大约是淋巴滤泡双阳性DC数量的3倍。正常状态下双阳性DC在扁桃体上皮细胞间分布较少,咽鼓管扁桃体上皮细胞间几乎没有分布。单阳性CD11b+DC多分布于咽鼓管上皮细胞下方,仅有少量的CD11b+DC可向上皮...
关键词：
猪 咽鼓管扁桃体 软腭扁桃体 树突状细胞
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李云锋 王建美 李鹏成 杨倩
应用猪肺炎支原体弱毒株配合佐剂CpG鼻腔免疫仔猪,检测呼吸道(鼻黏膜、气管和肺)IgA和IgG分泌细胞的分布与面积变化。30头仔猪随机均分为5组,7日龄首免,鼻腔免疫组10日龄二免,首免后42 d宰杀,取鼻黏膜、气管和肺,利用免疫组化技术检测IgA和IgG分泌细胞。结果表明:应用猪肺炎支原体弱毒株配合CpG鼻腔免疫后6周,鼻黏膜IgA和IgG分泌细胞的面积均极显著增加(P<0.01),气管IgA分泌细胞的面积也显著增加(P<0.01)。而单独应用猪肺炎支原体弱毒株鼻腔免疫或肌肉注射虽然也能显著增加鼻黏膜和气管IgA、IgG分泌细胞的面积(P<0.01),但仍显著低于配合佐剂鼻腔免疫的效果。在肺...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孙裴 杨榕 顾超逸 张彦明 张琛 魏建忠 李郁 王桂军
【目的】研究IBV感染鸡气管黏膜上皮细胞(Chicken trachea epithelium cells,CTECs)中基底细胞的特性,以进一步揭示IBV感染与α-2,3-唾液酸受体之间的关系。【方法】利用光学显微镜观察、电子显微镜技术、RTPCR方法,对接种IBV的细胞进行观察和检测,研究IBV对基底细胞的感染特征。【结果】与CTECs感染IBV结果相反,单独培养的基底细胞接种IBV后,无明显的形态学损伤和亚细胞结构(溶酶体、细胞核)的损伤,细胞中也检测不到IBV的增殖。【结论】气管黏膜上皮细胞可以被IBV感染,单独的基底细胞不能被IBV感染,提示α-2,3-唾液酸受体是否存在与IBV感染...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
赵飘 何敏 韦靖婧 许丁心
采集0、1、2、3、4、5、6、10、14、18、22、26、30、34、38周龄健康中国黄羽鹌鹑的盲肠扁桃体,测量盲肠扁桃体的生长指标,观察盲肠扁桃体的显微组织结构及超微结构变化。结果表明:中国黄羽鹌鹑盲肠扁桃体位于回肠、盲肠、直肠三者连接处的盲肠基部,盲肠扁桃体近盲肠的基底部分由于盲肠壁增厚、增宽,容易与其他部位分离,盲肠扁桃体在鹌鹑孵化时已存在,0～38周龄皆具备完整的外部形态,表面光滑且饱满;盲肠扁桃体的结构由内到外分为黏膜、黏膜下层、肌层和浆膜,黏膜包括上皮、固有层和肠腺;在透射电镜下可见结构清楚的内质网、线粒体、溶酶体和肠绒毛,且线粒体嵴清晰可见;盲肠扁桃体质量、生长指数及左、右侧的长和宽的变化趋势基本保持一致,均为早期随着周龄的增加不断增长,后趋于平稳,绝对质量和生长指数均在6周龄达到最大,除22周龄右侧长径外,10～38周龄盲肠扁桃体生长指标间的差异均无统计学意义。中国黄羽鹌鹑盲肠扁桃体的发育在出生后逐渐发育,0～6周龄为快速发育期,在6周龄达到成熟,10～38周龄为成熟持续期。
[期刊] 水产学报
[作者]
绳秀珍 王锦诚 唐小千 邢婧 迟恒 战文斌
鱼类黏膜相关淋巴组织是抵御病原入侵的第一道防线。其中，鱼类鼻黏膜相关淋巴组织（Nasal-associated lymphoid tissue，NALT）近年来被国内外学者所关注，并被证明是嗅觉器官中抗原识别和启动黏膜免疫应答的重要场所，在细菌、病毒和寄生虫感染后可发挥快速的局部免疫响应。以NALT为靶点，对鱼类开展疫苗鼻内接种可起到良好的免疫保护效果。但目前，对NALT中复杂的免疫细胞与分子网络及其互作机制知之甚少。本文对鱼类嗅觉器官结构与功能、NALT的细胞与分子网络及免疫应答、鼻内接种的应答及免疫保护效果等方面的最新研究进展进行综述，旨在阐明鱼类NALT在黏膜局部发挥的免疫防御机制，以期为新型黏膜疫苗的设计与研发提供参考。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
周传丽 刘铮铸 俞英 张勤
【目的】阐明产肠毒素大肠杆菌F18(ETEC F18)引发仔猪腹泻的机理,针对其候选基因FUT1的CDS区第307位点处的突变(G→A),建立3个仔猪小肠黏膜上皮细胞系(GG、GA和AA)。【方法】首先以胎鼠和仔猪为试验材料,确定小肠上皮细胞的最佳分离方法。采用XI型胶原酶和I型中性蛋白酶的联酶混合液,将胎鼠小肠组织机械剪碎后用联酶进行消化和直接将联酶灌注到仔猪小肠腔内消化的两种方法进行比较。针对仔猪小肠黏膜上皮细胞体外培养过程中成纤维细胞污染难以消除的问题,本研究采用局部画圈法逐步去除成纤维细胞。最后,用电镜和CK18免疫荧光染色对纯化后的原代仔猪小肠黏膜上皮细胞进行鉴定。【结果】两种小肠上...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
苏泽红 陈晓武 陈秋生
用透射电子显微镜观察 15只健康中华鳖的胃黏膜上皮和腺上皮细胞的超微构造。结果显示 ,胃黏膜上皮为单层高柱状 ,细胞上部胞质中充满黏液性颗粒 ,其形状多样化 ;上皮中有少量淡染的亮细胞 ,其结构与周围细胞基本相同 ,只是数量有差异 ;上皮细胞之间具有明显的细胞连接。胃腺上皮细胞还未分化为独立的主细胞和盐酸细胞 ,但腺体细胞的结构同时具备两种细胞的特征 ,即既有发达的细胞内小管和丰富的线粒体 ,又有大量膜包分泌颗粒和粗面内质网。上述结果表明 ,中华鳖胃黏膜上皮具有分泌黏液的细胞结构 ;一种胃腺细胞可同时执行分泌盐酸和胃蛋白酶原的功能
关键词：
中华鳖 胃黏膜 胃腺 上皮细胞 超微结构
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
杨柳 许国洋 牟豪 白运川 余远迪
以提取羊口疮痂皮中病毒的DNA为模板，用PCR扩增羊口疮病毒(ORFV)的059基因序列，并进行基因克隆、测序鉴定和生物信息学分析；优化合成059基因编码序列，连接载体pET42a(+)，转化Escherichiacoli BL21(DE3)；用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导阳性克隆菌，采用免疫印迹检测表达的F1L蛋白，并以His柱纯化蛋白、梯度法复性及Bradford法测定蛋白浓度；将BHK21细胞铺于12孔板中培养至单层，分别作F1L蛋白、山羊痘病毒(GTPV)、先蛋白后病毒、蛋白和病毒混液4种方式孵育，利用荧光定量PCR测定孵育至1.0、6.0h的细胞黏附GTPV的量，研究ORFV F1L蛋白对GTPV黏附BHK21细胞的影响。结果表明：成功获得了ORFV重庆石柱分离株(ORFV–CQsz)的059基因编码序列，其编码的F1L蛋白包含1个结合细胞表面硫酸乙酰肝素受体的结构域，显示出肝素结合活性；该蛋白羧基端有2个跨膜区，不利于蛋白质的表达，但优化DNA序列构建的重组质粒菌，经IPTG诱导后获得对F1L蛋白的高效表达；免疫印迹显示F1L蛋白对ORFV抗体有较好的反应原性；Bradford法测定的纯化复性的F1L蛋白质量浓度为1.06mg/m L；荧光定量PCR检测数据显示，不同孵育处理下GTPV黏附细胞的拷贝数不同，表明F1L蛋白对GTPV黏附BHK21细胞呈现一定的干扰作用，能降低病毒黏附到细胞的拷贝数。
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