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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
钟蕾 肖克宇 戴良英
为探索鱼类病原菌融合疫苗制备的可行性,以肠型点状气单细胞菌58-20-9菌株和鱼害粘球菌G4菌株作为初发菌株进行原生质体融合,构建融合子.在酶解温度37℃下,筛选出最适酶解时间为40min,最适溶菌酶质量浓度为4mg/mL.以PEG为促融剂的条件下,58-20-9菌株与G4菌株的原生质体进行了融合,58-20-9菌株的原生质体形成率为54.7%,原生质体再生率为18.2%,G4菌株的原生质体形成率为50.8%,原生质体再生率为12.2%,初筛的原生质体融合率为4‰.点种500个初筛融合子菌落在双抗培养基上连续传代12次,得到1个稳定的融合子菌落,其稳定率为0.2%.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
钟蕾 肖克宇 周梦娇
为了对肠型点状产气单胞菌 5 8- 2 0 - 9菌株和鱼害粘球菌 G4 菌株的融合子进行选择鉴定 ,应用定性和定量药物敏感性试验 ,对两种菌原生质体融合的遗传标记进行了筛选 .结果表明 ,这两种细菌对红霉素和庆大霉素交叉耐药 .在此基础上 ,测定了红霉素和庆大霉素在选择培养基中的适用浓度 .筛选出肠型点状产气单胞菌 5 8- 2 0 - 9菌株的遗传标记为 Erm(红霉素抗性 ) ,鱼害粘球菌 G4 菌株的遗传标记为 Grm(庆大霉素抗性 )
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
史维舟 陈昌福 纪国良 邹华君
将点状气单胞菌用福尔马林、苯酚以及加热来灭活后，给草鱼注射接种，通过测定免疫鱼血清凝集抗体效价、血液中吞噬细胞的吞噬活性和强毒攻击的免疫保护力，证实了３种方法灭活的菌苗对草鱼均具有较强的免疫原性，并以苯酚灭活菌苗的免疫保护力最强。
关键词：
草鱼,点状气单胞菌,免疫反应
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈昌福 史维舟 纪国良 赵桂珍
将酚灭活的点状气单胞菌和柱状屈桡杆菌菌苗按不同比例制备成二联菌苗，注射接种草鱼后，通过检测受免草鱼血清中的凝集抗体效价和攻毒试验，初步证明了由这两种菌制备的酚灭活菌苗，可刺激草鱼产生良好的免疫反应，免疫保护力达到５６．０％～７３．０％。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李绍戊 王荻 刘红柏 尹家胜 卢彤岩
为研究嗜水气单胞菌多重耐药菌株整合子基因盒分布及分子特征,首先采用K-B纸片扩散法检测28株鱼源嗜水气单胞菌对18种抗生素的耐药性,然后利用PCR方法检测菌株中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型整合酶基因并对其携带基因盒序列进行分析。结果表明,分离到的鱼源嗜水气单胞菌呈多重耐药性,对-内酰胺类、大环内酯类、氯霉素类和四环素类药物的耐药率超过60%,而对氟喹诺酮类药物较敏感,且菌株间耐药谱差异较大。53.57%的菌株Ⅰ类整合子阳性,21.43%的菌株Ⅱ类整合子阳性,整合子阳性菌株对多种药物的耐药率均高于阴性株,且Ⅰ类整合子阳性株多重耐药率明显高于Ⅱ类整合子阳性株,表明整合子系统在嗜水气单胞菌多重耐药性中发挥重要作用。...
[期刊] 水产学报
[作者]
何福林 肖克宇 陈光荣 钟蕾 何燕林 向建国 黄兴国
采用细胞融合技术首次将肠型点状产气单胞菌菌株和鱼害粘球菌菌株融合,构建二元融合菌株AM-1,再将AM-1与荧光假单胞菌菌株融合,构建三元融合菌株AM-2。对AM-1和AM-2菌株的形态结构、生理生化特性、致病性、抗原性、抗体效价进行分析。结果表明,AM-1活菌椭圆形,无鞭毛,死菌短杆状,AM-2菌株短杆状,有鞭毛,它们的生理生化性状介于3原始亲本菌株之间;用AM-2菌株对当年健康草鱼种进行人工感染攻毒,被攻毒草鱼种具有烂鳃病、赤皮病及肠炎病的部分症状;AM-2菌株抗原的受免草鱼种对荧光假单胞菌、鱼害粘球菌和肠型点状产气单胞菌菌株的免疫保护率分别达64.90%、68.00%、67.00%,抗体效...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
彭小云 刘红 陈孝煊 张棋 袁娟 刘佳佳 吴志新
将嗜水气单胞菌粗脂多糖(C-LPS)和大肠杆菌脂多糖(E-LPS)分别经腹腔注射草鱼(剂量为4mg/kg),以注射PBS为对照。48h后,分别提取各组草鱼的头肾、脾脏、肾脏、肝脏和肠组织中的总RNA,利用Real-time PCR的方法检测不同组织中TNF-α、IL-1β、IL-10和TLR4基因的表达情况。结果显示,与对照组相比,头肾中,TNF-α和IL-1β的表达量在E-LPS组显著升高,而IL-10的表达显著下降;C-LPS组TNF-α和IL-10的表达量显著性升高;TLR4在两试验组均有显著性降低。脾脏中,TNF-α、IL-1β和IL-10在E-LPS组与对照组无显著差异,而IL-1β...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
刘宁 时晓 杜迎春 周杰珑 刘建宏 何宏轩
从患病细鳞鱼(Brachymystax lenok)的病变组织处分离到1株致病菌,经过分离培养,生化鉴定,16 S rRNA序列分析和人工感染实验确定该病原菌为杀鲑气单胞菌无色亚种(Aeromonas salmonicida subsp.achromogenes)。采用20种药物进行药敏分析,结果显示:分离菌株对阿米卡星、哌拉西林、恩诺沙星等9种抗生素敏感;对环丙沙星、诺氟沙星等4种抗生素中度敏感;对卡那霉素、青霉素、氨苄西林等7种抗生素耐药。
[期刊] 华北农学报
[作者]
陈翠珍 张晓君 房海 何振平 王秀云 巩元芳
对自然发生的草鱼肠炎、白鲢鱼打印病、草鱼烂鳃、鲢鱼白皮病、鲤鱼体表出血感染及甲鱼败血症感染等病例 ,进行了发病情况及病理变化等方面的检验。同时 ,取其病变材料做病原检验 ,表明均由气单胞菌属的细菌所引起。经对 80株分离菌鉴定 ,结果表明嗜水气单胞菌 2 9株 (占 36 2 5% )、温和气单胞菌 13株 (占 16 2 5% )、豚鼠气单胞菌 38株 (占 4 7 5% ) ,或单独或混合感染引起发病
关键词：
鱼 气单胞菌 感染 检验
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
潘晓艺 沈锦玉 郝贵杰 姚嘉贇 徐洋 尹文林 孙逢明 吴颖蕾
针对GenBank中登录的气单胞菌属(Aeromonas)的毒力基因甘油磷脂胆固醇酰基转移酶基因(GCAT)和嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的16SrRNA基因的保守区设计2对特异性引物。通过进行双重PCR反应体系优化,PCR产物的测序鉴定和特异性试验,建立了一种能同时检测气单胞菌(Aeromonasspp.)和嗜水气单胞菌的双重PCR检测方法。用此方法对5株嗜水气单胞菌、7株其他不同种的气单胞菌和5株非气单胞菌属菌株进行双重PCR检测。结果显示,气单胞菌和嗜水气单胞菌在GCAT基因的扩增区都能得到有效扩增,其中嗜水气单胞菌能同时在16SrRNA基因扩增区得到有效扩增...
[期刊] 水产学报
[作者]
叶巧真 何建国 翁少萍 邱德全 张邦杰 叶普仁 梁仁杰 潘雷 王晓斌 李本旺 李春枝
利用分离自中华鳖的嗜水气单胞菌Ah96 10 0 4、Ah970 5 16与温和气单胞菌As970 5 10菌体及其上清制备来活菌细胞苗和化学成份疫苗。肌肉注射中华鳖进行免疫 ,加强免疫 15d后 ,用菌株Ah96 10 0 4腹腔注射进行攻击 ,观察 2 0d。结果表明 ,温和气单胞菌As970 5 10株的菌苗及其胞外分泌物 (ECP)苗组和嗜水气单胞菌Ah96 10 0 4株的外膜成份组对嗜水气单胞菌的攻击的保护率最高 ,分别为 87.5 %和 75 % ,而其它疫苗组的保护率均在 5 0 %以下。
关键词：
中华鳖 嗜水气单胞菌 温和气单胞菌 疫苗
[期刊] 水产学报
[作者]
冯永永 姜兰 邓玉婷 谭爱萍 张瑞泉 罗理
为了解广东地区猪－鱼复合养殖模式下气单胞菌整合子流行情况及其耐药特征，从广东省５个不同猪－鱼复合养殖场采集分离猪粪、鱼、池塘水及池塘底泥的气单胞菌共３１７株，通过微量二倍稀释法测定其对２０种药物的敏感性；ＰＣＲ扩增Ⅰ类整合子整合酶基因ｉｎｔｉ１，并分析其基因盒阵列结构。结果表明，３１７株气单胞菌对２０种药物耐药程度不一，氨苄西林、磺胺间甲氧嘧啶、萘啶酸的耐药率相对较高。ｉｎｔｉ１的检出率为１５．７７％，鱼源和猪源的整合子检出率高于环境源。整合子阳性菌对测试的１２种药物的耐药率显著高于阴性菌，且表现为多重耐药；５０个Ⅰ类整合子共检测到１６种耐药基因盒，包括了编码氨基糖苷类耐药基因ａａｄａ１、ａａ．．．
关键词：
气单胞菌 复合养殖模式 I类整合子 耐药
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李华 游玲 刘晓晴 刘延琳
对酿酒酵母(S accharomy ces cerev isiae)与酒类酒球菌(O enos.oen i)的跨界融合子F-20-7进行抗生素筛选、降酸试验、生长试验等生产性能测试及相关基因鉴定研究。结果表明,氨苄青霉素对融合子的影响较小,融合子对L-苹果酸的降解率在54.06%~78.81%,在挑选出的融合子中仅有4株能够在YNB、模拟葡萄汁及天然葡萄汁中生长,其生长力较葡萄酒酵母差。PCR扩增结果显示,融合子质粒DNA中存在苹果酸-乳酸发酵的两个关键酶基因,即苹果酸-乳酸酶基因M leA和苹果酸-乳酸通透酶基因M leP,测序结果表明M leP基因与G enB ank中M leP基因序列的...
关键词：
酿酒酵母 酒类酒球菌 跨界融合子
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孔维光 吴志新 李思思 赵慧 李锡阁 陈孝煊
为探讨益生性枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞黏附及对嗜水气单胞菌的抑制作用,以草鱼肠上皮细胞为研究对象,检测了枯草芽孢杆菌对肠上皮细胞的黏附率、对嗜水气单胞菌的黏附抑制率和对各种生理生化指标的影响。结果显示:枯草芽孢杆菌对草鱼肠上皮细胞形态、细胞中四甲基偶氮唑盐(MTT)OD值、乳酸脱氢酶(LDH)、碱性磷酸酶(AKP)和谷草转氨酶(GOT)活性等各种生理指标无显著影响,但在孵育3h和6h后分别显著降低了Na+,K+-ATP酶和谷丙转氨酶(GPT)的活性;与嗜水气单胞菌孵育3h后,肠上皮细胞由椭圆变成不规则形态,
[期刊] 水产学报
[作者]
葛阳杨 朱军莉 刘丽 任奕婧
为鉴别大黄鱼腐败菌气单胞菌的致腐能力,采用生理生化和分子方法(16S r RNA)鉴定冷藏大黄鱼货架期终点不产H2S的菌株。分析菌株在体外培养条件下的生长、胞外酶活性、三甲胺(TMA)和生物胺形成的腐败表型,将菌株接种在灭菌鱼汁中测定其致腐能力。结果显示,分离株AE03和AE04在037°C及060的盐度下生长良好,在4和25°C条件下AE03菌株的生长速率显著高于AE04菌株。2株细菌不产H2S,能还原氧化三甲胺(TMAO),分解尿素和液化明胶,氧化酶、赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶、精氨酸水解酶等都呈阳性,能利
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