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[期刊] 西南农业学报
[作者]
张国武 孟庆玲 乔军 王熙凤 张凯 宁程程 季春辉 才学鹏
【目的】分析肝片吸虫Legumain蛋白的分子特征、遗传进化及抗原性,评估其作为诊断抗原的潜力。【方法】根据GenBank中已发表的肝片吸虫(Fh)Legumain基因序列设计特异性引物,以Fh总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,并将扩增产物克隆到pMD19-T载体中测序,分析其分子特征。将Legumain基因克隆入表达载体pET-32a(+)中,将其转化至Escherichia coli感受态细胞Transetta(DE3)中,IPTG诱导表达并获得纯化的重组蛋白Legumain,进行抗原性分析。【结果】Fh Legumain基因cDNA全长1278 bp,编码425个氨基酸,编码蛋白分子的优势抗原表位主要集中在第73～103、115～137、254～308、319～337、360～375位;1～21位有信号肽,无跨膜区,为亲水性蛋白。【结论】经SDS-PAGE检测,重组Legumain蛋白分子量约为65 kDa,与预期大小相符;Western blot分析表明,重组Legumain可被感染肝片吸虫的绵羊阳性血清特异性识别,证明具有良好的反应原性。小鼠免疫试验证实该蛋白具有良好的免疫原性。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
顾有方 倪兆朝 沈永林 盛维银
研究了来源水牛、黄牛体内的肝片吸虫虫体抗原的氨基酸组分,并对黄牛体内虫体进行先超声裂解后冷浸或先冷漫后超声裂解处理以比较其抗原氨基酸组份的变化。结果表明先超声裂解后冷浸的脱脂和未脱脂的水牛、黄牛虫体抗原氨基酸含量分别为374.053mg·dL~(-1),396.318mg·dL~(-1)和119.958mg·dL~(-1),243.341mg·dL~(-1),水牛虫体氨基酸明显高于黄牛虫体。而先冷浸后超声裂解处理的脱脂和未脱脂的黄牛
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
毛鑫智 王丙云 陈龙 杨倩 毛卫华 J.Gonzalez-Gallego
20头健康、2～3岁、体重300～400kg 雄性去势水牛,经粪便检查和 Dot-ELISA 检测确认为无肝片形吸虫感染。分二系列进行实验。第1系列8头水牛随机分成感染组(5头)和对照组(3头),感染组每天每头口服60个囊蚴,连续20天,共感染1200个囊蚴,从开始感染至实验结束历时26周,研究慢性感染的效果;第2系列12头水牛,分成感染组(9头)和对照组(3头),感染组1次每头经口感染1600个囊蚴,历时
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
黄世乐
应用间接免疫荧光技术,发现肝片形吸虫头部咽的两侧各有一强的5-羟色胺(5-HT)荧光集落(脑神经节),由其发出的神经干分布于虫体的背腹及两侧,神经干继续发出细小分支直至皮肌层和吸盘等.生殖系统(睾丸、卵巢、子宫、卵模和卵黄腺纵隔等)和消化系统(咽和肠管壁等)亦有5-HT 免疫反应分布.揭示肝片形吸虫体内不仅存在5-HT,而且存在色胺能神经系统,证明了5-HT 为肝片形吸虫的神经递质.
关键词：
血清素 肝片形吸虫 神经元 免疫组织化学
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
顾有方 毛鑫智 沈永林 J.Gonzalez-Gallego
经粪便和Dot ELISA检查确认无肝片吸虫感染的 2 0头雄性去势水牛 ,分两系列试验。系列Ⅰ实验中 8头水牛随机分成感染组 (5头 )和对照组 (3头 ) ,感染组每头每天口服 6 0个肝片吸虫囊蚴 ,连续 2 0d ;系列Ⅱ实验中 12头水牛分成感染组 (9头 )和对照组 (3头 ) ,感染组每头一次口服 16 0 0个肝片吸虫囊蚴。在感染前及感染后每周颈静脉采血 ,分离血清 ,测定丙二醛 (MDA)、过氧化物酶 (CAT)、超氧化物歧化酶 (SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)的活力。在系列Ⅱ实验中 ,MDA在感染后 15周内显著高于对照组 ,以后下降 ,至 19～ 2 2周...
关键词：
水牛 感染 肝片吸虫 抗氧化功能 自由基
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
沈涛 沈永林 何国声 徐梅倩 顾越星
用大片吸虫分泌排泄 (ES)抗原免疫BALB/c小鼠 ,取其脾细胞与SP2 / 0骨髓瘤细胞融合 ,经筛选和 3次克隆化培养后获得 2株分泌抗大片吸虫ES抗原单抗的杂交瘤细胞 (F5,F9)。经传代、冻存、复苏培养检测和染色体检查 ,证实其分泌单抗的性质稳定。通过间接ELISA试验证明 ,F5和F9单抗能与大片吸虫、肝片吸虫的ES抗原发生特异性反应 ,而不与它们的虫体抗原反应。SDS PAGE电泳和Western blot显示 ,F5McAb能与ES抗原的相对分子质量为 2 6 0 0 0～ 2 80 0 0的蛋白条带反应 ,而不与其可溶性虫体抗原反应。表明F5McAb有ES抗原特异性 ,是一...
关键词：
大片吸虫 分泌排泄抗原 单克隆抗体
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
王丙云 陈龙 毛鑫智 陈继明 Javier Gonzaloz
为研究水牛抗肝片吸虫的免疫反应机制,选择8头雄性去势水牛经粪便检查和 Dot-ELISA 检测确认无肝片吸虫感染.经2周适应性饲养后,随机分成感染(n=5)和对照组(n=3)。感染组水牛每天每头经口感染60个囊坳,连续20天,共接种1200个囊蚴。每周颈静脉采血,测定外周血的 T、B 淋巴细胞的比例、血清总蛋白含量和组分比例以及抗体(IgG)水平。结果表明:感染组水牛在感染肝片吸虫后第2周开始,T 淋
[期刊] 西南农业学报
[作者]
胡小九 李石友 李文学 施忠芬 申时先 李秀枝
为了解弥渡县牛肝片吸虫感染情况,采用粪便虫卵检查法进行牛肝片吸虫病的流行调查。结果表明,在检查的960头牛中,阳性牛220头,阳性率为22.92%。其中坝区阳性率为14.06%,半山区为28.75%,山区为25.94%;黄牛阳性率为24.58%,水牛为21.25%;阳性牛最小年龄为1.5岁,最大为13岁,阳性率随年龄增长而提高;阳性牛的每克粪便虫卵数(EPG)最高216枚,最低3枚。该调查研究揭示了肝片吸虫病在弥渡县的牛中感染较广泛,尤其是半山区、山区较高。
关键词：
弥渡县 牛 肝片吸虫病 流行调查
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李文志 张国栋 王立平 杨旭春
赤峰市北部的大兴安岭南段山地,是水草丰美的森林牧地,属东北区境内的罕山亚区,受国家保护的珍稀野生动物马鹿(Cerous elaphus)栖息于此.自1985年以来,笔者对这一带野生及人工驯养的成年马鹿感染肝片吸虫(Fasciola hepatica)的情况进行了初步调查。调查采用反复沉淀法进行常规粪检及对各种原因死亡淘汰者进行肝脏寄生虫剖检法.通过对分散资料的统计,粪检39头,阳性31头,占79.5%。其中
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
顾有方 沈永林 I.Ferre T.Schnieder 毛鑫智 刘跃兴 彭立斌
采用粪便检查、斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)和斑点杂交试验(Dot-hybridization),检测苏皖两个省10县市302农户的307头水牛的粪便、血清及中间宿主小土蜗(Galba pervia),进行水牛肝片吸虫(Fasciola hepatica)感染的调查分析。粪便虫卵呈阳性43头,阳性率为14.01%,安徽为13.61%(18/155),江苏为16.48%(25/152);感染水牛最小年龄为1.5岁,最大为16岁,阳性率随年龄增加而提高;母水牛阳
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
钟平生 梁广文 曾玲
应用苗期群体抗性测定方法,鉴定了华航1号、华航8号、胜巴丝苗等10个水稻品种对稻褐飞虱的抗性;应用高效液相色谱(HPLC)技术对其中6个品种的特征次生物质色谱峰进行了测定,并分析了主要抗性峰值与抗性级别之间的关系。结果表明:Mudgo为高抗,粳籼89、华航8号、胜巴丝苗为抗虫品种;小农占、籼小占、华航1号和粤香占呈中抗反应;双桂呈感虫反应,TN1为高感品种,这一鉴定级别与田间稻褐飞虱种群增长趋势指数变化相一致;稻褐飞虱在TN1上的种群趋势指数达28.079,中抗品种粤香占上为6.427 9,均表现增长趋势;在抗虫品种胜巴丝苗上种群趋势指数达1.513 8,高抗品种Mudgo上仅为0.862 8...
关键词：
水稻 褐飞虱 次生物质 抗性鉴定
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
江善祥 毛鑫智
将 8 5只体重 2 5 0～ 35 0 g的健康SD大鼠 (雌雄各半 )随机分成感染组 (n =5 5 )和对照组 (n =30 )。感染组大鼠每只一次经口感染 2 5个肝片吸虫囊蚴 ,每周采血测定血浆天冬氨酸转氨酶 (AST)、丙氨酸转氨酶 (ALT)及碱性磷酸酶 (ALP)活性。于感染后第 3,6 ,9,11和 13周分别宰杀 12只 (感染组 8只 ,对照组 4只 )大鼠 ,测定其肝微粒体蛋白、细胞色素P 4 5 0、细胞色素b5的浓度和肝脏药物代谢酶活性。结果表明 ,大鼠感染肝片吸虫后 ,血浆AST、ALT、ALP活性分别在感染后 3～ 7周、 3～ 5周、 5～ 13周极显著上升 ...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈小军 费春 樊丽萍 杨益众
【目的】明确新型杀虫剂氯虫苯甲酰胺在植株内的内吸传导特性,为合理使用氯虫苯甲酰胺防治蔬菜、水稻等害虫策略的制定提供科学依据。【方法】采用水培法和涂药法分别研究氯虫苯甲酰胺在大豆植株中是否具有内吸传导特性。以乙腈为溶剂,超声波处理提取大豆植株中的氯虫苯甲酰胺,经预净化,由高效液相色谱(带二极管阵列检测器)检测分析氯虫苯甲酰胺在大豆植株中各部位的分布状况。【结果】采用水培法处理,培养液中氯虫苯甲酰胺的浓度为50μg.mL-1时,24 h后大豆茎杆和叶片中的含量分别为15.22和4.73μg.g-1,48 h后大豆茎杆和叶片中的含量分别为8.71和7.96μg.g-1;当培养液中氯虫苯甲酰胺的浓度为...
关键词：
氯虫苯甲酰胺 大豆 内吸 传导
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
钟军华 张颖 卢之颖 芮琪 徐朗莱
研究了不同盐浓度胁迫下不结球白菜暑绿幼苗叶片中可溶性蛋白质含量、内肽酶同工酶及其活性的变化和内肽酶同工酶生化特性。结果表明,暑绿叶片中存在5种内肽酶同工酶(EP1~EP5),其中,EP3和EP5为半胱氨酸型内肽酶,EP1和EP2为丝氨酸型内肽酶,而EP4几乎不被所试的各种内肽酶抑制剂所抑制;内肽酶的最适pH为6.0,最适温度为50℃;EP3、EP4和EP5的热稳定性较好,在60℃下保温1 h后还保留较高活性。100 mmol.L-1NaC l处理暑绿4 d后,EP4活性增强,其他4种同工酶活性变化不明显;200 mmol.L-1NaC l处理相同时间,叶片1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(R...
关键词：
不结球白菜 盐胁迫 内肽酶 叶片衰老
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘金明 王美 叶萍 傅志强 蔡学忠 石耀军 陈永军 林矫矫 林邦发 施幅恢
免疫刺激复合物(ISCOM)是 Morein 创立的一种疫苗免疫载体,其中的主要佐剂成分是 Quil A(皂素的一种成分).本研究首先用日本血吸虫中国大陆株成虫可溶性租抗原(SWA)作为免疫抗原,按改进方法结合皂素制备 ISCOM,对其在小鼠体内诱导的免疫保护力和 SWA 在 FCA/FIA、蜂胶二种佐剂条件下的免疫保护力进行了比较研究,然后对不同剂量 SWA-ISCOM 的免疫效果进行考察;最后对重组日本血吸虫中国大陆株28kD GST(rSj28GST)-ISCOM 在小鼠体内所诱导的免疫保护力进行观察.结果表明 IS-COM 在进一步应用于各种基因工程苗方面有研究价值。
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