- 年份
- 2024(3112)
- 2023(4427)
- 2022(3009)
- 2021(2536)
- 2020(2029)
- 2019(4279)
- 2018(4395)
- 2017(8392)
- 2016(4803)
- 2015(5410)
- 2014(5612)
- 2013(5171)
- 2012(4398)
- 2011(3855)
- 2010(3782)
- 2009(3566)
- 2008(3513)
- 2007(3199)
- 2006(2845)
- 2005(2778)
- 学科
- 济(20373)
- 经济(20355)
- 业(11525)
- 管理(11035)
- 企(8176)
- 企业(8176)
- 中国(7814)
- 农(7488)
- 方法(6947)
- 数学(6042)
- 业经(6041)
- 数学方法(5984)
- 农业(5019)
- 学(4849)
- 发(4613)
- 地方(4572)
- 发展(4076)
- 展(4072)
- 产业(3943)
- 财(3861)
- 制(3655)
- 信息(3444)
- 总论(3293)
- 信息产业(3236)
- 体(3220)
- 银(3111)
- 银行(3099)
- 化(2974)
- 融(2971)
- 金融(2971)
- 机构
- 大学(68593)
- 学院(68572)
- 研究(26022)
- 济(25993)
- 经济(25454)
- 管理(21920)
- 中国(18775)
- 理学(18704)
- 理学院(18478)
- 科学(18175)
- 管理学(17919)
- 管理学院(17819)
- 农(17660)
- 京(15040)
- 农业(14087)
- 所(13998)
- 业大(13451)
- 研究所(12960)
- 中心(11759)
- 财(11419)
- 江(11203)
- 院(9462)
- 财经(9241)
- 农业大学(9229)
- 北京(9053)
- 范(9005)
- 省(8857)
- 师范(8855)
- 技术(8821)
- 州(8679)
- 基金
- 项目(48895)
- 科学(37499)
- 基金(34819)
- 研究(32499)
- 家(32144)
- 国家(31902)
- 科学基金(26331)
- 社会(20819)
- 省(19858)
- 社会科(19724)
- 社会科学(19718)
- 基金项目(18033)
- 自然(17239)
- 自然科(16871)
- 自然科学(16867)
- 划(16626)
- 自然科学基金(16553)
- 教育(14565)
- 资助(13875)
- 编号(12598)
- 重点(11482)
- 发(11067)
- 成果(10269)
- 计划(10081)
- 部(9862)
- 创(9777)
- 科研(9519)
- 科技(9375)
- 课题(9317)
- 创新(9280)
共检索到102269条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
贺加双 马卫明 邓立新 宋移福 刘莲莲 曹永芝 谢冰
【目的】检测怀孕肉牛早孕因子(Early pregnancy factor,EPF)的活性,并对其进行分离纯化,以期为EPF快速检测方法的建立提供依据。【方法】采集妊娠1~9个月的肉牛血样,并进行妊娠诊断,通过玫瑰花环抑制试验(Rosette inhibition test,RIT)检测其早孕因子的活性。对有活性的血样依次进行DEAE-52离子交换层析、ConASepharose 4B亲和层析和Heparin Sepharose Cl 6B亲和层析,分离纯化EPF,对纯化产物进行SDS-PAGE检测,并测定其等电点。【结果】怀孕牛和未怀孕牛血清的玫瑰花环抑制滴度差异显著(P<0.05)。玫瑰花...
关键词：
肉牛 早孕因子 妊娠状态 孕血清
[期刊] 西南农业学报
[作者]
邬晓勇 何钢 颜军 郭晓强 苟小军
对传统抗生素的活性测定方法进行了比较及改进,建立了蛙皮抗菌肽的活性测定方法——TTC微量稀释法;利用SephadexG25凝胶层析分离抗菌肽粗品获得一个活性组分命名为G5,利用TTC微量稀释法测定活性组分G5抑制大肠杆菌的MIC是80μg/mL、抑制铜绿假单胞菌的MIC是20μg/mL、抑制金黄色葡萄球菌的MIC是80μg/mL;活性组分G5再经凝胶HPLC分离纯化获得两个活性组分Ⅰ和Ⅱ,组分Ⅰ和组分Ⅱ再分别经过RP-HPLC分离纯化获得两个色谱纯的活性组分命名为RanaⅠ和RanaⅡ。
关键词：
抗菌肽 活性筛选 分离纯化
[期刊] 华北农学报
[作者]
张小梅 韩念法 张美祥 李广录 范三红 郭蔼光
从经水杨酸处理的拟南芥开花期植株中获得cDNA,扩增得到Alpha-dioxygenase 1(DOX1)基因,进行原核表达、纯化和生物活性检测。利用原核表达载体pMAL-c4x在T7 Express CompetentE.coli和BL21(DE3)-RIPL codon+菌株中表达DOX1,经Amylose Resin亲和层析柱纯化。SDS-PAGE结果表明,重组融合蛋白在BL21(DE3)-RIPL codon+中的表达通过灰度值比较分析以可溶性为主,表达率约3.7%,纯化的DOX1纯度可达45%。愈创木酚法表明,可溶性重组蛋白不具有过氧化物酶活性;2,4-DNP法测试表明可溶性重组蛋白...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
周雅婷 许童羽 陈春玲 周云成 姜美羲
为解决肉牛采食行为识别问题，利用集陀螺加速度计和蓝牙模块为一体的传感器节点采集肉牛的行为姿态数据并通过蓝牙轮询组网模式将数据无线传输到ＰＣ上位机，进行实时显示，对采集的肉牛行为数据进行分析，进而识别肉牛采食行为。选用４０头健康处于育肥期的西门塔尔肉牛样本（体重约３８５ｋｇ，舍饲，每天饲喂２次，可自由饮水），分为２组，其中３０头为试验组，用松紧带在肉牛颞窝部位佩戴传感器节点；另外１０头为对照组，不佩戴传感器，用于比较肉牛是否因佩戴节点而有异常反应。同时在肉牛限位栏的前方安装监控摄像头，记录肉牛的行为信息，以作为后期数据处理依据。试验记录的原始数据包括Ｘ、Ｙ、Ｚ三个轴的加速度、角度以及角速度的九个．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
张东玲 关瑞章 黄文树 熊静 徐继松 宋宝东
为了能够快捷地分离纯化出单一的抗菌肽,实验采用不同pH值(离子交换流动相pH3.0、4.0、5.0;反相液相层析流动相pH 2.0、4.5、7.0)缓冲液,不同色谱柱(离子交换和凝胶过滤层析柱分别与反相液相层析柱)联用对日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果进行了比较,并分析了琼脂板扩散法和微孔液体培养法检测抗菌活性的优缺点。结果显示:pH 4.0缓冲液为最佳离子交换流动相,蛋白提取率为16.43%,得到2个洗脱峰;反相液相层析3种pH缓冲液分离效果均不理想,凝胶过滤层析柱与反相液相层析柱联用能明显改善日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果,洗脱峰数量较多,峰形单一且尖锐狭窄,基线平而低。琼脂板扩散法检测抗菌...
关键词：
日本鳗鲡 抗菌肽 pH 色谱柱 抗菌活性
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
王文棋 盖颖 陆海 蒋湘宁
为了实现DNA重组酶Cre在体外的应用,以pET-30a高效表达载体为基础构建了pTE30-Cre质粒.将此质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导的Cre基因的高效表达.对表达出的Cre重组酶蛋白进行镍离子鳌合法一步纯化,并以带有两个同向loxP位点的质粒为底物,对纯化出的Cre酶进行活性检测.该实验为Cre酶的体外应用奠定了基础.
[期刊] 中国水产科学
[作者]
祝雯 林志铿 吴祖建 林奇英 谢联辉
采用硫酸铵分级沉淀 ,BlueSepharose 6FastFlow、SPSepharoseFastFlow和HPLC柱层析 ,从河蚬 (Corbiculafluminea)中分离纯化蛋白CFp a。经SDS PAGE测定 ,其分子量为 2 4 .0kD ;经苯酚硫酸法测定 ,其含糖量为 2 .3%。 10～ 16 0 μg/mLCFp a分别处理肝癌细胞BEL74 0 4 72h后 ,采用四氮唑还原法 (MTT)检测癌细胞的生长活性 ,结果显示 ,CFp a对BEL74 0 4癌细胞生长的抑制率在 2 4 .6 %～ 79.2 %。采用质量浓度为 2 0 μg/mL和 4 0 μg/mL的C...
关键词：
河蚬 蛋白纯化 癌细胞 诱导凋亡
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张名位 郭宝江 张瑞芬 池建伟 魏振承 徐志宏 张雁
目的分离、纯化和鉴定黑米抗氧化的主要活性成分。方法以体外总抗氧化能力为活性跟踪指标,对黑米抗氧化提取物用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇等不同极性溶剂萃取分部后得到抗氧化能力最强的部分,再用SephadexLH-20分离得到抗氧化主活性成分,采用紫外-可见光谱、红外光谱、ESI-MS质谱和核磁共振(1HNMR和13CNMR)波谱法对其进行结构解析。结果黑米抗氧化提取物的5种溶剂萃取物以水部和正丁醇部的抗氧化能力最强,其总抗氧化能力分别为383和392ku·g-1,其中,从水部可得到4种抗氧化主活性成分,总抗氧化能力分别为976、878、1134和1087ku·g-1。波谱结构解析表明,4种成分均...
关键词：
黑米 抗氧化活性成分 结构鉴定
[期刊] 水产学报
[作者]
李丹彤 张泽虎 赵元凤 钟莉 张泽宇 王冬梅 李伟
将海洋红藻-绒线藻(Dasya villosa)经磷酸盐缓冲液抽提,20%~75%硫酸铵分级沉淀,Sephadex G-200分子筛层析,得到绒线藻凝集素(DVL)。用Sephadex G-200分子筛层析测得其分子量为547ku。该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D-果糖、D-半乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露聚糖、γ-球蛋白所抑制,仅被牛甲状腺球蛋白所抑制,最小抑制浓度为96.88mg.L-1。2价金属离子Ca2+、Mg2+及EDTA对该凝集素凝集活性没有影响。其凝集活性在25~80℃保持不变为28,90~100℃加热30min,活力为27,仍保留50%的活性,说明其具有较强的耐热性。经t-检验,注射...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张源淑 陈伟华 邹思湘
酪蛋白的胃蛋白酶水解物通过RP-HPLC进行分离,并用NG108-15 细胞对其进行阿片样活性鉴定。实验结果表明:酪蛋白经胃蛋白酶处理2 h 后, 其酶解产物中有阿片样活性物质产生, 而酪蛋白本身无阿片活性。
关键词：
酪蛋白 胃蛋白酶 阿片肽 阿片活性物质
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李康 郭海磊 奚绪光
【目的】探索牛和果蝇DHX36解旋酶的表达纯化条件及底物结合活性,为深入研究DEAH-box解旋酶提供理论参考。【方法】以较高等动物牛(Bos taurus)和较低等动物黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)RNA解旋酶BtDHX36和DmDHX36为研究对象,首先,构建重组表达载体pET15b-sumo-BtDHX36和pET15b-sumo-DmDHX36,将2种质粒分别转入表达菌株BL21(DE3)中,诱导表达2种目的蛋白,利用Ni-NTA层析柱、HisTrap SP HP柱纯化得到目的蛋白。然后,采用荧光各向异性法(FA)研究溶液和温度条件对2种蛋白底物结合活性的影响,以及二者的底物结合偏好性。最后利用快速停流-荧光共振能量转移(FRET)技术对2种DHX36的双链底物解旋活性进行比较。【结果】获得了纯度大于95%的全长BtDHX36和DmDHX36蛋白,2种DHX36解旋酶的最佳底物结合条件为:20 mmol/L Tris-HCl (pH 7.5)、50 mmol/L NaCl、2 mmol/L MgCl_2、反应温度37℃。在此条件下,2种同源DHX36均可结合多种类型核酸底物(ssRNA、ssDNA、parallel G4、anti-parallel G4),且BtDHX36结合平行结构G4底物(parallel G4)的倾向更明显,DmDHX36无此趋势;2种DHX36解旋酶结合不同长度ssDNA的能力不同,BtDHX36更倾向于结合较长的单链DNA底物,而DmDHX36更倾向于结合较短的单链DNA底物;二者均能高效解旋dsRNA和dsDNA底物,DmDHX36更倾向于解旋dsDNA,而BtDHX36无明显倾向性。【结论】成功表达并纯化了BtDHX36和DmDHX36蛋白,确定了其最适结合条件,比较了2种DHX36解旋酶对不同底物的结合及解旋偏好。
[期刊] 水产学报
[作者]
孙颖颖 浦寅芳 阎斌伦 王长海
菹草石油醚组分能显著抑制赤潮微藻米氏凯伦藻的生长，为了获悉该组分抑制米氏凯伦藻的物质基础，采用硅胶柱层析和制备薄层层析等方法，对菹草石油醚组分中的抑藻活性物质进行分离纯化。进一步应用质谱、核磁共振碳谱和氢谱等技术，鉴定抑藻活性物质。实验从菹草石油醚组分中分离纯化到４种抑藻活性物质。当浓度为１６μｇ／ｍ Ｌ时，它们对米氏凯伦藻表现出一定的抑藻活性。结构鉴定表明，此４种抑藻活性物质分别为二十五烷醇、邻苯二甲酸二（２－甲基己基）酯、棕榈酸和邻苯二甲酸二（５，５－甲基己基）酯。此４种化合物为首次从菹草中分离得到。抑藻活性分析表明，当浓度为５０μｇ／ｍ Ｌ时，４个样品均能显著抑制赤潮异弯藻的生长。其中，．．．
关键词：
菹草 抑藻活性物质 分离 赤潮微藻
[期刊] 中国农业科学
[作者]
黄文 谢笔钧 王益 杨尔宁 罗锐
选用江苏省泰兴市大佛指白果为原料,采用盐溶和盐析的方法,从白果中分离制备出清蛋白(GAP)、球蛋白(GGP)和盐溶蛋白(GSP)。白果蛋白中以清蛋白和球蛋白为主,醇溶蛋白、碱溶蛋白和复合蛋白含量很少。化学成分分析表明,制得的GAP、GGP和GSP中以GAP的蛋白质纯度高,氨基酸组成丰富、合理,属于优质蛋白质。活性试验结果表明GAP的抗氧化活性远高于GGP。
关键词：
白果 盐溶 盐析 清蛋白 抗氧化
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
葛智超 郎蒙 李燕
以裸藻为原料，将粗提后的裸藻多糖（EGPS）经DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析进行分离纯化，得到3个主要组分EGPS1-A、EGPS1-B、EGPS3-A，并对其进行纯度鉴定和抗氧化活性分析，将纯化后抗氧化活性较好的裸藻多糖进行分子量测定、单糖组成分析。纯度鉴定结果表明柱层析后得到的3个多糖组分纯度较高，红外光谱表明其均具有典型的糖类特征吸收峰。抗氧化实验表明3个多糖组分中EGPS1-A的综合抗氧化活性最高，EGPS1-A的分子量为136.8ku，单糖组成包括甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖，单糖组分间物质的量比值是0.072：0.43：0.049：0.01：0.26：0.62：0.53：0.18：1.01。
关键词：
裸藻多糖 分离纯化 单糖组成 抗氧化活性
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
何志全 沈文正 窦忠英
为探讨昆白系孕鼠子宫内膜上皮细胞的分离与体外培养条件、生长特点及其增殖规律,采用2．5 mg／mL胰蛋白酶+0．4 mg／mL EDTA分别以20,30,40 min消化子宫内膜,结合刮取法,对昆白系孕鼠子宫内膜上皮细胞的分离培养进行了研究。结果表明,随着消化时间的增加,所获得的细胞数目也增多,但细胞活力下降(噻唑兰法检测);消化30min所获得的细胞活力高、数目多,细胞比较单一;子宫内膜上皮细胞的活力随着细胞培养代数的增加而下降。
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
