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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王益兵 姚军虎 覃定奎 李朝云 杨小军
【目的】建立以流式细胞术结合Fluo-3-AM测定肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度的方法。【方法】分离培养21 d肉仔鸡肠道B淋巴细胞,以不同质量浓度(0,5,10,15,20μg/mL)脂多糖(LPS)刺激B淋巴细胞,测定B淋巴细胞刺激指数(SI),确定B淋巴细胞增殖的最适LPS质量浓度,建立肉仔鸡B淋巴细胞体外增殖试验模型。以最佳质量浓度LPS刺激培养72 h的肉仔鸡肠道B淋巴细胞为研究对象,应用Fluo-3-AM作为钙指示剂,建立肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度的流式细胞术测定方法,并用该测定方法探讨不同质量浓度(0,20,40,60,80μg/mL)二十碳五烯酸(EPA)对肉仔...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
黄雄 郭英华 田林 李全梓 岳志强
以买麻藤(Gnetum montanum)为内参,测定5种常用裂解液(Tris·MgCl_2、LB01、WPB、Otto’s、Galbraith’s)对桫椤(Alsophila spinulosa)细胞核的裂解效果,并通过比较桫椤和买麻藤流式细胞仪测定的荧光峰值,计算出桫椤的基因组大小。结果表明:5种裂解液中,WPB为桫椤最佳裂解液;桫椤基因组大小为6 003.25Mb,即2C DNA含量为6.138 pg。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张彤瑶 高雅松 张爱龙 周家生 宋慧
为探索不同含量金针菇菇脚（Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ ｓｔｅｍｂａｓｅ，Ｆｖｓ）添加到肉鸡饲粮中对肉鸡生产性能以及ｔ、ｂ淋巴细胞免疫功能的影响，采用１日龄健康ａａ肉鸡２７０只，随机分为５组，每组３个重复，每个重复１８只。试验分为：对照组（基础日粮）；抗生素组（基础日粮＋０．０５％黄霉素）；低剂量组（基础日粮＋２％Ｆｖｓ）；中剂量组（基础日粮＋４％Ｆｖｓ）；高剂量组（基础日粮＋６％Ｆｖｓ）。试验为期４２ｄ，检测指标为：生产性能，免疫器官指数，外周血ｔ、ｂ淋巴细胞增殖率（ｍｔｔ法测定），血清细胞因子ｉｌ－２、ｉｌ－４、ｉＦｎ－γ含量测定（ｅｌｉｓａ法测定），血清免疫球蛋白ｉＧ－ａ、ｉ．．．
关键词：
金针菇 肉鸡 生产性能 淋巴细胞 免疫
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
朴莹 江寅申 刘衍朋 余华海 高小炎
发现一种三级胺氮氧化物聚合物胶束（OPDEA-PS）具有革兰氏阳性细菌（G+）特异性粘附且对红细胞或其他血液成分粘附相对较弱的特性。利用这一特性研究了一种基于流式细胞术的快速血液细菌分型检测方法。结果显示，将不同比例的金黄色葡萄球菌（G+）和大肠埃希菌（G–）或肺炎链球菌（G+）和铜绿假单胞菌（G–）与血液混合，加入终浓度为0.01 mg/mL的~(Cy5)OPDEA-PS胶束，孵育10 min后用流式细胞术或平板计数法检测，得到流式检测准确率高于90%，平板计数法准确率低于80%。相比而言，流式检测法具有操作简单、快速高效、准确率高的优势。这种用流式细胞术快速分辨细菌革兰氏分型的检测方法将有助于临床上菌血症等急性血液细菌感染性疾病的细菌类型初判，达到及时诊断和治疗的目的。
关键词：
流式细胞术 细菌 血液感染 快速检测
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
武荣花 葛蓓蓓 王茂良 周燕 冯慧
以１８个中国古老月季为试材，以欧芹作为标准植物，采用２种不同的样本处理方法对其基因组大小进行测定，同时利用染色体计数法补充３个存在争议或尚未见报道的中国古老月季品种的倍性，为其基因组大小的确定提供必需的数据支持。结果表明：１）中国古老月季品种‘屏东月季’为二倍体（２ｎ＝２ｘ＝１４），‘桔囊’和‘牡丹月季’为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝２８）。２）２种样本处理方法通过单因素方差分析发现，６个品种间差异显著，１２个品种间差异不显著。故２种处理方法均可用于基因组大小的检测，但方法Ⅱ准确度高，受外界影响小，更适宜基因组大小的检测。方法Ⅰ操作简便，可用于大规模的倍性检测。３）１８个中国古老月季品种（含二倍体、三．．．
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
祁保民 尚迎辉 包汉勋
应用组织学技术对半番鸭肠道相关淋巴组织(GALT)M细胞的来源进行了研究;应用台盼蓝、辣根过氧化物酶(HRP)作为示踪物对GALT上皮细胞的功能进行了研究.结果表明:半番鸭GALT黏膜上皮最初为柱状上皮,柱状上皮逐渐脱离基底膜,基底膜部位的成纤维细胞转变为扁平上皮;鸭灌服台盼蓝后,在淋巴组织表面的扁平上皮细胞和肝脏的枯否氏细胞均出现了台盼蓝颗粒;肠腔内注入HRP后,HRP的阳性产物出现在扁平上皮和淋巴组织中;在柱状上皮内2种示踪物均未出现.可见,半番鸭GALT表面的M细胞来源于成纤维细胞.
关键词：
半番鸭 肠道相关淋巴组织 M细胞
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
沈筱芸 郭杏 黎远东 陈萍 王琦 冯雁
流式细胞技术是医学分子与细胞生物学研究领域中重要的检测技术之一。根据流式细胞仪检测教学与科研工作的要求,该文设计了一个应用流式细胞术测定金花茶水提物作用功效的综合类实验项目。通过该实验可以使学生掌握体外细胞扩增和培养技术,以及使用普通倒置显微镜观察评估不同浓度的金花茶水提物对人外周血T淋巴细胞的刺激增殖功效,同时学会采用流式细胞术检测和分析金花茶水提取物是否具有活化T淋巴细胞作用的技术方法,有助于学生更好地理解和掌握流式细胞术的基本原理和实际应用。
关键词：
流式细胞术 金花茶 天然提取物 淋巴细胞
[期刊] 水产学报
[作者]
王有基 林江兴 李琼珍 胡梦红 吴芳丽 沙毅杰 吕为群
为更好地了解翡翠贻贝血淋巴细胞的免疫功能和拓展该贝类在环境免疫学中的应用,本研究调查了其血淋巴细胞亚群分类,并运用流式细胞术分析了各个亚群的相关免疫功能。结果显示,在翡翠贻贝的血淋巴中主要存在3种血淋巴细胞,包括粒细胞、半粒细胞(分大小2种)和透明细胞。粒细胞占细胞总数的40.4%±8.4%,直径(7.49±1.32)μm,细胞内部充满颗粒;半粒细胞占34.6%±9.4%,直径(12.45±2.21)μm,内部含有部分颗粒,其中小半粒细胞直径(6.64±1.05)μm;透明细胞占15.6%±4.8%,直径(4.69±1.01)μm,细胞内部基本无颗粒。流式细胞分析显示,粒细胞在吞噬作用上最为活...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
孙敬锋 冼健安 张铁军 王安利
应用流式细胞术对墨吉对虾(Penaeus merguiensis)、南美白对虾(Penaeus vannamei)、斑节对虾(Penaeus monodon)三种对虾的血细胞类型进行了比较研究。根据其血细胞的前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)特征的不同将血细胞分群,FSC和SSC二维图分析表明三种对虾的血细胞都可分为三个亚群:透明细胞、小颗粒细胞、大颗粒细胞。同时还对各种类型血细胞所占比例进行了比较研究,发现各个亚群血细胞所占组成比例在三种对虾之间具有相似性。其比例均为:小颗粒细胞最多,约为45%~49%;透明细胞次之,约为26%~28%;大颗粒细胞最少,约为10%~12%。
关键词：
流式细胞术 对虾 血细胞 分群
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李晓琳 郭华 刘子臣 段滇宁 张亚群 韩俊源 张书霞
选取6头猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗原及抗体均为阴性的普通断奶仔猪,无菌取脾脏,制成单个细胞悬液进行体外培养,并分为PCV2组和对照组,PCV2组用PCV2与脾细胞共同培养,对照组加等量RPMI-1640培养液。分别于培养0、6、12、24和48 h后收取悬浮的淋巴细胞,用间接免疫荧光法检测PCV2感染淋巴细胞的情况,相对定量RT-PCR法检测淋巴细胞中TLR2、TLR3、TLR4、TLR7、TLR8和TLR9 mRNA的表达量,Western blot检测TLR3和TLR4的蛋白表达情况。结果显示:PCV2感染后,TLR2和TLR9 mRNA的表达量在1...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨姗姗 张秀娟
本文通过观察荷瘤小鼠淋巴细胞内钙离子浓度的变化,初步探究Ca2+作为第二信使在半枝莲多糖诱导淋巴细胞增殖过程中调控作用。采用荧光探针Fura-3/AM对细胞内的Ca2+进行标记,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的荧光强度变化。结果表明,半枝莲多糖各剂量组与空白对照组比较均对脾淋巴细胞中钙离子的浓度有显著提高作用(P<0.01),并呈现剂量依赖关系,而与阳性组比较各剂量组均低于阳性组,低、中剂量组有差异(P<0.05)。从试验结果看出,胞内Ca2+浓度的提高能促进淋巴细胞的增殖。
关键词：
多糖 淋巴细胞 钙离子
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨倩 练高建 黄国庆 陈杰
实验组肉鸡在灌喂半胱胺 2 0mg·kg-1(CY Ⅰ )和 80mg·kg-1(CY Ⅱ )后 ,应用鸡新城疫弱毒苗 (NDV) (Ⅳ系苗 )以口腔注入法进行免疫 ,检查小肠粘膜中分泌型免疫球蛋白A (sIgA)阳性细胞和上皮内淋巴细胞 (iIEL)数量的变化。结果表明 ,CY Ⅰ在NDV首免后第 4周 ,十二指肠中sIgA阳性细胞数量极显著增加 (P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘永祥 崔锦 程伟 朱宽佑 姜东风
【目的】研究日粮中添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对仔猪外周血T淋巴细胞的细胞毒活性影响，为将CLA作为免疫调节剂调控动物机体的免疫力和应用于畜禽乃至人类的营养实践提供参考。【方法】30头21日龄杜长大断奶健康仔猪按体质量相近、性别比例一致原则两两配对，随机分为对照组和CLA日粮组，分别喂给基础日粮和2%CLA日粮，每组5个重复，每个重复3头猪，63日龄时用肝素抗凝真空管前腔静脉采取血样，测定外周血T淋巴细胞亚群、细胞毒活性、穿孔素和颗粒酶B mRNA表达及脂肪酸组成。【结果】日粮添加CLA不影响仔猪外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+的数量(P＞0.0...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
黄克和 陈万芳
将１日龄罗曼系商品代蛋用健康公雏３６０羽随机均分成３组。对照组饲喂基础日粮，补硒Ⅰ组和补硒Ⅱ组在饲喂基础日粮的同时分别添加０．３和０．６ｍｇ／ｋｇ硒。分别于７，２１，３５和４９日龄采用微量全血培养３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定雏鸡外周血Ｔ淋巴细胞转化率，ＬＤＨ释放法测定ＮＫ细胞活力，荧光分析法测定血硒含量，化学法测定ＧＳＨ－Ｐｘ活性。定期称重并进行临床观察。结果表明，补硒能显著并持续地增强雏鸡外周血淋巴细胞对ＰＨＡ的应答能力和ＮＫ细胞活力。另外，还对全血淋转试验３Ｈ－ＴｄＲ掺入法进行了讨论。
关键词：
硒 雏鸡 淋巴细胞转化 自然杀伤细胞
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
华利忠 张书霞 孙运 代蕾 陈耿 吕春子
为探讨猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染仔猪的淋巴结和脾脏淋巴细胞内钙信号变化在细胞凋亡中的作用,选取19头PCV2抗原和抗体均为阴性的5周龄健康断奶仔猪,随机分成对照组(4头)和试验组(15头),试验组仔猪通过滴鼻接种PCV2,并于接种后14、21和35 d分别扑杀5头,对照组仔猪滴鼻同量PBS后当天扑杀。所有仔猪扑杀时均取腹股沟淋巴结及脾脏,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光分光光度法检测细胞内Ca2+浓度,孔雀绿比色测定法检测Ca2+-ATP酶的活性,荧光定量RT-PCR检测钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA转录水平。结果表明:所有接种病毒仔猪腹股沟淋巴结及脾脏细胞凋亡率均极显著高...
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